189473. lajstromszámú szabadalom • Hatóanyagként B-41 D jelű vegyületet tartalmazó akaricid készítmény és eljárás a hatóanyag előállítására
A találmány tárgya eljárás ùj, B-41D jelű vegyüld előállítására Streptomyces B-41-146 (Ferm 1438) törzs tenyésztésével. A találmány a vegyületet tartalmazó akaricid készítményre is vonatkozik. Saját, 1 390 336 számú nagy-britanniai szabadalmi leírásunkban leírtuk, hogy a Streptomyces genushoz tartozó mikroorganizmusok, különösen a Streptomyces B-41-146-os törzs (Ferm 1438) B^tl-es antibiotikumot tud termelni, amelyet 9 különböző komponenssé választhatjuk szét, és amelyeket a leírásban Aj, A2, A3, A4, Bj, B2, B3, C, és C2-ként jelöltünk. Ezt követőleg azt tapasztaltuk, hogy négy hasonló szerkezetű vegyületet kaphatunk ugyanannak a Streptomyces törzsnek a tenyésztésével. Mind a 13 vegyület szerkezetét és tulajdonságait a J. Antibiotics 29 (3) 76-14-76-16. oldalain és 29 (6) 76-35-76-42. oldalain találjuk. Az 1 390 336, számú nagy-britanniai szabadalmi leírásban leírtuk, hogy a B-41-es anyagok együtt és az anyagok külön-külön inszekticid és akaricid tulajdonságokat mutatnak. Ezt követően a 4 144 352. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban szerepel, hogy ezek a vegyületek és hasonló anyagok antelmintikus hatást is mutatnak. A 4 144 352. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban a B-41-es vegyületeket „milbemicinek”-nek nevezték. Az egyszerűség kedvéért az alábbiakban az ismert vegyületeket mi is milbemidneknek nevezzük, bár néhány vegyület ezek közül azonos a B-41-es vegyületekkel, amelyek az 1 390 336 számú nagy-britanniai szabadalmi leírásban szerepelnek. Bizonyos milbemicinszármazékokat leírtak a 4 093 629. és 4 134 973. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásokban is. A B-41-146 számú Streptomyces tenyésztésével előállítható 13 milbemicin vegyület az (I), (II) és (III) általános képlettel jellemezhető. A milbemicin <X|.I0 vegyületek szerkezetét a (I) általános képlet mutatja. R1, R2, R3, R4 és R5 jelentését az alább következő 1. táblázatban találhatjuk, amely az 390 336. számú nagy-britanniai szabadalmi leírásban található megfelelő B-41 elnevezéseket is tartalmazza. A Streptomyces B-41-146 számú törzse által termelt 13 ismert vegyület közül az a,.10 milbemicinek hasonlítanak legjobban a találmány szerint előállított új B-41 D jelű vegyülethez és az 1. táblázatban megtalálhatók a B-41D vegyület R*-R5 szubsztituenseinek definíciói is. A táblázatban az alábbi rövidítéseket használjuk: MH jelentése (1) képletű 2-metil-hexanoilcsoport, PC jelentése (2) képletű 2-pinolil-(karbonil)-oxi-metil-csoport. 1. Táblázat Mii bernicin R1 R2 R3 R4 Rs B-41 “i H H CH, CHj OH A, a2 H H CH, CHj OCH, b2 H H c2h5 CH, OH A* <*4 H H c2h, CHj OCH B, “s OH MH ch. CH, OH a2 OH MH ch. CHj OCH, B, OH MH c2hs CHj OH OH MH c2hs CH, OCH,H H CHj PC OH c. /. Táblázat (folytatása) Milbemicin R1 R2 R3 R4 R5 B-41 “lO H H c2h. PC OH c2-H H CH(ch,)2 CH, OH c A milbemicin B, és B2 szerkezetét a (II) általános képlettel ábrázolhatjuk R6 jelentése milbemicin B, esetében metilcsoport és milbemicin B2 esetében etilcsoport. Milbemicin Bj megfelel az 1 390 336. számú nagy-britanniai szabadalmi leírás szerinti B-41 Aj vegyületnek. A milbemicin B3 vegyület szerkezetét az (III) képlet adja meg. Azt tapasztaltuk, hogy ugyanazzal a fermentálási eljárással, amellyel a milbemicineket állítják elő, olyan új vegyületet állíthatunk elő, amelynek jobb akaricid hatása van, mint az eddig ismert milbemidneknek. A találmány szerint tehát (IA) képletű, B-41D jelű vegyületet állítunk elő. A találmány szerint az új vegyületet úgy állítjuk elő, hogy a Streptomyces genushoz tartozó B-41D vegyületet termelő mikroorganizmus törzset megfelelő táptalajban tenyésztjük, majd ebből a vegyületet izoláljuk. A találmány szerint akaricid hatású készítményt állíthatunk elő oly módon, hogy a Streptomyces genus B-41D vegyületet előállító mikroorganizmust táptalajban tenyésztjük, majd a táptalajt koncentráljuk és tisztítjuk és így legalább 25 tömeg% B-41D vegyületet tartalmazó készítményt kapunk. A B-41D vegyületet az (IA) képlet jellemzi és a vegyület fizikai és kémiai tulajdonságai a következők : 1. Külalak : amorf por- vagy kristályok 2. Analízis: a C33H4107 képlet alapján [t%.] számított: C% 71,09; H% 8,80; 0% 20,11; talált: C% 71,40; H% 8,82; 0% 20,22. 3. Molekulasúly: 556 4. Ultraibolya abszorpciós spektrum lásd 1. ábra Abszorpciós maximumok 237 mp-nál (inflexiós pont, e = 29400 és 243 mp-nál (e = 30500). 5. Infravörös abszorpciós spektrum (KBr tabletta): lásd 2. ábra. 6. Magmágneses rezonanciaspektrum 100 MHznél CDCl3-ban; belső standardként tetrametilszilánt használunk, lásd 3. ábra 7. Oldékonyság : könnyen oldódik etil-acetátban, . acetonban, etanoiban és metanolban. Kevéssé oldódik: vízben. 8. Vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálat szilikagélen (Kieselgel 60 F2S4, Merck Co.). Előhívószer 18 : 82 térfogatarányú díoxán és széntetraklorid elegy. Rf érték = 0,40. A B-41D jelű vegyületet a Streptomyces genushoz tartozó mikroorganizmusok, elsősorban a Straptomyces B-41-146-os számú törzsének tenyésztésével állíthatjuk elő (Ferm 1438). A B—41—146-os törzs morfológiai tenyésztési és fiziológiai jellemzőit és taxonómiai tulajdonságait részletesen leírtuk az 1 390 336. számú nagy-britanniai szabadalmi leírásban. A törzset a Fermentati-5 10 IS 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
