189550. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a humán szérum-prealbumin N-terminális részével analóg szerkezetű, az immunológiai ellenállóképességet növelő hatású deka-, undeka-, dodeka- és tridekapeptidek előállítására
1 189 550 2 vagy pedig cseppfolyós ammóniában nátriummal történő redukció útján is. Olyan esetekben, amikor a peptid benzhidril-amino-gyantához van kötve és a C-terminuson amidot tartalmazó termékhez akarunk jutni, a védöcsoportok eltávolítása és a pepiidnek a hordozó gyantáról való lehasítása egyidejűleg történhet cseppfolyós hidrogén-fluoriddal és anizollal a fent leírt módon való kezelés útján. A védőcsoportoktól teljesen mentesített pepiidet azután sorozatos kromatográfiai műveletekkel tisztíthatjuk ; erre a célra acetát-alakban levő gyengén bázisos gyantán lefolytatott ioncsere, hidrofob adszorpçiôs kromatográfia szabad polisztirol-divinilbenzől (például Amberlite XAD) gyantán, szilikagél adszorpciós kromatográfia, ioncserés kromatográfia karboximetil-cellulózon, megoszlásos kromatográfia például Sephadex G-25 gyantán, ellenáramú megoszlatás, nagyteljesítményű folyadékkromatográfia, különösen pedig fordított fázisú nagynyomású folyadék-kromatográfia oktil- vagy oktadecil-szilil-szilíciumdioxid kötött fázisú oszlop-tölteten, vagy e módszerek különböző kombinációi alkalmazhatók. Olyan esetekben, amikor a pepiidbe egy vagy több D-aminosavat kívánunk bevinni, gyakran előnyösebb a költségesebb rezolvált D-enantiomer helyett a D- és L-aminosav racém elegyének alkalmazása. Az említett elegy bevitele után a megfelelő peptidek diasztereomer elegyét kapjuk. A diasztereomereket a szakmában jól ismert módszerekkel különíthetjük el egymástól és nyerhetjük ki tiszta állapotban, például a fentebb említett kromatográfiai módszerek alkalmazásával. Minthogy azonban a diasztereomerek száma minden egyes D/L enantiomer-pár bevitele esetén kétszeresére növekszik, ezt az elválasztási és kinyerési műveletet minden esetben olyankor célszerű végezni, amikor a közbenső termék előállításához még csak egy D/L elegyet alkalmaztunk, tehát a következő D/L enantiomerpár bevitele előtt. Ezért a végtermékkel csak olyan esetben végezzük az enantiomerek elválasztását, amikor a szintézis során csak egy D/L elegyet alkalmaztunk ; ha a szintézis-lépések során egynél több aminosavat alkalmaztunk D/L elegy alakjában, akkor az egyes ilyen lépések után már a közbenső termékkel el kell végezni az enantiomerek szétválasztását. A fenti általános képleteknek megfelelő peptidek előállítására a találmány értelmében tehát oly eljárást alkalmazunk, amelynek során: valamely védett peptidről eltávolítjuk a védőcsoportokat és adott esetben magát a pepiidet lehasítjuk a kovalens kötéssel kötött szilárd hordozóról és így a találmány szerinti dekapeptidet, undekapeptidet, dekapeptidet illetőleg tridekapeptidet vagy annak valamely sóját kapjuk, és kívánt esetben a szabad pepiidet valamely gyógyászati szempontból elfogadható sóvá alakítjuk, vagy- a kapott peptidsót valamely más, gyógyászati szempontból elfogadható sóvá alakítjuk, vagy a kapott peptidsót a megfelelő szabad pepiiddé bontjuk el. A fentiek értelmében tehát a találmány eljárás az (I) általános képletü peptidek H-Gly-B-Thr-A'-Thr-A"-D'-Ser-Lys-X-Y (I) I R - ebben a képletben A’ jelentése Gly, D-Ala- vagy D-Leu, A" jelentése Gly vagy D-Ala, B jelentése Pro vagy Thz, D’ jelentése Glu vagy Gin, R jelentése hidrogénatom vagy rövidszénláncú alkilcsoport, mely utóbbi a lizilcsoport £-aminocsoportjának egyik hidrogénatomját helyettesíti, X jelentése Cys, Ala, ABU vagy Cys(Me), Y jelentése —OH, —NH2, Pro—OH, Pro-Leu—OH, Pro-Leu-Met—OH, azzal a megszorítással, hogy ha Y jelentése más mint hidroxil- vagy aminocsoport, akkor B jelentése Pro, A’ és A" jelentése Gly, D’ jelentése Glu és X jelentése Alá, Cys vagy Cys(Me) - és gyógyászati szempontból elfogadható sóik előállítására, amelynek során valamely (II) általános képletü védett pepiidet (P'^-Gly-B-Thr-A'-Thr-A"- D' -Ser-Lys - X -(Y')r-'(S), (II) - ebben a képletben A’, A", B, D’, X és R jelentése megegyezik a fenti meghatározás szerintivel, Y’ jelentése —OH, —NH2, Pro, Pro-Leu, Pro- Leu-Met, Pro—OH, Pro-Leu—OH vagy Pro- Leu-Met—OH, mimellett az (I) általános képletnél az Y jelentésével kapcsolatban adott meghatározás értelemszerűen az Y’-re is vonatkozik, P1, P2, P3, P4 és P5 a peptidkémiában szokásos oldallánc-védőcsoportokat képviselnek, amelyekben P1 az e-aminocsoport védelmére alkalmas védőcsoport, a P2 jelek egymástól függetlenül az oldalláncbeli hidroxilcsoportok védelmére alkalmas védőcsoportok, P3 az oldalláncbeli karboxilcsoport védelmére alkalmas védőcsoport, P4 az oldalláncbeli £-aminocsoport védelmére alkalmas védőcsoport, P5 az oldalláncbeli szulfhidrilcsoport védelmére alkalmas védőcsoport, (S) vagy a karboxilcsoport védelmére alkalmas, a peptidkémiában szokásos védőcsoport, vagy pedig egy a peptidkémiában szokásos szilárd polimerhordozó, az a, b, c, d, e, f és g jelek egymástól függetlenül a 0 vagy az 1 számot képviselik, de a, b, c, d, e és g közül legalább az egyiknek a jelentése 1 -a) ha a (II) általános képletben (S) jelentése a karboxilcsoport védelmére alkalmas védőcsoport, a védöcsoportok lehasítására alkalmas vegyszerrel kezelünk, vagy b) ha a (II) általános képletü kiindulási vegyületben g = 1 és S szilárd polimer-hordozót képvisel, akkor a (II) általános képletü kiindulási vegyületet a szilárd hordozót lehasító vegyszerrel való kezeléssel egyidejűleg az összes védőcsoportok lehasítására alkalmas vegyszerrel is kezeljük; és/vagy az (I) általános képletnek megfelelő vegyületet - ahol A’, A ", B, D’, R, X és Y jelentése megegyezik a fenti meghatározás szerintivel - valamely alkalmas szerves vagy szervetlen savval való kezelés útján egy gyógyászatilag elfogadható sóvá alakítjuk át; vagy 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 S0 35 6
