189548. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-4696 antibiotikum-komplex és egyes komponenseinek előállítására
1 189 548 2 A találmány tárgya eljárás az A-4696 aktaplanin antibiotikum komplex B1( B2, B3, Cla, C3 és E, uj komponense előállítására. Ezek antibakteriális és antimikrobiális szerként, valamint a növekedés elősegítésére alkalmazhatók a baromfi-, sertés-, birka- és borjútenyésztésben. A találmány általános szempontból kapcsolatban áll azokkal a találmányokkal, amelyeket az 1976. április 20-án megadott, 3 952 095 sz., egy új antibiotikumra és ennek előállítási eljárására vonatkozó, az 1977. december 20-án megadott, 4 064 233 sz., az A-4696 antibiotikumra vonatkozó és az 1978. szeptember 19-én megadott 4 115 552 sz., az A-4696 antibiotikum A és B komponensére vonatkozó amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírások ismertetnek. Az A-4696 antibiotikumnak a 4 064 233 sz. és 4 115 552 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban szereplő B komponense nem azonos a jelen bejelentés szerinti komponensekkel. Továbbá: a találmány elsőbbségi napja előtt az A- 4696 antibiotikumnak a bevezetőben említett komponensei közül egyik sem volt ismert, méltatott és ezek egyikének létezését sem tételezték fel. Az előbbi szabadalmi leírások ténylegesen azt a kitanítást tartalmazzák, hogy bármilyen további tényező vagy kromatográfiás folt csupán „a kromatográfiás eljárásokkal összefüggő műtermék”, ezért kitanításuk eltávolít a találmány tárgyától. Azt találtuk, hogy az aktaplanin A-4696 antibiotikum új komponensei - az alábbiakban leírt B,, B2, Ej, Cla, C3 és E, - hatékony antibakteriális és antimikrobiális szer. Ezek a komponensek növelik a növekedési sebességet és javítják a tápanyaghasznosítás hatásfokát a baromfiban, sertésben, birkában és borjúban. Az A-4696 antibiotikum Bj, B2, B3, C,a, C3 és E, komponenseit olyan A-4696 komplexből különítjük el, amelyet az Actinoplanes missouriensis ATCC 31 680, ATCC 31 682 vagy ATCC 31 683 mikroorganizmus tenyésztésével állítunk elő. A fermentációt asszimilálható szénhidrát, nitrogén forrást és szervetlen sókat tartalmazó táptalajon állítjuk elő a süllyesztett aerób tenyésztés körülményei között és a fermentációt addig folytatjuk, amíg jelentős antibiotikus aktivitás nem képződik. A tápanyaghasznosítás kérődzőkben való hatásfok-növelésére irányuló eljárást úgy hajtjuk végre, hogy a kérődző állatoknak az A-4696 antibiotikum komplexből Vagy az A-4696 komplex B„ B2, B3, Cla, C3 és/vagy E, komponenséből vagy ezeknek egy gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sójából a növekedés elősegítéséhez szükséges mennyiséget adagolunk tápanyag, táp-premix vagy tápanyagadalék formájában. A csirkék növekedésének elősegítésére irányuló eljárás abból áll, hogy a csirkének a táplálékába vagy ivóvízébe az A-4696 antibiotikum komplex vagy az új komponensek - B„ B2, B3, Cla, C3 és/ vagy E, - vagy ezek egy gyógyászatilag elfogadható sója növekedést elősegítő mennyiségét adagoljuk be. A találmány az A-4696 aktaplanin antibiotikum új Bj, B2, B3, Cu, C3 és E, komponensei előállítására vonatkozik. A találmány értelmében az A-4696 antibiotikum új komponenseit az A-4696 antibiotikumból különítjük el, az utóbbit pedig úgy állítjuk elő, hogy egy, az Actinoplanes genushoz tartozó mikroorganizmust táptalajban tenyésztünk mindaddig, amíg a fermentlében jelentős antibakteriális aktivitás nem mutatható ki. Nagyteljesítményű folyadékkromatográfiával (HPLC) kimutatható, hogy a fentemlített hasonló tárgyú bejelentésekben leírt A-4696 antibiotikum komplex több, eddig ismeretlen komponensből áll, amelyeket B,, B2, B3, Cla és C3 jelzéssel jelölünk. Egy további komponens, amelyet E,-nek nevezünk, ugyancsak elkülöníthető az A-4696 antibiotikum komplexből; ez esetleg bomlástermék. A komponensek kémiai, fizikai és biológiai tulajdonságai arra mutatnak, hogy ezek új antibiotikumok és hogy - esetleg az E, komponens kivételével- ugyanabból a peptid magból, egy aglükonból, egy aminocukorból, és változó mennyiségű glukózból, mannózból és ramnózból állnak. Bár az E, komponens a legtöbb vonatkozásban hasonló a többi komponenshez, lehetséges, hogy peptid magja ezekhez képest módosult. Az aglükon keletkezésének az A-4696 komplex ill. az egyes komponensek hidrolízise alatt végzett bioautográfiás követése arra mutat, hogy rövid idő alatt egy egyszerű keverék képződik, amely antimikrobiálisan aktív pszeudoagiükonból és aglükonból áll. Lehetséges, hogy az A-4696 komplex és az egyes komponensek antimikrobiális aktivitásának helye a peptid-pszeudo-aglükon, mimeliett a komponensek lényegében a semleges cukor összetétel tekintetében térnek el egymástól. A kapcsolódó cukrok szerepe főként az lehet, hogy módosítják az oldhatóságot és más fontos farmakodinamikai paramétereket. A találmány szerinti antibiotikus komponensek funkcionálásának vagy keletkezésének mechanizmusa azonban nem képezi a találmány tárgyát és nem áll szándékunkban bármiféle korlátozás bevezetése a hatásmódra vonatkozó közlések révén. A találmány szerinti antibiotikus komponenseket az A-4696 antibiotikumból különítjük el, amelyet úgy állítunk elő, hogy az Actinoplanes missouriensis mikroorganizmust vizes táptalajban tenyésztjük, süllyesztett fermentációs körülmények között. Az A-4696 antibiotikum komplexet először elkülönítjük a fermentléből, majd folyadékkromatográfiával elkülönítjük az egyes komponenseket. A találmány szerinti antibiotikum komponenseket előnyösen hidrokloriddá vagy szulfáttá alakítjuk. A bejelentés céljából az „A-4696 antibiotikum” kifejezést az aktaplanin antibiotikum komplex jelölésére használjuk, míg a komplexből elkülönített különböző komponenseket A-4696 antibiotikum komponenseknek - A, B,, B2, B3, Cu, C3, Ei stb.- nevezzük. Az A-4696 antibiotikum és a belőle elkülönített egyes komponensek igen hatékonyak emberre és állatra nézve egyaránt patogén mikroorganizmusok növekedésének meggátlásában. A találmány szerinti antibiotikum komponensek ezenkívül a mezőgazdaságban alkalmazhatók, mint növekedést elősegítő anyagok, a baromfi-, sertés-, birka- és borjútenyésztésben. Az A-4696 antibiotikum új B,, B2, B3, Cla, C3 és Ej komponensei bázikus vegyületek, amelyek meg5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
