192784. lajstromszámú szabadalom • Eljárás daunorubicin- és doxorubicin-származékok, továbbá ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
2 192784 3 A találmány antraciklinglikozidoknak gyógyászatilag elfogadható savaddiciós sóik formájában való előállítására vonatkozik. E vegyültek (I) általános képletében X hidrogénatom vagy hidroxilcsoport, Rl jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport, Rz metoxicsoportot, és Rj hidrogénatomot jelent. A találmány szerinti vegyületek elnevezése az alábbiakban következik: 4-demetoxi-4’-metoxi-daunorubicin-hidroklorid (la: X=H, Rz=0CH3, R3=H), 4-demetoxi-4’-metoxi-doxorubicin-hidroklorid (le: R2=-OCH3, X=OH, R3=H). A találmány tárgya közelebbről megjelölve: eljárás az (I) általános képletü antraciklinglikozidok előállítására. A találmány szerinti eljárást az jellemzi, hogy 4-demetoxi-daunomicint (lásd a 4,046.878. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban) 2,3,6-tridezoxi-3-trifluor-acetil-amino-4-metoxi-L-lixo-hexopiranozil-kloriddal (lásd a 4,183.919. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban) kondenzálunk és így a (Ha) általános képletnek megfelelő védett oc-glikozidokat kapjuk, ahol R3=H. Ezután enyhe reakciókörülmények között lefolytatott alkálikus hidrolízissel eltávolítjuk az N-trifluor-acetil-védőcsoportot és így kapjuk az (la) képletnek megfelelő daunorubicinszármazékokat, melyeket kívánt esetben brómozással és a kapott 14-brómszármazék vizes nátrium-formiát-oldattal végzett kezelésével át lehet alakítani az (le) képletnek megfelelő doxorubicinszármazékokká. Az (la) képletű daunorubicinszármazékok átalakítását a megfelelő (le) képletü doxorubicinszármazékokká a 3.803.124 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett módszerrel végezzük. A találmány tárgyához tartoznak továbbá azok a gyógyszerkészítmények, melyek valamely (I) általános képletű antraciklinglikozidot vagy egy ilyen vegyület gyógyszerészeti szempontból elfogadható sóját tartalmazzák, gyógyszerészeti szempontból alkalmas hígítószerekkel és hordozóanyagokkal együtt. A találmányt az alábbiakban kővetkező példákkal és biológiai adatokkal részletesebben ismertetjük: 1. példa 4-Demetoxi-4'-metoxi-dau norubicinhidroklorid (I.a) 3,68 g 4-demetoxi-daunomicinont feloldunk 1,4 g l-klór-4-metoxi-N-trifluor-acetildaunózamint tartalmazó 100 ml vízszintes raetilén-dikloridban, és az oldatot 30 g (1A,Merck) molekula-szita és 1,3 g ezüst-trifluor-metán-szuifonét jelenlétében erősen keverjük. Tíz perc múlva a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 0,55 ml szim-kollodinnal semlegesítjük. Negyven perc elteltével a szuszpenziót szűrjük és a szerves fázist el5bb 0,01 n vizes sósavval, majd vízzel, ezt követően telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, végül semlegességig vízzel mossuk. Az oldószert ezután vákuumban elpárologtatjuk, a kapott maradékot 150 ml acetonban oldjuk, 600 ml 0,2 n vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk hozzá és 450 ml vízzel hígítjuk. Öt óra múlva az oldatot 0 X>on pH=8,5 értékűre beállítjuk és addig extraháijuk kloroformmal, amíg a kloroformos kivonat már nem színes többé. A szerves kivonatokat egyesítjük és 0,1 n metanolos hidro.gén-klorid-oldattal pH=5 értékűre megsavanyítjuk. Ezután az elegyet vákuumban kis térfogatra (150 ml) bepároljuk, amikorís 0,6 g tiszta 4-demetoxi-4'-metoxi-daunorubicir-hidroklorid kristályosodik ki. Az anyalúgot M/15 foszfátpufferrel pH=7-re pufferezett szilikagéloszlopon tisztítjuk, ehhez térfogat szerint 10:2:0,2 arányban készült kloroform-metanol-viz elegyet használunk. A tiszta anyagot tartalmazó eluátumot vízzel hígítjuk és a szerves fázist elválasztjuk, majd ezt vizzei mossuk és kis térfogatra bepároljuk. Ezt követően az anyagot 0,1 n metanolos hidrogén-klorid-oldattai pH=5 értékre megsavanyitjuk. így további termékhez, nevezetesen 0,4 g 4-demetoxi-4’-metoxi-daunorubicin-hidrokloridhoz jutunk, ami 189-190 °C-on (bomlás közben) olvad. A vékonyréteg-kromatográfiás analízist szilikagéllemezen (Merck F 254) végezzük, térfogat szerint 10:2:0,2 arányú kloroform-metanol-víz eleggyel. Rf=0,37; hozam: 20%, a kiindulási 4-demetoxi-daunomicinonra számítva. A nagy nyomáson végzett folyadékfázisú kromatográfiás analízist Cis mikrotöltetű oszlopon végezzük. Mobil fázisként térfogat szerint 69:31 arányú víz-acetonitril elegyet használunk, pH=2, 10% ortofoszforsavval, az átfolyási sebesség 1,5 ml/perc. A retenciós idő: 22 perc. FD-MS: m/z 511 (M‘)H-NMR (DMSO-de): 1,21 (d, CH3-C-5’); 2,27 (s, CHaCO); 3,48 (s, CH3O-C-4'); 4,88 (széles s, CH-7); 5,27 (széles s, CH-1'); 13,26 és 13,47 (2 s, fenolos OH). 2. példa 4-Demetoxi-4’-metoxi-doxorubicin-hidroklorid (le) Az 1. példa szerint előállított 4-demet.oxi-4’-nietoxi-daunorubicin-hidrok lóridból 0,5 g-ot feloldunk 8 ml metanol és 20 ml dioxán elegyében, majd az oldathoz brómot adagolunk és így a kiindulási vegyület 14- brómszármazékát állítjuk elő. Ezt a 14-3 r. 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
