191661. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-ß-acilamido-3-cefem-4-karbonsav-származékok és az ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 191 661 V cenként történő hozzáadásával biztosítjuk a semleges reakciókörülményeket. A reakcióelegyet körülbelül 5 ml térfogatúra pároljuk be, és egy adszorbergyantán, például Amberlit ER-180® adszorbergyantán kromatografáljuk. Eluálószerként először vizet, majd 19 :1 arányú víz-izopropanol elegyet alkalmazunk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, vákuumban bepároljuk, végül nagyvákuumban liofilizáljuk. A keletkezett címvegyület 8% vizet tartalmaz és diasztereomer keverék, melyben Az R- és S-komponens aránya 2 :1. [a] = -30 ± 1 °C (0,582%, vízben); IR(nujol): 3300, 3190, 1760, 1660, 1600, 1515. 10. példa a) 3-(l,2,3-tiadiazol-5-il-tb-metil)-7ß-[(2R)-2-(2- amino-tíazol-4-il)-2-formamldo-acetamido]-3-cefem-4-karbonsav-mtriumsó 5,4 g (0,00692 mól) 3-(l,2,3-tiadiazol-5-il-tio-metil)- 7/3- [(2R) -2-(2- BOC-amino-tiazol-4-il) -2-formamido-acetamido]-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észter 7,5 ml anizol és 37,5 ml trifluor-ecetsav elegyével készített oldatát egy fél órán át keverjük szobahőmérsékleten, majd vákuumban legfeljebb 40 °C-on pároljuk be. Az olajos maradékhoz 160 ml étert adunk, keverés közben csapadék képződik, melyet szűrünk, éterrel mosunk, szárítunk, majd 40 ml metanol és 20 ml víz elegyében szuszpendálunk. A szuszpenzió pH értékét 2 n nátriumhidroxid oldat hozzáadásával 7,2-re állítjuk, a keletkezett oldatot vákuumban legfeljebb 40 °C-on bepároljuk, és a maradékot egy adszorbergyantán, például Amberlit ER-180® adszorbergyantán kromatografáljuk. Először /ízzel, majd 19:1 arányú víz-lzopropanol eleggyel eluáíunk. A még enyhén szennyezett terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, vákuumban legfeljebb 40 °C-on bepároljuk, és nagyvákuumban liofilizáljuk. További tisztítás céljából a liofilizátuinot (2,1 g) 8 ml vízben oldjuk, és 150 g szililezett szilikagélen, például 0,Odúi,063 nun szemcsenagyságú OPTI-UP C12® szilikagélen (Art. Mr. 2067, Antec AG, CH-4431 Benwil) kromatografáijuk. Először vízzel (500 ml), majd 97:3 arányú víz-aceto-nitril eleggyel (2000 ml) eluálunk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, vákuumban 40 °C-on bepároljuk és nagyvákuumban liofilizáljuk. A keletkezett b) címvegyület 5,9 % vizet tartalmaz, [a] = -55 ± 1 °C (0,491 %, vízben); IR(nujol): 3305, 3190, 1765, 1668, 1605, 1505. b) 3-(l,2,3-tiadiazol54l-tio-metil)-7ß-[(2S)-2-(2- amino-iiazol-4-il)-2-formamido-acetamido]-3-cefem-4-karbonsav-nátriumsó 3,1 g (0,00397 mól) 3-(l,2,3-tiadiazol-5-il-tiometil)- 7/3-[(2S)-2-(2-BOC-amino-tiazol-4-il)-2-formarnido-acetamido]-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észter 5 ml anizol és 15 ml trifluor-ecetsav elegyével készített oldatát fél órán át keverjük szobahőmérsékleten, majd vákuumban legfeljebb 40 °C-on bepároljuk. Az olajos maradékhoz körülbelül 50 ml étert adunk, keverés közben csapadék válik ki, melyet szűrünk, éterrel mosunk, szárítunk, és 30 ml metanol és 10 ml víz elegyében szuszpendálunk. A szuszpenzió pH-ját 2 n nátrium-hidroxid-oldat hozzá-14 I adásával 7,2 értékre állítjuk. Eközben tiszta oldatot nyerünk, melyet szűrünk, és vákuumban legfeljebb 40 °C-on, körülbelül 10 ml térfogatúra párolunk be. A maradékot egy adszorbergyantán, például Amberlit ER-180® adszorbergyantán (oszlopátmérő 3 cm, oszlopmagasság 30 cm) kromatografáljuk, először vízzel, majd 97:3 arányú víz-izopropanol eleggyel eluálunk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, és vákuumban legfeljebb 40 °C-on bepároljuk, majd nagyvákuumban liofilizáljuk. Azért, hogy a legkisebb szennyeződést is eltávolítsuk, a liofilizátumot körülbelül 15 ml vízben oldjuk, és 90g szililezett szilikagélen, például 0,04-0,063 mm szemcsenagyságú, OPTI-UP Ci2® szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk. Először vízzel' eluálunk (500 ml), majd 98:2 arányú víz-aceto-nitril eleggyel (1000 ml). A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, vákuumban legfeljebb 40 °C-on bepároljuk, és nagyvákuumban liofilizáljuk. A keletkezett c) címvegyület 6,4% vizet tartalmaz. [a] = +2± 1 °C (0,421 %, vízben); IR(nujol): 3305, 3200, 1762, 1668, 1605, 1515. c) 3-(l,2,3-tiadiazol-5 iI-tio-metil)-7ß [(2R)-2-(2- BOC-amino-tiazol-4-il)-2-formamido-acetamido]-3- ■ cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észter és 3-(l,2,3-tiadiazol-5-il-tio-metil)-7ß- [( 2S)-2-{ 2-BOC-amino-tiazoí-4-il)-2-formamido-acetamido]-3-cefem-4-karbonsavdifenil-metil-ész ter 9,0 g (0,0181 mól) 3-(l,2,3-tiadiazol-5-il-tio-meti!) 7/3-amino-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észter [elő állítását lásd J. Med. Chem. 22, 1214, (1979)], 5,46 g (0,0181 mól) (2R,S)-2-(2-BOC-amino-tiazol-4-il)-2-form amido-ecetsav és 3,26 g (0,0217 mól) 1-hidroxi-benztriazol (körülbelül 10% vizet tartalmaz) 100 ml tetrahidrofuránnal készített és —5 °C-ra hűtött oldatához 15 perc alatt 4,12 g (0,02 mól) diciklo-hexil-karbodiimid 40 ml tetrahidrofuránnal készített oldatát csepegtetjük. A reakcióelegyet egy órán át 0 °C-on, majd 14 órán át szobahőmérsékleten keverjük, ezután szűrjük, és a szüredéket tetrahidrofuránnal utánamossuk. A szűrlethez 60 g 0,06- 0,2 mm szemcsenagyságú szilikagélt adunk, és feliszapolás után forgóbepárlóban legfeljebb 40 °C-on szárazra pároljuk. A szilikagélre rakódott anyagkeveréket egy 1 kg-os 0,04—0,06 mm szemcsenagyságú szilikagéllel töltött Flash oszlopra (2:1, etil-acetát-hexán elegyben) visszük át. Etil-acetát-hexán eleggyel eluálunk, az elegyben a két komponens aránya a művelet során 2:1-től 9 :1-ig növekszik. Így egymást követően a következő termékeket eluáljuk: először a nyers R-címvegyületet, melynek Rf-értéke 0,18 (a vékonyréteg kromatográfiás vizsgálatot Merck gyártmányú 60 F254 jelű szilikagéllel bevont kész lapokon, etil-acetát-hexán 4:1 rendszerben végezzük), és olvadáspontja (felhabzás közben) körülbelül 120 °C, majd az R- és S-dmvegyület keverékét, végül a nyers S-címvegyületet, melynek Rf értéke 0,11. A keverék frakcióból metanol-etil-aceíát elegyből történő átkristályosítás után további S-címvegyületet nyerhetünk. A Flash-kromatografálással nyert két frakciót,és az átkristályösítássál nyert S-címvegyületet egyesítjük, és körülbelül 40 ml metanolban szuszpendáljuk. Ezután 3 órán át keverjük szobahőmérsékleten, szűrjük, a szüredéket kevés metanollal és éterrel mossuk. Az ily módon nyert S-címvegyület 164—166 °C-on olvad (felhabzás közben). g 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
