192646. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új N-alkil-peptid-aldehidek előállítására
192 646 2 hatás (M. Verstraete és R. Verwilghen: in Drug Treatment, 2nd ed., Ed.:G.S. Avery, Churcill Livingstone, Edinburgh-London, 1980, p. 919) kiváltásához szükséges legkisebb dózisokat a III. táblázatban tüntettük fel. Referensvegyületként a H-D—Phe- Pro—Arg—H.H2S04 szerepel. Az adatokból látszik, hogy az N-alkil-tripeptid-aldehidek hatékonysága a kontroll-vegyületével megegyező vagy ahhoz hasonló. 1 III. táblázat N-Alkil-tripeptid-aldehidek véralvadásgátló hatása in vivo (új-zélandi hím nyulakon) Tripeptid-aldehida Legkisebb hatásos dózis Y —Pro—Arg—H.H2 S04 intravénásán orálisan mg/kglh mg/kg Y = H-D—MePhe 0,5 20 H-D-EtPhe 0,5 20 H-D—iBuPhe 0,5 20 D—Me2Phe 2,0 30 H-D-Phe (referens) 0,5 20 aA rövidítések jelentését lásd az I. táblázatnál, valamint D—Me2Phe jelentése NJs'-dimetil—D-fenilalanm-csoport és H—D-MeAle jelentése N-metil-D-alloizoleucin-csoport. A találmány értelmében az I általános képletű N- alkil-tripeptid-aldehideket úgy állítjuk elő, hogy az amino-terminálás felőli dipeptid-résszel mint sav-komponenssel acilezzük a guanidino-csoportján védett arginin-laktámot, a keletkezett védett tripeptid-laktámot védett tripeptid-aldehiddé redukáljuk, a védőcsoporto(ka)t eltávolítjuk, és végül az N-alkil-tripeptid-aldehidet valamilyen só formában elkülönítjük. A fentiek alapján a találmány eljárás az I általános képletű — mely képletben Rt, R2, Xxx, Pro, Yyy és A jelentése a fenti — új N-alkil-peptid-aldehid-sók előállítására, amely abban áll, hogy az N -védett arginin-laktámot a peptidkémiában ismert módon valamely N-terminálisán védőcsoporttal ellátott és N-mono-alkil- vagy N,N-dialkil—Xxx—Pro -OH dipeptiddel — ahol Xxx és Pro jelentése a fenti - kondenzáljuk, majd az így kapott védett tripeptid-laktámot védett tripeptid-aldehiddé redukáljuk, a védőcsoporto(ka)t eltávolítjuk és az N-alkil- vagy N,N-dialkil-tripeptid-aldehid sót izoláljuk. A kiindulási Xxx—Pro—OH dipeptidet a találmány értelmében az alábbiak szerint állíthatjuk elő: az N- terminálisán védőcsoporttal ellátott Xxx aminosavat kondenzáljuk a peptidkémiában ismert módon L-prolinnal, és az így kapott védett dipeptidet alkilezzük; vagy egy szabad N-terminálisú Xxx-Pro dipeptidet mono- vagy dialkilezünk. Eljárhatunk úgy is, hogy az amino-csoportján mono-alkilezett és védőcsoporttal el átott vagy dialkilezett Xxx aminosavat kondenzáljuk a peptidkémiában ismert módon L-prolinnal. A találmány szerinti eljárás egy előnyös foganatosítási módja szerint úgy járunk el, hogy a D-fenilalanil-L-prolin N-benzil-oxi-karbonil-származékát metilezzük metil-jodiddal nátrium-hidrid jelenlétében, a keletkezett N-benzil-oxi-karbonil-N-metil-D-fenilalanil-L-prolint vegyes anhidriden keresztül kapcsoljuk az Nco-benzil-oxi-karbonil-L-arginin-laktámhoz. A képződött védett tripeptid-laktámot litiunvalumín um-hidriddel N-benzil-oxi-karbonil-N-metil-D-fenila'anil-L-prolil-Nco-benzil-oxi-karbonil-L-arginin-aldehiddé redukáljuk, majd a védőcsoportokat kénsav jelenlétében végzett hidrogenolizisse! eltávolítjuk, és a keletkezett N-metil-D-fenilalanil-L-prolil-L-argininalcehid-szulfátot elkülönítjük. A találmány szerinti eljárás egy másik előnyös foganatosítási módja szerint úgy járunk el, hogy a D-feril-alanil-L-prolint formaldehid jelenlétében hidrogénezzük. A keletkezett N, N-dim etil-D-fenilalanil-L- prolint vegyes anhidriden keresztül Nw-benzil-oxil:arbonil-L-arginin-laktámhoz kapcsoljuk, a képződött védett tripeptid-laktámot litium-alumínium-hid■ iddel N, N-dimetil-D-fenilalanil-L-prolil-Nco-benziloxi-karbonil-L-arginin-aldehiddé redukáljuk, majd a rédőcsoportot kénsav jelenlétében végzett hidrogeno'izissel lehasítjuk, és a keletkezett N,N-dimetil-D‘enilanil-L-prolil-L-arginin-aldehid-szulfátot elkülönítek-A találmány szerinti eljárás egy további előnyös foganatosítási módja szerint úgy járunk el, hogy D-fenilalanint acetaldehid jelenlétében hidrogénezünk, a keletkezett N-etil-D-fenilalanint ellátjuk benzil-oxi-karbonil-védőcsoporttal, majd 2,4,5-triklórfenil-észterré alakítjuk, és L-prolinnal kondenzáljuk. A keletkezett N-benzil-oxi-karbonil-N-etil-D-fenilalanil-L-prolint vegyes anhidriden keresztül Nco-benzil-oxi-karbonil- L-arginin-laktámhoz kapcsoljuk. A képződött védett tripeptid-laktámot N-benzil-oxi-karbonil-N-etil-D-fenilalanil-L-pro] il-Ncc-benzil-oxi-karbonil-L-arginin-aldehiddé redukáljuk litium-alumínium-hidriddel, majd a védőcsoportokat kénsav jelenlétében végzett hidrogenolizissel lehasítjuk, és a keletkezett N-etil-D-fenilalanil-L-prolil-L-arginin-aldehid-szulfátot elkülönítjük. Redukálószerként egyéb komplex fémhidridet, így például nátrium-dihidro-bisz-(2-metoxi-etoxi)-aluminátot (Red-A1R) is alkalmazhatunk. A találmány szerinti eljárással előállított I általános képletű D,L,L-konfigurációjú peptid-aldehidek némely esetben D,L,D-konfigurációjú terméket tartalmazhatnak, amely azonban az anyagok terápiás felhasználhatóságát nem befolyásolja. A találmány foganatosítására az alábbi kiviteli példákat adjuk meg. A példákban megadott R1 értékeket szilikagél (Kieselgel G, Reana), Budapest) rétegkromatográfiával határoztuk meg az alábbi oldószerekben : 1. etil-acetát-piridin-ccetsav-víz (960 20:6:11) 2. etil-acetát-piridin-ecetsav-víz (480:206:11) 3. etil-acetát-piridin-ecetsav-víz (240 2 0 6:11) 4. etil-acetát-piridin-ecetsav-viz (120:206:11) 5. etil-acetát-piridin-ecetsav-víz (60:20:6:11) 6. etil-acetát-piridin-ecetsav-víz (30:20:6:11) 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 6C 65 4
