190507. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-szubsztituált azetidinil-szulfonsav-származékok előállítására
1 190 507 2 bepároljuk, A maradékot 95%-os etanollal oldjuk, és a pH-t piridlnnel 8,0-ra állítjuk. A fehér szilárd anyagot kiszűrjük, és megszárítjuk, így 5,2 g kívánt metil-észtert kamunk (95% kitermelés) amelynek olvadáspontja 210°C. c) eritro-3-Hidroxi-LD-aszparagin. 4 0 g (24,5 mmól) eritro-3-hidroxi-DL-aszparaginsav-p-metil-észtert oldunk 40 ml tömény ammónium-hidroxid oldatban, és éjszakán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, és a kapott szilárd anyagot forró vízben oldjuk. Az oldat pH-ját 6 n sósavoldattal 5,0- re állítjuk, és az oldatot vákuumban körülbelül 20 ml-re bepároljuk, és utána éjszakán keresztül 5°C-on hagyjuk állni. A fehér kristálytömeget kiszűrjük, és megszárítjuk, így 3,4 g kívánt terméket kapunk (95% tótermelés), amelynek olvadáspontja 233°C. d) N-<t(terc-Butoxi-karbonil)-etritro-3-hidroxi-DL-aszparagin-káliumsó. 7,0 g (47 mmól) eritro-3-hidroxi-DL-aszparagint szuszpendálunk 50 ml vízben, és 3 n kálium-hidroxid oldat hozzáadásával oldatba visszük. Az oldat pH-ját 10,0-re állítjuk, és ezen a pH-értéken tartjuk, amíg közben cseppenként hozzáadjuk 15,5 g (71 mmól) di(terc-butil)-dikarbonát 20 ml terc-butanollal készített oldatát. A reakcióelegyet éjszakán át pH 10,0-en keverjük szobahőmérsékleten. A terc-butanolt vákuumban ledesztilláljuk, és a vizes maradék pH-ját 6 n sósavoldattal 5,0-re állítjuk. Az oldatot vákuumban kis térfogatra bepároljuk, és utána a pH-t 6 n sósavoldattal 3,0-ra állítjuk. Az oldószert vákuumban ledesztillálva 20 g szilárd anyagot kapunk, amely a kívánt terméket szabad sav formában tartalmazza szervetlen sókkal együtt. (A kitermelés csaknem kvantitatív). A szilárd anyagból 2,9 g-ot vízzel és híg kálium-hidroxid oldattal 6,5 pH-n oldunk, és 100 ml HP-2- gyantán vízzel és utána aceton : víz (1 : 9) eleggyel eluálva kromatografáljuk. Így 1,8 g kívánt káliumsót kapunk. e) Aminoxi-metánszulfonsav-(tetrabutil-ammónium)-só. 1,02 g (3 mmól) (tetrabutil-ammónium)-hidrogén-szulfátot adunk 0,635 g (5 mmól) aminoxi-metánszulfcnsav 2 ml vízzel készített oldatához, és a pH-t híg kálium-hidroxid oldattal 10,0-re állítjuk. A vizet vákuumban ledesztilláljuk, és a maradékot diklór-metánnal eldörzsöljük. Szűrés után a szürletet nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepárolva 1,06 g (2,88 mmól) kívánt terméket kapunk. t)N-[N-o-(terc-Butoxi-karbonil)-eritro-3-hidroxi-DL-aszparagin]-0-(szulfo-metil)-hidroxil-amin-káliumsó. 0,792 g (2,77 mmól) N-cs{terc-butoxi-karbonil)-eritro-3-hidroxi-DL-aszparagin-káliumsót oldunk 3 ml v' ben, és az oldat pH-ját híg kénsavoldattal 2,4-re állítjuk. Az oldatot vákuumban bepároljuk, a maradékot vízben oldva kétszer bepároljuk, és utána benzolból ismét kétszer bepároljuk. Ezt a maradékot 4 ml vízmentes acetonitrilben és 8 ml vízmentes tetrahidrofuránban oldjuk, és lehűtjük 0°C-ra. Ehhez az oldathoz keverék közben 0,424 g (2,77 mmól) 1-hidroxi-bcnztriaçol-monohidràtot majd 0,572 g (2,77 mmól) N,N -diciklohexil-karbodiimidet adunk. Az elegyet 9°C-on 2 óra hosszáig keverjük, és utána 1,06 g (2,88 mmól) aminoxi-metánszulfonsav-(tetrabutil-ammónium)-só 5 ml acetonitrillel készült oldatát csepegtetjük hozzá. Az adagolás befejezése után a reakcióelegyet 0°C-on 4 óra hosszáig keverjük. A reakcióelegyet megszűrjük, és vákuumban bepároljuk. Hozzáadunk 40 ml vizet, és (fC-on szétdörzsöljük, amíg megszilárdul. A szilárd anyagot kiszűrjük, és a vizes szürletet körülbelül 3 ml-re bepároljuk. A pH-t 4,0-re állítjuk, és 80 ml kálium-ciklusú Dowex-5- ioncserélő gyantán kromatografáljuk. A megfelelő frakciókat egyesítjük, és kis térfogatra bepároljuk. A pH-t 3,4-re állítjuk, és az oldatot HP-2- gyantán kromatografáljuk, így liofilizálás után 502 mg kívánt terméket kapunk (46% kitermelés), amelynek olvadáspontja 145°C (bomlás). Az elemanalízis eredményei a Ci0H18N3O9SK . 0,71 HjO összegképletre: számított: C% 29,42, H% 4,80, N% 10,29, S% 7,85, mért: C% 29,42, H% 4,73, N% 20,04, S%7,45. g) N-[N-o(terc-Butoxi-karbonil)-eritro-3-hidroxi-DL-aszparaginil]-0-(szulfo-metil)-hidroxil-amin-(tetrabutil-ammónium)-só. 104 mg (0,263 mmól) 0 pontban előállított aszparagin-hidroxil-amin-származék-káliumsó 1 ml vízzel készített oldatához 2,63 ml 0,1 mólos (tetrabutil-ammónium)-hidrogén-szulfát oldatot adunk 0,5 mólos 5,5 pH-jú kálium-dihidrogén-foszfát pufferben oldva. Az oldatot szárazra pároljuk, és a maradékot diklór-metánnal eldörzsöljük. Szűrés és a diklór-metán ledesztillálása után 156 mg (0,26 mmól) kívánt termék marad vissza. h) (2a>3a)-3-[(terc-Butoxi-karbonil)-amino]-2-karbamoil-4-oxo-1-(szulfo-metoxi)-azetidin-káliumsó. 140 mg (0,234 mmól) előbbi g) pontban kapott (tetrabutil-ammónium)-sót oldunk 1,6 ml vízmentes diklór-metánban, és éjszakán keresztül keverjük 1 g szárított 0,3 nm (3A) pórusméretű molekulaszitával. Az oldatot fecskendővel leszívjuk, és 0,8 ml vízmentes diklór-metánnal hígítjuk. Ehhez az oldathoz keverés közben —50°C-on argongáz alatt 0,12 ml (0,85 mmól) trietil-amint adunk, majd ezt követően 0,08 ml (0,42 mmól) trifluor-metánszulfonsavanhidndet csepegtetünk hozzá. A reakcióelegyet 1 óra alatt hagyjuk -30°C-ra felmelegedni, és utána hozzáadunk 0,06 ml trietil-amint. A reakcióelegyet 5 perc múlva vákuumban bepároljuk, és a maradékot 2 ml acetonban oldjuk. Az oldatot 0°C-ra hűtjük, és hozzáadjuk 79 mg (perfluor-bután)-szulfonsavkáliumsó 1 ml acetonnal készített oldatát. Utána dietil-étert adunk hozzá, és a szilárd anyagot centrifugálással ülepítjük. Ezt a szilárd anyagot vízben 2 ml kálium-ciklusú Dowex 50 ioncserélő gyantával keverjük, szűrjük, és a vizet vákuumban eltávolítjuk. így a kívánt káliumsót kapjuk nyerstermékként, amely aminokat nem tartalmaz. Ezt a nyerstermék sót HP-20 gyantán vízzel eluálva kromatografáljuk, így liofllizálás után 15 mg kívánt káliumsót kapunk (20% kitermelés), amelynek olvadáspontja 149°C (bomlás). Az infravörös spektrum adatai (KBr): 1786 cm"1 Íj3-laktám karbonil) és 1696 cm'1 (sáv, amid és karbarnát karbonil). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5
