192955. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alkoxi-benzoil-csoporttal acilezett A- 21978C ciklusos peptid-származékok előállítására
17 192955 18 frakciókat gyűjtünk (1 frakció per min). A kívánt vegyületet a 2-6. frakcióban elualjuk. A frakciókét TLC (fordított fázisú szilikagél/Cis, víz/metanol/acetonitrij (3:3:4) eleggyel kifejlesztve, Vun IJrk-pormotező re- g ágenssel detektálva! alapján egyesítjük. Az egyesített frakciók bioautográfiája [szilikagél TLC-t, acetonitril/aceton/víz (2:2:1) oldószert és Staphylococcus aureus detektáló mikroorganizmust használva! azt mutatja, hogy a termék egyetlen bioaktiv komponensből áll (Rf=0,65). Az eljárással 0,421 g NTn>-p-(n-docecil-oxi)~benzoil-Norn-t-BOC-A—21 978C magot kapunk. 15 2. példa NTo>-p-(n-dodecil-oxi)-benzoil-A-21 978C mag előállítása 20 Nirp-p-(n-Dodecil-oxi)-benzail-Nom-t-BOC-A-21 978C magot (230 mg) 2% anizolt tartalmazó 5 ml trifluor-ecetsavban oldunk és 5 percig 0 ®C-on keverjük. Az oldat bepárlá- £5 sa után kapott olajat Et20~val (100 ml) eldörzsöljük. A szilárd anyagot elkülönítjük, levegőn szárítjuk és vízben (10 ml) felveszszűk. Az oldat pH-ját 3,25-ről piridinnel 7-re állítjuk be. A képződött oldalét liofilizálva 170 mg fehér amorf Nin.-p-(n-dodecil-oxi)-benzoil-A-21 0780 magot kapunk. Szilikagél TLO-n acetonitril/aceton/víz (2:2:1) oldószerrendszert használva és Van Urk-permetező reagenssel detektálva a vegyület R/-értéke 0,73. 3. példa Az (1) általános képletü vegyületek antibakteriális hatékonysága in vitro mutatható ki. Jellemző 1 általános képletű vegyületek antibakteriális próbájának eredményeit - melyekhez agarlemezen végzett standard korong-diffúziós eljárással jutottunk - az I. táblázatban közöljük. Az I. táblázatban az aktivitást a megfigyelt gátlási zónák méretével (átmérő mm-ben) fejezzük ki, melyekben a vizsgálandó vegyület a mikroorganizmus nö\ekedését gátolja, I. táblázat 1 általános képletü vegyületek antibakteriális aktivitása agarlemezen diffúziós próbával meghatározva Gátlási zóna mérete (mm)a Vegyület Staphylococcus aureus Bacillus subtilis Micrococcus luteus B. subtilis R R1 ATCC 6738P ATCC 6633 ATCC 9341 ATCC 6633b p-( n-dodecil-oxi)-benzoil H 20 13 18 20 p- ( n-dodecil-oxi)-benzoil t-BOC 20 10 15 22 aA vegyületeket vízben szuszpendáljuk 1 mg/ml koncentrációban; egy 7 mm-es korongot bemártunk a szuszpenzióba, majd az agar felületére helyezzük; inkubálás 24-48'1 25-37 °C "Por-tápagaron (minimal nutrient agar) tenyésztve Jellemző (1) általános képletű vegyüle- gg tek antibakteriális próbájának eredményeit - standard agar-hígításos próbát alkalmazva - a II. táblázatban foglaljuk össze. A II. táblázatban az aktivitást a minimális gátló koncentrációval (MIC) mérjük, vagyis azzal a gg legkisebb koncentrációval, amelynél a vizsgálandó vegyület gátolja a mikroorganizmusok növekedését. II. táblázat NTip-p-(n-Dodedil-oxi)-benzoil-A-21 9780 ant.ibiotikus aktivitása Kísrérleti mik- MIC rocrganizmus értékek3 Staphylococcus aureus XI.1 1 Staphylococcus aureus V41b 1 10
