192129. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az A-41030 jelzésű antibiotikumok előállítására
1 2 192.129 így egy másik vonatkozásában a találmány lehetővé teszi elválasztott malacok növekedésének előmozdítását, a malacoknak a táplálékukban körülbelül 5 5—100 ppm A41030 komplexet, vagy egy A41030 antibiotikus faktort, vagy ezek gyógy szerészetileg elfogadható, nem toxikus sóját adva, lehetővé teszi továbbá az elválasztott malacok növekedésének előmozdítását, a malacoknak mintegy 25—100 g A41030 antibiotikum komplexet, vagy ennek gyógyszerésze- 10 tileg elfogadható, nem toxikus sóját adva, az eleség 1000 kg-jában elkeverve. Az antibiotikus A41030 komplex gyógyszerészetileg elfogadható, nem toxikus só formájában a malacok ivóvizében is alkalmazható. Az A41030 antibiotikumok a táplálékhasznosítás hatékonyságának fokozására is alkalmasak kérődző állatoknál. Ismeretes, hogy kérődzőknél a szénhidrát-hasznosítási hatásfok növekszik olyan kezelés hatására, ameh az állatok bendő-flóráját inkább propionát-vegyületek, mint acetát- vagy butirátvegyületek képzésére serkenti (részletesebb ismertetés 20 céljából lásd: Church és munkatársai, „Digestive Physiology and Nutrition of Ruminants” 2. kötet, 622. és 625. oldal/1971/). Az antibiotikus A41030 komplexnek és az A41030 A faktornak a bendőben képződő illékony zsírsavak arányát módosító hatásosságát in vitro pro- 25 bákban mutatjuk ki az alábbi módszer segítségével. 4. próba Bendő-folyadékot nyerünk olyan bikától, melynél sebészi úton bendőbe nyíló sipolyt alakítottunk 30 ki. A bikát rostdús étrenden tartjuk, melynek összetétele a következő: 69,95% durva őrölt kukorica 10% őrölt kukoricatorzsa 8% szójababliszt (50% fehérje) gg 5% lucernaliszt 5% melasz 0,6% karbamid 0,5% dikalcium-foszfát 0,5% kalcium-karbonát 0,3% só 40 0,07% A és Dj vitamin premix 0,05% E vitamin premix 0,03% nyomelem premix A bendő-folyadék mintáját 4 rétegű sajtvásznon átszűrjük, és a szúrletet vákuumpalackban összegyűjtjük. A szűrőn fennmaradt darabos anyagot annyi fi- 45 ziológiás pufferben szuszpendáljuk, hogy a térfogat azonos legyen a bendő-folyadék eredeti térfogatával, és a szuszpenziót a sajtvásznon ismét átszűrjük. A használt puffer: 0,316 g/liter Na2HP04 0,152 g/liter KH2P04 2,260 g/liter NaHC03 0,375 g/liter KC1 0,375 g/liter NaCl 0,112 g/liter MgS04 0,038 g/liter CaCl2 0,008 g/liter FeS04-7H20 0,004 g/liter MnS04 0.004 g/líter ZnS04 -7H2 O 0,002 g/liter CuC04'5H20 0,001 g/liter CoCl2 Cheng és munkatársai, J. Dairy Sei. 38, 1225 /J 955/. A két szűrletet választótölcsérben összeöntjük és állni hagyjuk, amíg a darabos anyag a felszínre emelkedik. A tiszta fázist ezután elválasztjuk és a fenti pufferrel 1:1 arányban hígítjuk, majd pH 7,0-re állítjuk be. A hígított bendő-folyadék 10 ml-ét 90 mg finomra elporított, fenti összetételű rostdús táplálékot tartalmazó 25 ml-es lombikba öntjük. Kimérjük a vizsgálandó vegyületet és a fenti oldószerben feloldjuk. Az oldatot hozzáadjuk a finomra elporított táplálékot tartalmazó lombikokhoz és megszárítjuk. 4—4 kezeletlen kontroll lombikból álló két sorozatot is készítünk. A 4 kezeletlen kontroll lombik egyik sorozatát 15 óráig 38 °C-on inkubáljuk, a kísérleti lombikokkal együtt. A 4 kezeletlen lombikból álló másik sorozat a 0 perces kontroll, e lombikokban az erjedést azonnal leállítjuk a lombikok elkészítése után 2 ml 25%-os metafoszforsavoldatot adva mindegyik lombikhoz. Az összes mintát leülepedni hagyjuk, és a felülúszót gázkromatográfiás módszenei elemezzük acetát, propionát és butirát jelenlétére nézve. A 0 perces kontrollokban talált egyes illékony zs'rsavak analízisét levonjuk a kezeletlen kontrollok és a kísérleti lombikok analíziséből. A kapott értékek a 16 órás erjedési periódus alatt képződött egyes illékony zsírsavak mennyiségét tükrözik. A 26. táblázat adatai a kezelt lombikokban képződött illékony zsírsavak és a kezeletlen kontroll lombikokban képződött illékony zsírsavak arányát adják meg. Az adatok ilyen módon való kifejezése világosabban mutatja a bendő kémiai változásainak eredményeit, melyek az alkalmazott új táplálékhasznosítás-javító eljárás hatására következtek be. 26. táblázat Kezelt és kezeletlen minták zslrsavaránya Vegyület Koncentráció Acetát Propionát Butirát A4!030 5 mcg/ml 0,94 1,23 0,72 A41030 5 mcg/ml 1,03 1,33 0,59 A41030 5 mcg/ml 0,94 1,51 0,54 A41030A 2 mcg/ml 1,03 1,33 0,94 A41030A 1 mcg/ml ____1,0.1........ 1,31 0,66 23
