189637. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az angiotenzin átalakító enzim működését gátló prolin-származékok előállítására
1 2 189 637 szilikagél-oszlopon történő kromatografálással és egymásután 9 : 1, 7 : 3 végül 1 : 1 térfogatarányú diklór me tán metanol elegyckkel véglett eluálással tisztítjuk. Az utolsó oldószer-elegyből eluált termék alakjában 6,3 g N-/1-karboxi-3-oxo-3-fenilpropil/L-alanil-L-prolin-trifluor-acetát sót kapunk. 6. példa 0,8 g L-alanil-L-propil-tercier butil-észter és 10 ml diklór-metán oldatát 0,58 g tercier butil-4-/ -3-butil-indolil/-4-oxo-but-transz-2-enoát és 20 ml diklór-metán fénytől védett oldatához adjuk. A rcakcióelegyet a fény kizárása mellett szobahőmérsékleten 16 órán át állni hagyjuk, majd 10 mire bepároljuk és szobahőmérsékleten 24 órán át állni hagyjuk. Ezután további 0,75 g L-alanll-L-prolin-tercier butil-észtert adunk hozzá és a reakcióelcgyet 5 ml-re be pároljuk és szobahőmérsékleten, a fény kizárása mellett 2 napon át állni hagyjuk. Az elegy et szilikagél-oszlopon közepes nyomású folyadék kromatografálásnak vetjük alá, eluálószerként diklórmetán és metanol kezdetben 100 :1 térfogatarányú, majd 100 : 5 térfogatarányig változó összetételű elegyét alkalmazzuk. J\. terméket végül szilikagél-oszlopon történő „flash’ kromatografálással és 20 : 1 térfogatarányú diklórmetán-metanol eleggyel végzett eluálással tisztítjuk. Ily módon a N/3-/3-indo!iI/-3-oxo-l-tercier . butoxikarboníl-propilj-L-alanil-L-prolin-tercier butil-észter A-izomerjét kapjuk. Kitermelés: 0,6 g. 0,3 g, az előző bekezdés szerint előállított termékhez 3 ml trifluor-ecetsavat adunk 0°C-on. A reakcióelegyet szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni, majd 7 órán át ezen a hőfokon tartjuk és vákuumban szárazrapároljuk, miközben többször toluolt adunk hozzá és vákuumban újradesztilláljuk a trifluor-ecetsav utolsó nyomainak eltávolítása céljából. Olaj alakjában a N-(l-karboxi-3-/3- -indolil/-3-oxo-propil)-L-alanil-L-prolin-trifluor-a cetét A-izomerjét kapjuk. A kiindulási anyagként felhasznált tercier butilbutenoátot a következőképpen állíthatjuk elő: 3 g 3-bróm-acetil-indolt 9,5 g (tercier butoxikarbonil melilén)-trifenil-foszforán és 120 ml aoetonitril forrásban lévő oldatához adunk és az elegyet 2 órán át visszafolyató hűtő alkalmazása mellett forraljuk. Ezután 2,46 g tercier-butil-bróm-acetátot adunk hozzá és az elegyet 2 órán át visszafolyató hűtő alkalmazása mellett forraljuk, majd vákuumban szárazra pároljuk. A(j maradékot szilikagél-oszlopon történő ,/lash ’’-kromatografálással és növekvő metanol-tartalmú (1,2, végül 3 térfogat%) diklórmetán-metanol elegyekkel végzett eluálással tisztítjuk. A terméket diklór-metánnal keverjük és az elegyet szűrjük. A kapott szilárd tercier butil-4-/3 indolil/4-oxo-but-transz-2-enotátot (1,6 g) a Indulási anyagként történő felhasználásig fénytől védeni kell. 7. példa A 6. példában ismertetett eljárást azzal a változtatással végezzük el, hogy kiindulási anyagként a trarsz but 2-enoát és dipeptid et il-észtereit alkalmazzuk (L-alaníl-L-prolin-etil-észter-hidroklorid és egy mólekvivalens trietil-amin). Olaj alakjában a N-(l -etoxikarbonil-3-/3-indolil/-3-oxo-propil)-L-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50-alanil-L-prolin-etil-észter A-izomerjét kapjuk. Az A- izomer hidroldoridja 169,5-172°C-on olvad. [<x]D = -31,8° (c = 5%, etanol). Vékonyrétegkromatográfia: kovasavgél 60-on,60 : 20 : 10 : 35 térfogatarányú toluol/etil-acetát/ammónium-hidroxid, sűrűség 0,88 (etanol elegyben Rp = 0,60 és 50 : 50 térfogatarányú toluol-aceton elegyben Rp = 0,26. P. M. R. deutérezett dimetil-szulfoxidban: 6 9,6 (1H, csúcs), 8,4 (1H, d), 8,15 (1H, dd), 7J5 (1H, dd), 7,1-7,3 (2H, m), 4,0-4,5 (7H, m), 3,4-3,8 (4H, m), 1,7-2,3 (4H m), 1,5 (3H, d), 1,1 —1,3 (6H, 2 triplett). Tömegspektrum: jellemző ion 458 (\HI)* értéknél. Amennyiben a fenti reakciót a fény kizárása nélkül végezzük el, az A- és B-izomerek keverékét kapjuk. Az etil-transz-but-2-enoátot a 6. példa utolsó bekezdésében ismertetett eljárással analóg módon állítjuk elő, azzal a változtatással, hogy kiindulási anyagként a tercier butoxikarbonil-metilén-vegyület helyett (etoxikarbonil-metilén)-trifenll-foszforánt alkalmazunk. A kapott észtert felhasználásig fénytől szintén védeni kell. 8. példa A 6. példában ismertetett eljárást azzal a változtatással végezzük el, hogy kiindulási anyagként L-alanil-L-prolin-tercier butil-észter helyett N -tercier butoxikarbonil-L-lizil-L-prolin-tercier butil-észtert alkalmazunk. Olajok alakjában egymásután az alábbi vegyületeket kapjuk: Az Nr-(3j/3-indolil/-3-oxo-l-tercier butoxikarbonil-propil)-N -tercier butoxikarbonil-L-lizil-L-prolin -tercier butil-észter A-izomerje, a vegyületet szilikagél-oszlopon végzett közepes nyomású folyadékkromatografálással és kezdetben diklór-metánnal és a végén 40 : 1 térfogatarányú diklór-metanol eleggyel végzett eluálással tisztítjuk. Az Nr-(1 -karboxi-3-/3-indoUl/-3-oxo-propll)-L-lizíU-L-prolin-di-trifluoracetát A-izomerje, a vegyületet közepes nyomású folyadékkromatografálással és kezdetben 19 : 1 térfogatarányú diklórmetán-metanol eleggyel, végül 11 : 8 : 4 térfogatarányú metanol-diklórmetán-víz eleggyel végzett eluálással tisztítjuk. Az A-izomer hidroklorídja 166-167 °Con olvad, [c<]q = -10,8° (c = 5, etanol). P. M. R. deutérezett dimetil-szulfoxidban 6 8,4 (1H, d), 8,1 (1H, d), 7,5 (1H, d), 7,2 (2H, m), 4,2-4,4 (3H, m), 3,6-3,8 (3H, m), 3,45 (1H, m), 2,7 (2H, széles), 1,3-2,3 (10 H, m). Tömegspektrum negatív gyors atom bombázással: fő ion 457 (M-l)' értéknél. 9. példa A 6. vagy 7. példában ismertetett eljárást azzal 55 a változtatással végezzük el, hogy kiindulási anyagként a megfelelő etil- vagy tercier butil4-heterociklikus4-oxo-but-transz-2-enoátot és L-alanil-L-prolin-etil-észter-hidrokloridot és a sósav semlegesítése céljából 1 mólekvivalens trietil-amint alkalmazunk. Az 1. táblázatban felsorolt (XXI) 60 általános képletű vegyületeket kapjuk 5
