190589. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4-klór-fenoxi-ecetsav-1,3-bisz-(dimetil-amino)-2-propil-észter és savaddiciós sói előállítására
3 190589 4 A találmány tárgya eljárás (1) képletű vegyület savaddiciós sói előállítására oly módon, hogy (II) általános képletű vegyületet - mely képletben R1 jelentése karboxil-, ciano-, alkoxi-karbonil-, 4-klór-fenoxi-acetil-oxi-karbonil-, halogén-karbonil-csoport vagy -COOMe1 általános képletű csoport, amely képletben Me1 alkálifém vagy araroónium-ion (III) általános képletű vegyülettel - mely képletben R2 jelentése hidroxil-CBoport, vagy halogén-atom -reagáltatunk az észterképzési reakciók bármelyikének alkalmazáséval, majd a képződő 4-klór-fenoxi-ecetsav-l,3-bisz(diroetil-amino)-2-propil-észtert savaddiciós sója - előnyösen sósav&s sója formájában - a reakcióelegyből kinyerjük. Ismeretes, hogy a 4-klór-fenoxi-ecetsav-2-dimetil-amino-etil-észter hatóanyag tartalmú gyógyszerkészítmény: a centrofenoxin, jól bevált centrális stimulánsként nyert alkalmazást a gyógyászatban. (Arzneimittel Forsch. 13 881 (1963) Ezen vegyület hatásmechanizmusára vonatkozó kísérletek sorén megállapítást nyert, hogy az erdetileg neuroenergetikumként ismert anyag a sejtek öregedési folyamatát is befolyásolja. A centrofenoxin alkalmazása sorén ugyanis azt tapasztalták, hogy az öreg állatoknál krónikus kezelés hatására csökken az agyi idegsejtek és a myokardium öregedési pigment tartalma (Nature 210 313 /1966/, jelentősen meghosszabbodik a kísérleti állatok életkora és javul az öreg állatok tanulékonysága.) Expl. Gerontol. 8 185 (1973b) A 8ejtöregedés membránhipotézise szerint, a posztmitotikus sejtek öregedésének első lépése a sejtmembrán passzív kélium-permeabilitásénak csökkenése, amit minden bizonnyal a sejtlégzés során keletkező agresszív szabadgyökök keresztkötő hatására lehet visszavezetni. (J. Theor. Bioi. 75 189 /1978/, Mech. Age. Dev., 9 237 /1979). A centrofenoxin esetében a hatóanyagból az agyszövetbe tartósan beépülő diroetil-amino-etanol résznek in vitro jelentős szabadgyők közömbősitő hatása van, ami feltehetően a molekulában található nitrogénatom elektronleadó képességével áll összefüggésben. (Mech. Age. Dev. 14 245 (1980) Az irodalomból ismert nitrogéntartalmú 4-klór-fenoxi-ecetsav-észterek - mint ahogyan a centrofenoxin is - egy helyettesített arainocsoportot tartalmaznak. (Bull. Soc. Chim. France, 1960 1786, Bioi. Aktív. Soedin, 1965 112, C.A. 63 17948c /1965) Elképzeléseink szerint a diroetil-aminocsoportok száménak megkétszerezésével lehetőség nyílik a centrofenoxinnál hatékonyabb molekula előállításéra, amely alkalmas lehet a sejtöregedési folyamat farmakológiai befolyásolására. Munkánk Borán, a helyettesített aminocsoportok megkétszerezését a 4-klór-fenoxi-ecetsav l,3-bisz(dimetil-amino)-2-propil-észterének előállításával valósítottuk meg. Az észterképzést az irodalomból ismert eljárások bármelyikének alkalmazásával elvégezhetjük. (S. Patai: The chemistry of carboxylic acids and esters. Wiley, London, 1969). A termék előálitható Így például a szabad savnak és az alkoholnak diciklo-hexil-karbodiimides reakciójával, vagy a savhalogenidnek (nitrilnek, -anhidridnek) és az alkoholnak egymásra hatásával, vagy a sav illetve sójának a reaktáns halloidszérmazékával történő reakciója révén, szerves oldószeres közegben. így az észterképzést elvégezhetjük a 4- -klór-fenoxi-ecetsav-klorid ( laitril—, -anhidrid, stb.) és az l,3-bisz(dimetil-amíno)-2-propanol reagáltatásával, amikor is a reakció 2-3 óra alatt lejátszódik, ha a reagáló anyagok szerves oldószeres (pl.: benzol, toluol, xilol) oldatát 60-80 °C-on kevertetjük. A képződött észtert célszerűen sósavas sója formájában nyertük ki és átkristályositással tisztítottuk. Az előállított vegyület akut toxicitási értékeinek meghatározását himnemű CFLP albino egereken végeztük int.raperitoniális és per os adagolás mellett. Intraperitoniálisan 600 mg/kg dózistól kezdve 50 mg/kg lépcsőkkel emelkedve dózisonként 5-5 darab 3 hónapos korú egér lett beoltva. A maximális dózis 800 mg/kg volt. 72 óta eltelte után a Lichtfield - Wilcoxon grafikus módszerrel meghatározott LDso érték az i.p. adagolásra 700 t 42 mg/kg-nak adódott. Per os. adagolás fiziológiás sóoldatban oldott 1800 mg/kg dózistól kezdve 400 mg/kg-os lépcsőkkel emelkedve 3400 mg/kg maximális dózisig történt, dózisonként 5-5 darab egéren, amelyek életkora 1,5 hónap volt. 72 óra múlva értékelve az eredményeket a per os. LDso értéke 2540 :t 300 mg/kg-nak adódott. A 4-klór-fenoxi-ecetsav-1,3-bisz( dimetil-amino)-2-propil-észter biológiai hatását tanulmányoztuk a túlélés viszonylatéban krónikus kezelés esetén. Így 5 darab CFY patkány 100 mg/kg fiziológiai sóoldatban oldott hatóanyagot kapót naponta i.p. A találmány tárgyául szolgáló vegyület alkalmazásával az állatok átlagos életkora mintegy 5 hónappal meghosszabbodott a kontrollcsoporthoz képest. Megvizsgálva az előállított új észterszármazék hatását a biológiai membránokra azt találtuk, hogy az agykéregből izolálható szinaptoszómák difenil-hexetriennel jelzett membránjainak fluoreszcencitt anizotrópia mérése alapján számított mikroviszkozitása jelentős mértékben növekszik az életkor előrehaladásával. 20 napos 100 mg/kg i.p. kezelés 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
