189222. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, fertőző bronchitis elleni vakcina előállítására
1 189 222 2 8. Táblázat Vakcina Kóros mikroszkópos elváltozás IFT pozitív 207 (HA-) 6/10* 2/10 274 (HA + ) 0/10 0/10 kontroll 10/10 6/10 Azt a következtetést vonhatjuk le, hogy az új hemagglutináló D 274 törzsből készített vakcina magas szintű Hl és antitestsemlegesítő titert vált ki a vakcinálást követő egy héten belül, és ez a magas titer megmarad a védelemhez elegendő szinten leg- 15 alább 12 hétig a vakcinálás után. Ezt bizonyítja a D 274 csoport 100%-os védelme az emlékeztető fertőző kísérletek folyamán. Ezzel ellentétben az ugyanolyan szerotípusú, de nem hemagglutináló D 207 törzs csupán alacsony 20 szintű Hl antitest képzést vált ki a kísérleti periódus folyamán. Sőt, a semlegesítő antitest-titer szignifikánsan alacsonyabb, amikor összehasonlítjuk a D 274 vakcináit csoporttal 12 héttel a vakcinálás után, és szignifikánsan alacsonyabb védelmi arányt 25 is (kb. csak 50%) találunk a D 207 csoportban. Vili. Példa Vakcinálás kombinált élő vakcinával A. A vírusok szaporítása és a vakcinák készítése A hemagglutináló D 274 és D 1466 vírustörzseket az I. példa A. részében leírt módszer szerint szaporítjuk, és ezekből monevalens, illetve polivalens vakcinákat készítünk a II. Példa B. része illetve a IV. példa A. része szerint, 4,0 log EID50 mennyiséget alkalmazva minden egyes törzsből. B. Vakcinálás Tíz hetes SPF csirkéket négy csoportba osztunk és négy szeparált izolátorban helyezünk, el. A csirkéket szemcseppekkel vakcináljuk. Az A csoportot D 274 vakcinával vakcináljuk, a B. csoportot D 1466 vakcinával, a C. csoportot kombinált vakcinával; a D csoport a nem vakcináit csoport. C. Az immunizálás vizsgálata A vakcinálást követő napon, majd, 2, 4, 6 és 8 héttel később vért veszünk. A szérumokat egyenként vizsgáljuk homológ és heterológ antitest válaszra, különböző prototípusú (M 41, D 274 és D 1466) törzsekből preparált antigéneket használva. Az eredményeket a 9. Táblázat mutatja be. 9. táblázat Csoportvakcinák • I Agtípus Hetek száma a vakcinálás után 0 2 4 M 41 D 274 D 1466 MI 41 D 274 D 1466 M 41 D 274 D 1466 A. D 274 3,6 4,0 3,5 9,4 9,8 8,0 6,8 10,1 5,9 B. D 1466 3,4 3,7 3,2 7,0 5,8 7,3 5,2 5,1 7,2 C. D 274+1466 3,4 3,9 3,4 7,8 8,0 7,3 6,6 9,0 7,3 D. Kontroll 3,-3 3,8 3,3 4,8 4,0 3,8 3,7 .3,9 4,1 9. táblázat (folytatás) Csoportvakcinák i Agtípus Hetek száma a vakcinálás után 6 8 M 41 D 274 D 1466 M 41 D 274 D 1466 A. D 274 5,2 10,0 4,4 4,4 10,3 3,1 B. D 1466 4,1 4,4 6,8 4,1 5,1 6,3 C. D 274+1466 5,2 8,4 6,4 5,7 9,0 6,9 D. Kontroll 3,0 3,6 3,5 3,2 4,2 3,0 A D 274 törzzsel vakcináit csirkék (A csoport) a homológ Hl antitest magas titerével válaszolnak a 55 második héttől egészen a kísérlet végéig. A vakcinálást követő 2. és 4. hétben szignifikáns keresztreakció figyelhető meg az M 41 és D 1466 heterológ antigének ellen, ez a jelenség a 6-8. hétre eltűnik. A B csoport csirkéi hasonló választ adnak alacso- 60 nyabb titer szinten. A homológ válasz védelmi szinten áll legalább a kísérlet végéig (8 héttel a vakcinálás után). A kombinált vakcina (C csoport) hosszan tartó Hl antitest szintet vált ki mindkét vakcinatörzs ellen. Az M 41 antigénre is határozott hetero- 65 lóg válasz látható a vakcinálást követő 2. és 4. héten. A korai heterológ választ talán meg lehet magyarázni a csoportspecifikus antigénekkel reagáló immunoglobulinok magasabb arányával. A kísérletekből úgy tűnik, hogy a két hemagglutináló törzs (D 274 és D 1466) mind az egyedi, mind a kombinált élő vakcinákban kifejti immunogén potenciálját. 7
