189886. lajstromszámú szabadalom • Eljárás (2-oxo-1,2,3,5 -tetrahidro-imidazo [2,1-b] kinazolinil) -oxi-alkánsavamidok és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
29 189886 30 LDso-érléko orális beadás őseién is nagyobb, mini 1500 mg/kg. 15. példa A talál iné h y szerinti vegyülelek ciklikus 5 AMP-fuszfudicszteráz-aklivitásál, valaminl a vérlcuiczkék aggregációjál gallé halásál az alábbi módon hulározluk meg: Ciklikus AMP-foszfodieszleráz-aktivilás: A találmány szerinti vegyületcknck a 10 ciklikus AMP (adenozin-monofoszfáL)-f<jszfodieszteráz-aktivitást géllé hálását Filburn és Karú, Anulyl. Biochem., 52, 505-516 (1973) módszere szeriül határoztuk meg, szubsztrálumkénl 1 pmól ciklikus AMP-l alkalmaztunk. 15 Az emberi vérlomezkékből származó ciklikus AMP-foszfodicszlerázl humán donoroktól kaptuk. A vérlcmozkékel elkülönitettük, és mostuk (centrifugáié» útján), majd a sejtfalukat többször ismételt fagyasztás és felengedési 20 módszer és hipotóniás lízis útján roncsoltuk szét, majd az oldható enzimet nagysebességű ccntrifugálással különítettük cl. Az így kapott enzimet alikvot-részekben tároltuk, -20 “C hőmérsékleten. Vérlemezke-aggregáció; A vért a 30 mmól nátrium-citrátot tartalmazó evakuált kémcsövekbe gyűjtöttük össze. A vérlemezkékben gazdag plazmái ccnLrifugálás útján gyűjtöttük össze. Az aggregációl G. V. R. Born, J. Physiol., London, 162, 67P-68P (1962) lurbidimetriás módszerével figyeltük ineg. A ciklikus AMP-foszfodieszteráz-próba során kapott gátlás-értékeket (leofillinhez viszonyítva) uz alábbi 1. táblázatban foglaltuk össze. Ez a táblázat az ICso-értékeket humán vérlemezko foszfodieszlerázra és az ICís-ér léke két patkány szí v-foszfodiesz terázra vonatkozóan tartalmazza. 1. táblázat Ciklikus AMP foszfordieszleráz gátlása emberi vérlemezkékben és palkányszivben Vegyülelc> A = N- ahol a N helyettesítői: n IIelyzelb> Emberi vérleinezke ICso [nM] Patkányszív 1C« [nM] Viszonylagos huláserősség*) N-melil-N-ciklohcxil-3 7 12,5 260 21600 N-(2-hidroxi-elil)-N-ciklohexil-3 7 12,5 70 21600 N-melil-N-fenil-3 7 26,0 350 10400 N-uielil-N-benzil-3 7 26,0 240 10400 N,N-dibenzil-3 7 9,2 60 29300 N,N-diciklo-liexil-3 7 1,4 16 186000 N-morfolirio-3 7 1600 7000 169 N-piperidino-3 7 260 1500 1040 N-pirrolidirio-3 7 340 1700 791 N-telrahidrokinolinil-1-3 7 10,0 160 27000 N-lelrahidro-izokinolinil-2-3 7 180 520 1500 N-indolinil-1-3 7 76 260 3550 N-(t)-dokahidro—kinolinil— 1— 3 7 13,5 200 20000 N-perhexilenil-3 7 1,8 36 14600 N-metil-N-ciklohoxil-1 7 820 4400 330 N-melil-N-ciklohexil-4 7 4,6 22 58700 N-molil-N-ciklobexil-5 7 12,0 21 22500 N-metil-N-ciklohexil-6 7 16,0 45 16800 N-mcLil-N-ciklohexil-3 6 2000-135 N-mctil-N-ciklohexil-3 8 150-1800 16
