191746. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, a vér koleszterin szintjét csökkentő fehérjék és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmény előállítására
1 191.746 2 2.TÁBLÁZAT Tulajdonságok T ö r z s e k 7CDV“ 1009 TW 9001 AD ADV 2003 10001 "5T5V 3001 "SÜV 7001 "ÄT5V 8001 A sejt formája r ^ i A Gram + vagy — b + b + 4-b + Hemolízis a a a a a a a Tenyésztés 10 °C-on + + ±+ . . Tenyésztés 45 °C-on + ■f ± ■f ± •b Tenyésztés 50 °C-on ++Hőálóság 60 "C-on 30 percig + f ++Növekedés pH=9,6 táptalajon ♦ + ♦ . +Metilénkék redukáló képesség + +b _ Zselatin cseppfolyósodása», Növekedés 6,5% NaCl-t tartalmazó táptalajon + +b» 409!' epét tartalmazó táptalajon a növekedés + b « bb Ammónia fejlesztés + ND** b ± Híppursav hidrolízis±♦ ' » Növekedés telluritot tartalmazó közegben^,•f-NDND . Növekedés TTC-t* tartalmazó táptalajon♦ . ND ND . Savképzés szén forrásból Glükóz ♦ ♦ b + + + b Esculín i * b * ± ND b Inulin.+ ± Laktóz + + ♦ ± b ± Glicerin+ ± _ Arabin óz b * b . Melezitóz+ ± ND , ND Szorbit+ b-Antigén csoport D D Q(D) K DD = 2,35 -trifenil -tetrazólium-klorid ■ú2 = Nem végeztük el. 3. Tenyésztési eljárások A találmány szerinti mikroorganizmusok tenyésztése szokványos módszerekkel történik. Például a baktérium sejtek Rogosa táptalajon való folyamatos aerób tenyésztéssel gyűjthetők össze és a táptalaj centrifugálásával nyerhetők ki. A Rogosa táptalaj összetétele a következő: Tnptikáz (bbl Microbiology Systems, USA) 10 . g Élesztő extraktum 5 g Triptóz (Difco, USA) 3 g Káli um-hi drogén foszfát 3 g Kálium-dihidrogénfoszfát 3 g Triammünium-dtrát 2 g Tween 80 1 g Glükóz 20 g dsztein hidroklorid 02 g Sóoldat 5 ml Desztillált viz 1 literre kiegészítve (pH 7.sterilizálás 121 °C-on-15 perdg) *,MgS04 -7Hí0 11,5 g FeSCU ■ 7 H2 0 0,68g 45 MnS04 • 2 HjO 2,4 g desztillált víz 100 ml A CRP fehérje előállítása A találmány szerinti CRP protein efeyik tipikus előállítási lehetősége a következő: 50 l> A mikroorganizmusok összegyűjtése A fent említett mikroorganizmus törzsek mindegyikét Rogosa táptalajba oltottuk, 37 °C-on inkubáltuk 5-10 órán keresztül keverés nélkül aerob körülmények között, így egy olyan fermen tlevet kapunk, amelynek adott életképes baktériumsejt koncentrá- 55 dója van. A fermentlevet folyamatosan kicentrifugáztuk 1200. fordulat/perc sebességgel. Az ösázegyűitött baktériumsejteket sóoldattal (0)S5% NaQ tartalom) mostuk 2—3 alkatommal. 2) A ’'aktérium sejtek szétválasztása a) A mosott sejteket fiziológiás sóoldatban mos- 60 tűk, és szétválasztás céljából 115 °C-on 10 percen ke-3