192804. lajstromszámú szabadalom • Eljárás optokailag aktív imidazolil-propanol-származékok előállítására
15 192804 16 13. példa (R)-3-(butiltio)-2-(2,4-diklórfenil)-l-(imidazoll-il)-2-propanol-hidroklorid [(I) n = 3] előállítása 49,5 g (Xb’) képle tű 8. példa Bzerint előállított (R)-3-[/S/-2-(4-klór fenil )-izovaleriltioJ-2-(2,4-diklórfenil)-l-(imidazol-l-il)-2~ -propanol 500 ml metanollal készített szuszpenziójához hozzáadunk 240 g 10%-os metanolos káliurahidroxid-oldatot és 21,6 g n-butilbromidot -5 °C és 0 ®C közötti hőmérsékleten nitrogéngáz légkörben. A szuszpenziót ezen a hőmérsékleten keverjük 2 óra hoszszat, majd 30 °C-on 3 órán át. A metanolt csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, a maradékot 200 ml vizzel kezeljük és 200 ml 1,2- -diklóretánnal extraháljuk. A kivonatot először vizzel, utána 200 ml 12%-os hidrogénklorid-oldattal mossuk, majd vákuumban betöményitjük. A maradékhoz 100 ml toluolt és 35 ml metiletilketonl adunk, majd a szuszpenziót 15 °C-on 3 óra hosszat keverjük. A szuszpenziót szűrjük, a kiszűrt nyers terméket (25,7 g) vákuumban szárítjuk, amelyet metiletilketonból átkristályosítunk és így 21,8 g (R)-3-(butiltio)-2-(2,4-diklórfenil)-l(imidazol-l-il)-2-propanol-hidrokloridot [I: n = 3] kapunk színtelen tűkristályok alakjában. Kitermelés 55%. Op. 168,5-170 »C. [oc]i»ao: -89,8 ® (c = 1, metanol). 5. összehasonlító példa (S)-2-(4-klórfenil)-tioizovaleriánsav (IX) előállítása 296 g káliumhidroxid 1500 ml metanollal készített oldatába bevezetünk 180 g hidrogénszulfidot egy gázbevezető csőből 30 ®C alatti hőmérsékleten és az elegyet -5 ®C-ra hútjük. Ezután 510 g (S)-2-(4-klórfenil)izovalerilklorid 1000 ml toluollal készített oldatát -5 ®C és 10 ®C közötti hőmérsékleten adjuk az elegyhez. Az elegyet ugyanazon a hőmérséklen 30 percig keverjük és utána hozzáadunk 2000 ml vizet, majd 455 g 35%-ob hidrogénklorid-oldatot csepegtetünk hozzá. A toluolos réteget 500 ml vízzel mossuk és vákuumban betöményitjük, így 504 g (S)-2-(4- -klórfenil)tioizovaleriánsavat kapunk (IX) képletű vegyületként, amelyet tisztítás nélkül használunk fel a 8. példa szerinti reakciónál. Az (I) általános képletű optikailag aktív imidazolil-propanolok figyelemre méltó mikrobaellenes hatást mutatnak különböző mikroorganizmusok, különösen gombák ellen. A vegyületek közül számos fitopatogén gombák ellenes hatással is rendelkezik. In vitro és ln vivo kísérletek Borán az (1) általános képletű optikailag aktív imidazolil-propanol gombaellenes hatását f ( I) n = 31 hasonlítottuk össze megfelelő raceinát (A vegyület) és a megfelelő (S)-izomer (B-vegyület) hatásával. 1. kísérltil Az (I) vegyület in vitro kísérletben Módszór Candidu ulbicans-t, KB-8 törzset (klinikai izolátuin), Subouraud-féle agar ferde tenyészeten tartottunk szobahőmérsékleten. Az élesztősejteket 37 ®C~on Sarbouraud-féle agaron tenyésztettük és egy kacsnyil a 24 órás tenyészetből beoltottunk 4,5 ml Sabouraud-féle táptalajba, amelyet 37 “C-on tenyésztettünk 24 óra hosszat. E tenyészet 0. 5 ml aliquot mennyiségét beoltottuk kazein-hidrolizátum élesztőkivonat-glükóz közegbe (CYG közeg) A sejteket 37 ®C-on levegőztetve és rázatva tenyésztettük 48 óra hosszat. Ebből a tenyészetből 0,2 ml aliquot mennyiséget ismét beoltottunk 100 ml CYG közegbe és 24 óiéig tenyésztettük 37 ®C-on rázás közben. A pszeudomicéliuin növekedését elősegítő közeg nem - természetes aminosavakkal és nétriuinhidrogénkarbonáttal (2 g/liter) kiegészített Eagle-féle minimális eredeti közegből állt. Az élesztősejteket l,0xl05 */ml sűrűségnél ráoltottuk steril tenyésztő csőben (10x100 mm) elhelyezett 3 ml mennyiségű közegre. A sejteket 5% COa-t tartalmazó nedves levegőben tenyésztettük 37 ®C-on. A vizsgált vegyület hatását a következő körülmények között értékeltük: a tenyészeteket 10"*°-10'4 mól mennyiségű vizsgálandó vegyület hatásának tettük ki. A pszeudomicélium fejlődését fénymikroszkóppal állapítottuk meg 72 órával a beoltás után. A pszeudomicélium fejlődésének az akadályozásához szükséges hatásos adagokat az 1. táblázatban adjuk meg. 1. táblázat. In vitro gombaellenes hatás Imidazolil-propanol Legkisebb hatásos vegyület adag (I) (n = 3) vegyület (R)-izouier 10"® mól A) vegyület (racemét) 10"7 mól B) vegyület (S)-izoiner 10-« mól 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 9
