189550. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a humán szérum-prealbumin N-terminális részével analóg szerkezetű, az immunológiai ellenállóképességet növelő hatású deka-, undeka-, dodeka- és tridekapeptidek előállítására
1 189 550 2 n-propil-, izopropil-, n-butil-, izobutil-, szek-butilvagy terc-butil-csoport értendő. ^ „Rövidszénláncú acilcsoport” alatt oly —C—R’ általános képletű csoport értendő, amelyben R’ a fenti meghatározásnak megfelelő rövidszénláncú alkilcsoportot képvisel. „N-acilezett” aminocsoporton egy fövidszénláncú alkanoilcsoporttal amid-kötésben álló aminocsoport értendő. „N-alkilezett” aminocsoporton oly aminocsoportot értünk, amelyben egy vagy mindkét hidrogénatom rövidszénláncú alkilcsoporttal van helyettesítve. Az „N-acilezett” megjelölést az „NAc” rövidítéssel jelöljük; az „N-acilezett” aminosav-csoportok megjelölésére az „NAc” rövidítést írjuk az aminosav neve vagy rövidítése elé. Az „N-alkilezett” megjelölés rövidítése NR’, az N-alkilezett aminosavcsoportok megjelölésére az NR’ rövidítést tesszük ki az aminosav neve vagy rövidítése elé. Ha valamely specifikus alkilcsoportot adunk meg, akkor ennek konvencionális rövidítését alkalmazzuk az R’ helyett, például NMe, NEt stb. alakban. így például az acilezett glicilcsoport rövidítése NAc- Gly; az alkilezett glicilcsoport rövidítése NR’-Gly; ha a glicilcsoport az a-aminocsoporton metilcsoporttal van helyettesitve, akkor ennek rövidített megjelölése NMe-Gly. Olyan esetekben, amikor a peptid-láncban a karboxilcsoport amid-alakban van, akkor a megfelelő amino-acil-csoport rövidítéséhez közvetlenül hozzáírjuk az NH2 megjelölést; így tehát az olyan HGly-Pro-Thr-Gly-Thr-Gly-Glu-Ser-Lys-Ala pepiidet, amelyben a C-terminális alanin amid-alakban van, a következő módon jelöljük : H-Gly-Pro-Thr- Gly-Thr-Gly-Glu-Ser-Lys-AlaNH2. Ha az N-terminális aminosav-csoport rövidítése előtt más jel nem áll, akkor ez ügy értendő, hogy a nitrogén szabad vegyértékéhez hidrogénatom kapcsolódik; ha a C-terminális aminosav-csoport rövidítése után semmilyen más jel nem áll, akkor ez úgy értendő, hogy a terminális karbonilcsoporthoz hidroxilcsoport kapcsolódik. így például Gly-Gly- Gly a 0 0 O ' I! Il II H2N—CH2C—NHCH2C—NH—CH2C—OH tripeptidet jelenti. Ha a C-terminális csoportra vonatkozólag valamely kivételt akarunk tenni és a megjelöléssel csupán! azt akarjuk kifejezni, hogy ezen a helyen valamilyen csoport álljakkor ezt külön fel fogjuk megfelelően tüntetni. így például Alá valamilyen peptid C-terminális végén a CH3 I — HN—CH —COOH-csoportot jelenti; az CH3 —NH—CH —CO-csoportot Ala-maradéknak nevezzük. A „gyógyászati szempontból elfogadható sók” alatt e leírásban olyan sókat értünk, amelyek az illető vegyület kívánt biológiai aktivitását só alakjában is megtartják és amelyeknek nincs semmilyen nem-kívánatos toxikológiai hatásuk. Az ilyen sók példáiként a) szervetlen vagy szerves savakkal képezett savaddíciós sók, mint sósavval, brómhidrogénsavval, kénsavval, foszforsavval, salétromsavval és hasonlókkal, továbbá ecetsavval, oxálsavval, borkősavval, borostyánkősavval, maleinsawal, fumársavval, glukonsavval, citromsavval, almasavval, aszkorbinsawal, benzoesawal, csersavval, embonsavval, alginsavval, poliglutámsawal, naftalinszulfonsavakkal, naftalindiszulfonsavakkal, poligalakturonsawal és hasonlókkal képezett savaddíciós sók, valamint b) többértékű fém-kationokkal, mint cink, kalcium, bizmut, bárium, magnézium, alumínium, réz, kobalt, nikkel, kadmium vagy hasonló kationokkal vagy az N,N’-dibenzil-etiléndiaminból vagy etilén-diaminból képezett szerves kationnal képezett sók, vagy pedig c) az a) és b) típusok kombinációi, mint a cink-tannát-sók említhetők. Az immunológiai ellenállóképesség fokozását különböző, az immunológiai gyakorlatban jól ismert in vitro vagy kis állatokon lefolytatott in vivo kísérleti módszerekkel igazolhatjuk. így például a következő tesztek alkalmazhatók erre a célra :- azatioprin-szenzitív rozetta-teszt in vitro vagy in vivo,- antitest-szintézis in vivo vagy in vitro,- limfoid szövet szaporodása,- vegyes limfocita-reakció,- blasztogenezis A-konkanavalinnal,- in vitro spontán rozetta-teszt,- citotoxikus limfociták képzése,- limfocita auto-szenzitizáció in vitro vagy in vivo. A fent említett biológiai vizsgálati módszerek a klinikai szignifikancia egy vagy több oly általános osztályára vonatkoznak, amelyben az immunológiai ellenállóképesség számottevő tényezőnek tekinthető, Ilyenek:- az antitest-szintézis stimulálása,- a helyettesítési és helyreállítási therápia,- autoimmun betegségek. Az immunológiai ellenállóképességet fokozó aktivitás gyors és fontos kimutatására a J. P. Bach [Proc. Natl. Acad. Sei. USA 68, 2734 (1971)] által leírt, jól ismert in vitro rozetta-teszt alkalmazható, amelyben a lép-rozettát képező sejtek azatioprinnel -6-(l-metil-4-nitro-5-imidazolil)-merkaptopurin - szembeni szenzitivitását mérik. Ennek a vizsgálati módszernek a megbízhatósága t és szignifikáns voltát számos kísérleti adat bizonyítja (vö.: J. F. Bach: „The Mode of Action of Immunosuppressive Agents“, North Holland/ American Elsevier Publishing Co., Amsterdam/ New York, 1975.). A találmány szerinti peptidek e vizsgálati módszerrel már nanogramm vagy pikogramm szinten aktivitást mutatnak. így ezek a peptidek előnyösen alkalmazhatók klinikailag a humán gyógyászatban olyan állapotok kezelésére, amelyekről feltételezhető, hogy a szervezet immunológiai ellenállóképessége lényeges tényező, mint például az autoimmun megbetegedések (például lupus erythematosus, ulceraliv colitis, autoimmun hemolízises anémia, thyrotoxicosis. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
