191368. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1,2,4-triazin- és pirazin-származékok előállítására
! 91 368 2 1. táblázat In vitro GABA és benzodiazepin (BZ) kötődés aktiválás* 1 Vegyiilet példaszáma sc50** GABA BZ 1 900 700 2 > 10 000 3500 3 > 10 000 > 10 000 4 NT > 10 000 5 > 10 000 4000 6 3,3 5,5 7 15 12 8 60 1000 9 10 19 10 110 14 11 500 1000 12 5000 > 10 000 13 43 60 14 5200 515 15 2000 600 16 875 1138 17 400 700 18 160 180 19 70 18 20 80 90 21 10 21 22 160 650 23 56 15 24 100 24 25 1 3 26 68 6 27 8000 1200 28 13 10 29 12 18 30 800 8500 31 160 520 32 > 10 000 8000 33 200 430 34 1300 1600 35 1200 400 36 7 10 * - A kísérlet végrehajtásának részletes leírását lásd: Horng and Wong, J. Neurochemistry>, 32 (5), 1379 (1979) és Wong és munkatársai, Brain Res. Bull, 5, (Suppl. 2) 853 (1980). ** — Nanomolós koncentráció, ami 50 % kötődés növekedést okoz. NT = nem vizsgált. Egyes vcgyületcket in vivo rendszerekben az alább leírt eljárásokkal is megvizsgáltunk, és az eredményeket a 2. Táblázatban foglaltuk össze. Metrazol indulót rángds inhibiálási kísérlet A vizsgált vegyületet 5 %-os acacia-oldatban szuszpendáltuk és mesterséges táplálással juttatúk három hím Cox standard törzsbe tartozó albino egérbe (18-24 g), majd a dózisszintet vizsgáltuk. Egy órával a vizsgált vegyidet beadagolása után vizes metrazol (pentilén-tetrazol) oldatot adagoltunk az egerekbe intraperitonealis módon 110 mg/kg dózisban. Az egereket ezután egy órán át megfigyelés alatt tartottuk, hogy a metrazol által indukált rángásl megfigyeljük. A 0 jel azt jelenti, hogy az egér nem mutatott semmilyen rángást, az 1 érték esetében az egéren kifejlődő rángásos görcs mutatkozott, a 2 érték esetében hajlítóizom görcsös rángás volt tapaszt ríható, 3 érték esetében feszítőizom erős rángás mutatkozott és 4 érték esetében az egér elpusztult egy órán belül. A három egérre kapott számokat minden vizsgált vegyületre és dózisszintre összegeztük. Az így kapott értékek 0 és 12 közöttiek lehetnek. Amennyiben szám értéke 6 alatti volt, akkor tekintettük a vizsgált vegyületet az adott dózisban aktívnak. A 2. táblázatban azokat a minimális szájon át adagolt dózisszinteket tüntettük fel (mg/kg), amelyeknél az egyes vegyületek aktívnak bizonyultak. Összehasonlításként sóoldattal vagy acacia-oldattal kezelt állatokat használtunk és azok a fjnti körülmények között 95 %-ban elpusztultak. A diazepam ! mg/kg dózis mellett mutatott aktív hatást ebben a vizsgálatban. Elektrosokkal indukált rángás inhibiálási kísérlet A hatóanyag beadagolás és a vizsgálati körülmények megegyeztek a fenti metrazol indukált rángás inhíbíciós kísérletben alkalmazottakkal, kivéve, hogy egy 0,1 másodperc hosszú, 5.0 mA elektrosokkot alkalmaztunk -zaruhártya-elektródokon keresztül a rángás kiváltására a metrazol helyett. Az állatok megfigyelése és az észlellek kiértékelése is a fenti kísérlet szerint történt azonnal az elektrosokk alkalmazása után. A 2. táblázatban az egyes vizsgált vegyületek minimális hatásos dózisait tüntettük fel ugyancsak az előzőekben leírtak értelmében, összehasonlításként általában 18 mA elektrosokk alkalmazása a kontroll állatok felében erős feszítőizom rántást váltott ki, 50 mA alkalmazása esetében pedig csaknem valamennyi állat elpusztult. A diazepam 1 mg/kg lózisban volt aktív. Étvágycsökkentő kísérlet A kísérletben három Cox standard törzsbe tartozó hím albino egérből álló állatcsoportokat lemértünk (18 —24 g) és éjszakán át koplaltattunk (16—18 óráig). Ezután újra lemértük és a vizsgált vegyületet beadagoltuk 5 %-os acacia-oldatta! készített szuszpenzióban mesterséges táplálással. Az orális beadagolás után 30 perccel az állatokat enni hagytuk szabadon egy óra hosszat. Az evési periódus után újra lemértük őket. A nyert tömegszázalékot összehasonlítottuk az éheztetés alatt vesztett tömeggel és a hányadost kiszámoltuk. A vizsgált vegyülettel nem kezelt állatok 35—55 % vesztett súlyt visszanyertek. Bármely vegyület, amely a vizsgált dózisszinten kevesebb, mint 10 % súly vissza nyerést eredményezett, aktívnak tekintendő. A 2. táblázatban megadtuk a vizsgált vegyületekre azt a minimális dózisszintet, amelynél aktívnak bizonyultak. A dextroamfetamin szulfát ebben a kísérletben kb. 2,5 mg/kg dózisban volt aktív. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
