189578. lajstromszámú szabadalom • Eljárás marazin előállítására
1 189 578 2 Az V. táblázatban megadjuk az A-39 912, to- és a Streptomyces griseoaurantiacus ATCC 19 840 vábbá a Streptomyces (chainia) rubra ATCC törzsek közötti hasonlóságokat és különbségeket. 17 755, a Streptomyces griseoruber ATCC 23 919 V. Táblázat A fenti törzsek között talált hasonlóságok és különbségek Vizsgált tulajdonság A-39 912 ATCC 17 755 S. (chainia) rubra ATCC 23 919 S. griseoruber ATCC 19 840 S. griseoaurantiacus Spóraláncok morfológiája spirálok spirálok spirálok spirálok Spóra felülete sima sima sima sima Vegetatív micélium színe bíborvörös-fekete ; sárgásbarna. sárgásbarna, sárgásbarna, vörösesbarna barnásnarancs vörösesnarancs narancsszürkevörösesbarna Légmicélium színe vörös-szürke vörös szürke szürke Zselatin elfolyósítás + + _ ± Nitrát-redukció + — + + Fölözött tej peptonizáció hidrolizálás peptonizáció peptonizáció Melanoid-típusú színanyag termelése Kristályok képződése1 ISP no. 2.-f— — — ISP no. 3. + — — — Paradicsompaszta-zablisztagar + 2,6-diamino-pimelinsav izomerek LL LL LL LL 1 = undecil-prodiginin kristályok. A négy törzs több morfológiai és élettani tulajdonsága hasonló, a vegetatív micélium színe, a légmicélium színe és a különböző táptalajokon való granulátum-termelés kivételével, ahogy azt az V. 35 táblázatban megadtuk. A narazin-termelő Streptomyces granuloruber mikroorganizmust a Northern Regional Research Center, U. S.Department of Agriculture, Agricultural Research Service, Peoria, Illinois, 61 604 törzsgyüjteményében letétbe helyeztük, NRRL 12 389 számon. Ahogy az más mikroorganizmusoknál is szokásos, a narazint termelő Streptomyces granuloruber NRRL 12 389 törzs tulajdonságai variálnak. így például az NRRL 12 389 törzs vagy indukált mutánsai, vagy ezen törzsekből származó sejtek; ha narazin antibiotikumot termelnek, a találmány oltalmi köréhez tartoznak. A narazin Streptomyces granuloruber NRRL 12 389 törzzsel való előállításához különböző táp- 50 talajokat használhatunk. A táptalajok felhasználható szénforrást, nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmaznak. Szénforrásként glükózt, keményítőt és dextrint használhatunk. Nitrogénforrásként például peptont, enzimmel hidrolizált kazeint, 55 gyapotmag-lisztet vagy szárított húspeptont adagolhatunk. A mikroorganizmus növekedéséhez és fejlődéséhez szükséges nyomelemeket a táptalaj többi összetevője szennyező anyagként olyan koncentrációban 60 tartalmazza, hogy az elegendő a sejtek növekedésének és bioszintetikus igényeinek kielégítésére. Ugyanakkor a táptalajt előnyösen további oldódó szervetlen sókkal egészítjük ki, olyanokkal, amelyek nátrium-, kálium-, magnézium-, kálcium-, am- 65 mónium-, klorid-, karbonát-, foszfát-, szulfát- vagy nitrát ionokra disszociálnak. Az NRRL 12 389 törzzsel nagyobb mennyiségű narazint úgy állítunk elő, hogy süllyesztett, levegőztetett fermentációt végzünk. Kis mennyiségű narazin előállítására rázott lombikokban tenyésztünk A tankfermentációkor előnyösen vegetatív inokulumot használunk. A vegetatív inokulum előállítására kis mennyiségű táptalajt beoltunk a mikroorganizmus spóráival, micéliumaival vagy fagyasztva-szárított tenyészetével, ily módon friss, aktívan növekvő tenyészetet kapunk. A vegetatív inokulummal ezután nagyobb mennyiségű tápta- 45 lajt oltunk, ahol, megfelelő idő eltelte után a narazin antibiotikum termelése megindul. A még be nem oltott fermentációs táptalaj pH- ját általában 6,5 és 7,5 közötti értékekre állítjuk be. A narazint termelő mikroorganizmust széles hőmérsékletintervallumban növeszthetjük, részletesebben 25 °C és 43 °C között. Az NRRL 12 389 sorszámú mikroorganizmussal 30 ”C hőmérsékleten kapjuk az optimális narazintermelést. Ahogy az a süllyesztett, levegőztetett fermentációknál szokásos, a tenyészeten steril levegőt vezetünk át. A mikroorganizmus jó növekedését úgy biztosítjuk, hogy a fermentoron a táptalaj egységnyi térfogatára számítva percenként 0,2-1,0 térfogategységnyi levegőt vezetünk át. Egy 10 liter térfogatú fermentorba előnyösen 0,2 térfogat/táptalaj/perc levegőt vezetünk át abban az esetben, ha a keverő szokásos méretű és percenként 400-at fordul. Esetenként kevés (literenként 0,2 ml) habzásgátló anyagot, például propilén-glikolt adagolunk 5
