192646. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új N-alkil-peptid-aldehidek előállítására
1 192 646 I. példa v >■> N-me til-D -fenilakni I -L -prolil-L -arginin -aldehid - szulfát előállítása ■ - . 1, lépés: N-benzil-oxi-karbonil-N-metil-D-fenilalanil-L-prolil-Ncj-benzil-o'xi-karbonil-L-arginin-laktám 42,95 g (0,11 mol) N-t-butil-oxi-karbonil-Nco-benzil-oxi-karbonil-L-arginin-laktámot szuszpendálunk 110 ml vízmentes kloroformban és hozzáadunk 275 ml sósavas etil-acetátot (töménység: 0,11-0,15 g/ml) keverés közben. A reakcióelegyet 3 óra keverés után 400 ml/dietil-éterrel hígítjuk, a kivált kristályos anyagot kiszűrjük, kétszer 100 ml diétil-éterrel és kétszer 50 ml acetonnal mosfeiik, majd vákuum exszikkátorba helyezzük foszfor-pentoxid és kálium-hidroxid mellé. Egy óra szárítás után az anyagot feloldjuk 100 ml dimetilformamidban, lehűtjük -15 °C-ra, és ezen a hőmérsékleten hozzáadunk keverés közben 20 ml trietil-amint, majd még 10—15 ml trietil-amint, hogy a gőztérben a bázisfelesleg kimutatható legyen. A kapott szuszpenziót az alábbi vegyes anhidridhez adjuk. 50,9 g (0,1 mol) N-benzil-oxi-karbonil-N-metil-D- fenilalanil-L-prolin-ciklohexil-ammónium-sót feloldunk 200 ml dietil-éterben és 120 ml 1 n kénsavban. A dietiléteres fázist háromszor 30 ml vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és 25—30. 102 Pa nyomáson 40 t-os fürdőről bepároljuk. A maradékot és 11,2 ml (0,1 mól) N-metil-morfolint feloldunk 70 ml dimetilformamidban, leíáutjük —15 °C-ra, és ezen a hőmérsékleten hozzáadunk 13,2 ml (0,1 mól) izobutil-oxi-karbonil-kloridot. Az adagolás (3—5 perc) után még 5 percig keverjük, majd a keletkezett vegyes anhidridhez adjuk a fenti dimetil-formamidos szuszpenziót. A reakcióelegyet egy órán át kervetjük —15 °C-on és égy órán át 0 °C-on, majd 200 ml benzollal hígítjuk, és a kivált sókat kiszűrjük. A benzoldimetilformamidos oldathoz 150 ml vizet adunk, és a fázisokat elválasztjuk. A vizes-dimetilformamidos alsó fázist háromszor 50 ml benzollal kivonatoljuk. A benzolos oldatokat egyesítjük, ' háromszor 30 ml vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és 20—25 millibar nyomáson máx. 40 °C-os fürdőről bepároljuk. Az olajos maradékot feloldjuk 60 ml 8:2 arányú benzol-tetrahidro-furán elegyben és 750 g Kieselgel—60-t tartalmazó oszlopon kromatografáljuk a benzol-tetrahidro-furán elegyben. A frakciók anyagtartalmát szilikagél rétegkromatográfiával ellenőrizzük etil-acetát-piridin-ecetsav-víz (480:20:6:11) rendszerben, a kívánt termék Rf értéke 0,70-0,76. A főterméket tisztán tartalmazó frakciókat összegyűjtjük, 20—25 millibár nyomáson max. 40 °C-os fürdőről bepároljuk körülbelül 100 ml térfogatra. Ezt a párlási maradékot 500 ml petroléterrel elkeverjük. A keletkező szuszpenziót szűrjük, kétszer 100 ml petroléterrel mossuk, és vákuum exszikkatorban szárítjuk kénsav és paraffin-forgács mellett, 45 g'(6i>%) cím szérinti terméket kapunk. [a]20 = + 13,5° (c=l, te.tjgJjidrofuránban). R? = 0,70-0,76. ' ' '' ' ‘ Elemzési eredmény a C37H4207N6 (682,75) képletre vonatkoztatva: . .. ' számított : C% = 65,08; H% = 6,20; N% = 12,31 ; ' talált: C% = 65,4; H% = 6,4; N% = 12,1. 2. lépés: N-benzil-oxi-karbonihN-metil-D-fenilalanil - L - prolii -Nco - benzü -oxí -karbonil - L argi-nin-aldehid ;>! :ia tsrt-:? 34,15 g (0,05 mol) N-benzil-oxi-karbonil-N-metil- D-feniclanil-L-prolíl-Noj-benzil-oxi-karbonil-L-argininlaktámat (1. példa, 1. lépés) feloldunk 150 ml tetrahidro-furánban, lehűtjük —20 t-ra, és keverés közben hozzáadunk 0,0375 mól litium-alumíniurri-hidridet tetrahiiro-furánban oldva. A redukció előrehaladását rétegk: omatográfiával követjük etil-acetát-piridinecetsav-víz (24020:6:11) rendszerben.(a laktám, és az aldehid R1 értéke kb. 0,8 illetve 0,5), Szükség szerint adagolunk további litium-alumínium-hidrjdet, majd a reakcióelegyet hűtés és keverés közben pH = 2-re savanyítjuk 1 n kénsavval. Az oldatot zavarósodásig hígítjuk vízzel (kb. 300 ml), majd ldráZzuk kétszer 100 ml n-hexánnal. Ezután a vizes-tet.rahidro-futános oldatot kivonatoljuk kétszer 250 ml metilén-kloriddal. Az egyesített metilén-kloridos oldatokat mossuk kétszer 50 ml vízzel, kétszer 50 ml 5%-os nátriumhidrogénkarbonát-oldattal, ismét kétszer 50 ml vízzel, majd vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és 20—25 millibár nyomáson max. 40 Xl-os fürdőről betöményítjúk 50-60 ml-re. A maradékhoz 100 ml benzolt adunk, és az előbbivel azonos módon betöményítjük. A maradék oldatot 100 ml ciklohexánnal hígítjuk. A kivált csapadékot kiszűrjük, kétsz.ei 30 ml ciklohexánnal mossuk, és vákuum exszikká,torban szárítjuk paraffin-forgács mellett 27 g (70%) cím szerinti termeket kapunk, mely az elemanalízis szerint tartalmaz i mól ciklohexánt. — 7 -’'J R3 = 3,52-0,62. [a]20 = + 16,8° (c=l, tetrahidro-furánf . j- , ...... ban) ; .Elerrzési eredmény a C37H4407Ng.C6Hj'2 (768,93) képletre vonatkoztatva: imsi-ioim szán-ított: C% = 67,16; H% = 7,34;%/ï.W^3; ‘ talál- : C% = 66,6; H% = 7,2 fW 3 lépés: N-metil-D-fenilalanil-Hp/HljlfÉ-árgífiin-áldehid-szulfát -ít ia oiq i. ‘f -‘■ 23,1 g (0,03 mol) N-benzil-Oxi-íUrbo'njí-fÍ^métii- D - fi nildanil-I^prolil-Nw-benzil-oxf’-kSfB&fiiKL-afgi-0'0 nin-ildehidet (1. példa, 2. lépésj'íeloldünk Í5Ö ml etanólban, hozzáadunk 50 ml ion'njeffíe's 'fizet, 48 ml 1 n kénsavat és 3 g 10%-os Pd/C 1cataÍi>átort, majd hidrogénezzük. A reakció előrehájadásat vékony rétegkromatográfiával követjük azu çt iîUbèt at-p if i d in - -ecetsav-víz (30:20 6:11) rendszerijeik (a . kiindulási any íg, köztitermék és végtermék R1 értéke kb. 0,9, 0,7 illetve 0,4). A reakció végén1 á katalizátort kiszűrjük és háromszor 30 ml . íónmént’eS vízzel mo.suk. A szűrletet és mosófolféídékÓf egyesítjük, maid rotációs bepárlóban körülbelül 1Ö0 ml-re töniényítjük. A maradék vizes oldatot1 2ÖÓ ml-re híg tjük ionmentes vízzel, és ellenőrizzük, hogy a pH 6,0-6,5 között van-e. A pH-t szükség:áíetmt nrődO: sítjrk 0,1 n kénsawal, illetve OH^biklusú ibnfcáerélő gyantával (pl. AG 1X8), svégül az!oídatót lefagyasztjuk és liofilizáljuk. 12,4 g (75%) cím szerinti terméket kapunk. 7 R6 =0,39-0,47. [a]20 =-131° (c=l, vízben). f D -'lorrmor-Elemzési eredmény a C2 j H3203N6.7(8(H2SÖ4).2,5 (H,0) (547,37) képletre vonatkoztatva: ; -jt.— . . számított: C% = 46,07;H% = 7,13; N%-= 15,35; S% = 5,12; 2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
