191749. lajstromszámú szabadalom • Eljárás haploid magok előállítására zárvatermő növényeknél haploidok előidézésével apomixis kiváltása útján
1 •191.749 2 Különösen olyan esetekben, amikor a haploid mag kevesebb endospermát tartalmaz, mint az azonos fajta normál magja, előnyösen különböző tápanyagokat és egyéb speciális körülményeket alkalmazunk, amelyek meggyorsíthatják és fenttarthatják a csíra növekedését valamint a kettős haploidokka alakulást és lehetővé teszik minél nagyobb számú haploid kettőződését. Erre a célra ismert tápanyagok, valamint a tenyésztési körülmények, így például a következők alkalmazhatók: szénforrások, ásványi anyagok, aminosavak, növekedésszabályozók stb., valamint különböző táptalajok, így például nedvesített szűrőpapír, agar, talaj stb. Ilyen eljárásokat ismertetnek például a következő irodalmi helyen: Raghavan V.: Experimental Embryogenesis in Vascular Plants, Academic Press, New York 1976. A fentieken kívül még aszeptikus körülmények alkalmazásával, a csíráknak a magból való eltávolításával, a hőmérséklet ellenőrzésével, a naphosszúság szabályozásával, előérleléssel vagy egyéb más fizikai módszerrel is fokozható a növekedés és a haploidok kettőzése. Amennyiben a találmány szerinti apomixikus szer alkalmazásával képződött gaméta kromoszóma állomány spontán módon nem kettőződik, vagy a kettőzés folyamatát gyorsabbá vagy egyenletesebbé kívánjuk tenni, kettőzést elősegítő szert, így például colchlnin-t alkalmazhatunk a szakterület ismert eljárása szerint. A találmány szerinti eljárás alkalmazásával homozigóta növényfajták állíthatók elő egy generáción belül akár homozigóta, akár heterozigóta növényekből és ez lehetővé teszi új fajták, valamint a csíraplazma és szaporító anyag előállításához szükséges idő csökkentését. így például a találmány szerinti eljárással új homozigóta növény állítható elő, ha a hibridet az apomixikus szerrel kezeljük, majd elválasztjuk és öszszegyűjtjük a haploid magokat, majd a haploid mag csíráját olyan körülmények között tenyésztjük, amelyek kedveznek a kettős haploidok kialakulásának, majd begyűjtjük a növényről a magokat. Még akkor is, ha azonos vagy különböző növényről termett mag genetikailag különböző, mindegyik genetikailag stabil és egy-egy forrását képviselik a homozigóta növénysomak. Az így nyert növényekből ezután a kívánt jellemzőkkel rendelkező fajtavariációk, csírasejtek és szaporítóanyagok állíthatók elő. A találmány szerinti apomixikus szert tisztán vegyületként is alkalmazhatjuk a tenyészközegben vagy a kezelendő növényen, vagy használhatjuk valamely, a hatóanyagon kívül még mezőgazdaságilag elfogadható hordozóanyagot is tartalmazó készítmény formájában is. A mezőgazdaságilag alkalmazható hordozóanyag megnevezés alatt értünk bármely olyan anyagot, amely a hatóanyagot oldani, diszpergálni vagy eloszlatni képes, annak hatását nem befolyásolja és saját magának káros hatása nincs sem a talajra, sem a berendezésre, a termékre vagy a mezőgazdasági környezetre. Az apomixikus hatású vegyületek kombinációja is alkalmazható a készítményekben. Ezek lehetnek szilárd vagy folyékony állapotúak vagy oldatok, így például nedvesíthető porok, emulgeálható koncéntrátumok, porok, granulátumok, aeroszólok vagy önthető emulziós koncentrátumok, és a hatóanyagon, valamint a hordozón kívül kívánt esetben tartalmazhatnak még felületaktív anyagot is. Általában kívánatos, különösen a levélzeten való alkalmazás esetén, hogy a készítményeknél még különböző segédanyagokat, így például diszpergáló, ragasztó és kötőanyagokat is alkalmazzunk. Ilyen anyagok például a John W. McCutcheon Inc. „Detergents and Amulsifiers Annual” c. közleményben összefoglalt anyagfajták. Az apomixikus anyagok bármely alkalmas oldószerben oldódnak, ilyenek például a víz, alkoholok, ketonok, aromás szénhidrogének, halogénezett szén hidrogének, dimetil-formamid, dioxán, dimetil-szulfoxid, de ezek 2—98 s%, előnyösen 20 -75 s% arányú keverék is. Emulgeálható koncentrátumok előállításánál az apomixikus szert valamely szerves oldószerben vagy oldószerkeverékben oldjuk valamely emulgeáló vagy felületaktív anyaggal együtt, amely lehetővé teszi a vizes diszperzió készítését. Oldószerként alkalmazhatunk például benzolt, xilolt, toluolt, metilezett naftalint, kukoricaolajat, fenyőolajat, O-diklór-benzolt, izoforont, ciklo hexanont, metil-oleátot, emulgeálható szerként például alkilfenolok vagy hosszúláncú alkoholok etilén-oxid-származékait merkaptánokat, karbonsavakat, reakcióképes aminokat vagy parciálisán észterezett többértékű alkoholokat. Vízoldható szulfátok vagy szulfonátok, mint például alkil- benzolszulfonátok alkálifém-sói vagy aminsói valamint zsíralkohol-nátrium-szulfátok felületaktív tulajdonságaik alapján emulgeáló szerként alkalmazhatók önmagukban vagy valamely etilén-oxid reakciótermékkel kombináltan, önthető emulzió koncentrátumok előállításánál hasonló anyagokat használunk vízzel és valamilyen stabilizálószerrel kiegészítve. Ez utóbbiként például vízoldható cellulóz-származékok vagy poliakrüsav vízoldható sói jöhetnek számításba. Az emulgeálható koncentrátumokban a hatóanyag koncentrációja általában 10 — 60 s%, az önthető készítményekben a 75 s%-ot is elérheti. Permetezésre alkalmas nedvesíthető porkészíímények előállításánál a hatóanyagot finomeloszlású szilárd anyaggal, így például agyaggal, szervetlen szilikátokkal vagy karbonátokkal vagy szilícium-dioxiddal, valamint nedvesítőszerrel, ragasztóanyaggal és/vagy diszpergáló anyaggal keveijük el. A hatóanyag koncentrációja ezekben a készítményekben általában 20-98 s%, előnyösen 40-75 s% között van. A diszpergálószer mennyisége általában 0,5 és 3s%, a nedvesítőszer menynyisége pedig általában 0,1 s% és 5s% közötti érték. A porkészítmények előállításánál a hatóanyagot finomeloszlású szilárd anyaggal keveijük el, amelyek lehetnek például növényi lisztek, szilikátok, szfiíciumdioxid, karbonátok vagy agyag-féleségek. Előnyös módszer például a porkészítmény előállítására, ha a nedvesíthető port finomeloszlású hordozóval keverjük el. A porkészítmény 20—80 s% hatóanyagot tartalmazhat, hígított változatban pedig általában 1—10 s%-ot. A granulátum-készítmény előállításánál általában úgy járunk el, hogy valamilyen granulált szilárd hordozót, így például Fuller-földet, vermikulitot, őrölt kukoricacsutkát, korpa vagy más gabonaféle héját az apomixikus anyagot tartalmazó oldattal impregnálunk, majd az alkalmazott könnyen illő oldószert elpárologtatjuk. A granulátum szemcsemérete tetszés szerinti lehet, általában 1,2 — 0,25 mm átmérőjű szemcséket használunk. A készítmények általában 2—15 s% hatóanyagot tartalmaznak. Az apomixikus anyagok sóit általában vizes készítmények formájában készítjük el, amelyek 0,05 - 75 s%, előnyösen 10-50 s% hatóanyagot tartalmaznak. A fenti készítmények bármelyikét tovább is hígíthatjuk kívánt esetben közvetlenül a felhasználás előtt. Egyes esetekben a készítmények hatása fokozható, ha a készítményekbe még bizonyos egyéb higítóanyagokat, így például glicerint, metil-etil-ceílulózt, hidroxi-etil-cellulózt, polioxietilén-szorbitán-monooleátot, polipropilénglikolt, poliakrilsavat, polietilén-nátrium* 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6
