189979. lajstromszámú szabadalom • Eljárás makrolid antibiotikumok előállítására
1 2 (közepei), 1309 (közepes), 1278 (kicsi), 1175 (közepes) 1151 (közepes), 1106 (kicsi), 1066 (váll), 1036 (intenzív) 1001 (közepes), 982 (közepes), 972 (váll), 946 (kicsi), 913 (kicsi), 891 (kicsi), 853 (kicsi), 826 (kicsi). A DMOT ultraibolya abszorpciós spektrumát semleges etanolban vizsgáltuk, elnyelési maximumot 283 nm hullámhosszon láttunk (E. 21500). A - DMOT szabad bázis specifikus forgatása (alfa tér : -62,75°C (konc.: 1,0, metanolban). A TDMOT 66%-os, vizes fimetíl-formamldban vizsgált elektrometrikus titrálása szerint 7,03 pK értékkel rendelkező titrálható csoporttal rendelkezik. A DMOT szabad bázis vízben gyengén oldódik: oldódik azonban poláris szerves oldószerekben, például acetonban, metanolban, etanolban, dimetil-formamidban, kloroformban, dimetil-szulfoxidban. A DMOT savaddiciós sói vízben jobban oldódnak, mint a DMOT bázis. A DMOT a tilozintól és a DMOT-től papír-kromatográflával és vékonyréteg-kromatográfiával megkülönböztethető. A fenti antibiotikumok Rr- és -értékeit a VIII. és IX. táblázatokban adjuk meg. A VIII. táblázatban megadott Ráérték a tilozinhoz viszonyított elmozdulást jelenti, ez utóbbi értéke 1,0. A kimutatást Bacillus subtilis bioautográfiával végeztük. VIII. Táblázat : A DMOT vékonyrétegkromatográfiás értékei Vegyület Ab Rf érték B C tilozin 0,53 0,53 0,67 DMOT 0,70 0,56 0,67 DOMT 0,48 0,17 0,24 3 = A futtatást szilikagél 60-nal végeztük (Merck, Darmstadt). b 3 Oldószer-elegy: A: etil-acetát és dietil-amin 96 :4 arányú elegye. B : aceton és etanol 2 :1 arányú elegye. C : kloroform és metanol 3 : 1 arányú elegye. IX. Táblázat A DMOT papír-kromatográfiás értéke3 Vegyület . £x érték tilozin 1,00 1,00 DMOT 1,50 . 1,09 DOMT 0,50 0,97 a * Papír: Whatman No. 1., a papírt 4,0 pH-jú, 0,75 mólos kálium-dihidrogén-foszfát pufferrel kezeljük, majd szárítjuk, b « Oldószer-elegy: D = etil-acetát, vízzel telítve, E > vízzel telített n-butanol 4. példa A dihldro-DMOT izolálása___ Ä 2. példában megadottak szerint előállított DMOT 50 mg-ját 25 ml 40%-os, vizes izopropil-alkoholban oldjuk. Ugyanakkor 10 ml 30%-os, vizes izopropil-alkohol ban 20 mg nátrium-bór-hidridet oldunk. Egy ml nátrium-bór-hldrid-oldatot adunk a DMOT-t tartalmazó oldathoz. 5 percen át keverjük a kapott reakcióelegyet, pH-ját foszforsavval, 7,5-re állítjuk be. majd ezt követően az izopropil-alkohol eltávolítására csökkentett nyomáson desztilláljuk. 50 ml kloroformot adunk a desztillációs maradikhoz. A vizes fázist pH-iát, 7,5« állítjuk be. Az extrakciót követően elkülönítjük a kloroformot, és csökkentett nyomáson szárazra desztilláljuk, amiután megkapjuk a dihldro-DMOT-t. 5. példa A dihldro-DMOT előállítása A 4. példában megadott módon előállított dihldro-DMOT-t a 3. példában megadott módon kezeljük, amiután dihldro-DMOT-t kapunk. 6. példa A DMOT előállítása az előzőektől különböző módon A DMOT-ból kiindulva állítjuk elő a DMOT-t, .oly módon, hogy a DMOT-t a tenyészlében kezeljük, enyhén savas körülmények között, ahogy azt a 3. példában megadtuk. A DMOT izolálását a DMOT kapcsán a 2. példában megadottak szerint végezzük. 7. példa A 2-O-acetil-DMOT előállítása 150 ml acetonban 5,0 g (6,9 mmói) DMOT-t oldunk, az oldathoz cseppenként, keverés közben és szobahőmérsékleten 0,84 ml (8,2 mmól) ecetsav-anhidridet adunk. 17 órán át keverjük a reakcióelegyet, majd csökkentett nyomáson desztillálva eltávolítjuk az oldószert. A desztillációs maradékot kevés etil-acetátban oldjuk, az oldatot szilikagélen (Waters Prep 500) kromatografáljuk. Az eluálást 4 1 etil-acetáttal végezzük. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, és csökkentett nyomáson térben desztilláljuk, desztillációs maradékként 80%-os kitermeléssel 4,2 g 2’-0-acetil-DMOT-t kapunk. FDMS «(meződeszorpciós tömegspektrum): m/e 764 (p+), UV-spektrum: : 284 nm (E = 21000), NMR-spektrum: 2,08 (s, acetil) 8. példa A 2’-0-acetiI4’’-fenil-acetil-DMOT előállítása 70 ml metilén-klorid és 0,8 ml piridin elegyében 2,7 g (3,5 mmól) 2’-0-acetil-DMOT-t oldunk, az oldathoz 0,56 ml (3,5 mmól) 30 ml metilén-kloridban oldott fenil-acetil-kloridot adunk cseppenként, keverés közben,szobahőmérsékleten. 6 óra múlva desztilláljuk a reakcióelegyet, a desztillációs maradékot metilén-kloridban oldjuk, az oldatot telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal extraháljuk. Elkülönítjük a szerves oldószeres fázist, nátrium-szulfáttal vízmentesitjük, szűrjük, és desztilláljuk. A desztillációs maradékot etil-acetátban oldjuk, és szilikagélből (Waters Prep 500) készült oszlopon kromatografáljuk. Az oszlopot 4 1 etil-acetáttal eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, csökkentett nyomáson szárazra desztilláljuk, amikor desztillációs maradékként 38%-os kitermeléssel 1,2 g 2’-acetil-4”-0-fenil-acetil-DMOT-t kapunk. c-rnu FDMS: m/e: 886 (P ♦ H+) UV-spektrum: : 279 nm (E = 12,700 végabszorpció), NMR-spektrum: 2,07 (s, acetil), 7-7,4 (m, fenil), 3,7 (s, benzü). 189 979 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 8
