190214. lajstromszámú szabadalom • Eljárás növények regenerálásának elősegítésére szövettenyészetből
1 _ 190 214 2 szövettenyésztéshez szokásosan alkalmazott összetételű táptalaj lehet, amely fő komponensként ásványi sókat, szénforrást és adott esetben növekedésserkentő anyagokat, így vitaminokat, hormonokat tartalmaz. Találmányunk további részleteit a következő példákkal szemléltetjük, anélkül, hogy találmányunkat a példákra kívánnánk korlátozni. /. táblázni Ezüst-nitrát hatása a hajtásregenerációra embrióeredetű búza-kallusztenyészetben (Gk 806) 5 AgNO, ( mg/!) Kultuszok száma Regeneráló kullus/ok száma Átlagos liajláss/ám regeneráló kultuszonként I. Példa 10 (k mtroll) 10 18 18 13 2 18 6 Éretlen búzaembriókból kalusztenyészetet indítottunk a következő összetételű táptalajon: RM I: NH4NO3 6600 mg/1 KNO3 7600 mg/1 CaCI2 x 2H20 1753 mg/1 MgS04 (vízmentes) 723 mg/1 KH2P04 680 mg/1 1 RM II: FeS04 x 7H20 557 mg/100 ml EDTA 745 mg/100 ml RM III: H3 BO3 62 mg/100 ml MnS04 x 4H20 223 mg/100 ml ZnS04 x 4H20 86 mg/100 ml Kj 8,3 mg/100 ml Na2Mo04 x 2H20 2,5 mg/100 ml CuS04 x 5H20 0,25 mg/100 ml CoC12 x 6H20 0,25 mg/100 ml szacharóz 2 vegyes % agar 0,8 vegyes % 2,4-D 1 mg/1 inozit 100 mg/1 tiamin (B, vitamin) 1 mg/1 1 liter táptalaj elkészítésekor az RM I törzsoldatból 250 ml-t, az RM II-ből 5,0 ml-t és az RM III törzsoldatból 10 ml-t vettünk. Az RM I, RM II és RM III komponenseket közösen RM-sóknak nevezzük [Murashige és misai: Physiol. Plant 15, 473-397 (1962)]. A kallusztenyészeteket négy hetes növesztés után (1000 Ix, 25 °C) hormonmentes táptalajokra helyeztük, amelyek a 2,4-D és az inozit kivételével a fentivel azonos összetételűek voltak, de tartalmaztak még 1,10, illetve 100 mg/liter ezüst-nitrátot is. Kontrollként ezüst-nitrátot nem tartalmazó, egyébként azonos összetételű táptalajokon növesztett kalluszokat használtunk. Azt találtuk, hogy az ezüst-nitrátot tartalmazó táptalajokon növesztett kallusztenyészetekben mind a regenerációs gyakoriság, mind a regeneráló kalluszonkénti átlagos hajtásszám lényegesen felülmúlta a kontrolinál kapott eredményeket. Az ezüst-nitrát 10 mg/1 koncentrációban bizonyult a leghatásosabbnak. Ennek hatását Gk-806 búzafajta tenyészetében a következő 1. táblázatban szereplő adatok szemléltetik. 2. Példa 15 A kísérlet az 1. példával analóg módon megismételve, de etiléngátlóként kobalt-kloridot használva a következő, 2. táblázatban összefoglalt eredményeket kaptuk: 20 2. táblázat Kobalt-klorid hatása a hajtásregenerációra embrióeredetü búzakallusz-tenyészetekben (GK 806) CoC12-6H20 ;mg/l) Kalluszok Refncrájó / kall úszók szama szama Átlagos hajtásszám regeneráló kalluszonkénl _ 40 16 2,8 5 40 22 3.6 30 3. Példa A kísérletet az 1. példával analóg módon megis- 35 mételve, de etiléngátlóként dinitro-fenolt (DNP) használva a következő, 3. táblázatban összefoglalt eredményeket kaptuk : 3. táblázat . Dinitro-fenol hatása a hajtásregenerációra embrió- 40 eredetű búzakallusz-tenyészetekben (GK 806) DNP (mól) Kalluszok száma Regeneráló kalluszok száma Átlagos hajtáss/ám regeneráló kallus/onként _ 36 16 3.2 10 6 36 20 3,7 4. Példa Az 1. példában ismertetett kísérletei megismételtük azzal az eltéréssel, hogy az ezüst-nitrátot a 55 kallusztenyészetek növesztésére használt, 2,4-D-t tartalmazó táptalajhoz adtuk. A kapott eredményeket a következő, 4. táblázatban foglaljuk össze: 60 3
