189207. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfortart L-prolinn-származékok előállításásra
1 2 189 207 rítjuk, és bepároljuk; így 630 mg l-[{[2-(benzoilamino)-3-fenil-propil]-hidroxi-foszfinil}-acetil]-L- prolin-terc-butil-észtert kapunk. Vékonyrétegkromatográfia adatai: (diklórmetán : metanol : ecetsav); fő folt Rf = 0,4-nél. j) 1 -[{[2-(Benzoil-amino)-3-fenil-propil]-hidroxi-foszfinil}-acetil]-L-prolin. Az i) pontban előállított 630 mg (1,22 mmól) monoészter-termék, 0,2 ml (1,5 ekvivalens) anizol Q és 5 ml trifluor-ecetsav elegyét argongáz alatt szobahőmérsékleten 2,5 óra hosszáig keverjük. A trifluor-ecetsavat és anizolt vákuumban eldesztilláljuk, és a maradékot utána telített vizes nátriumhidrogén-karrbonát oldatban oldjuk, és kétszer 15 mossuk dietil-éterrel. A vizes fázist tömény sósavoldattal megsavanyítjuk, és a keletkező olajat etilacetáttal extraháljuk. Az etil-acetátos fázist kétszer mossuk vízzel, majd nátrium-klorid oldattal, és magnézium-szulfáton szárítjuk. Bepárlás után _0 500 mg l-[{[2-(benzoil-amino)-3-fenil-propil]hidroxi-foszfinil}-acetil]-L-prolint kapunk habként. A vékonyrétegkromatográfia adatai: butanol : - víz ; ecetsav = 4 : 1 : 1 ; fő folt Rf = 0,4-nél. k) l-[{[2-(Benzoil-amino)-3-fenil-propil]-hid- 25 roxi-foszfiníl}-acetil]-L-prolin-dilítiumsó. A j) pontban előállított 500 mg (1,1 mmól) disav-terméket 1,5ml (1,5 ekvivalens) In lítiumhidroxid oldat és 40 ml víz elegyében oldjuk. A kapott oldatot lítium-ciklusú AG50W-X8 gyantával 30 töltött oszlopon engedjük át, és vízzel eluáljuk. A kívánt terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, millipore szűrőn szűrjük, és liofilizáljuk. A kapott 500 mg szürkésfehér színű szilárd anyagot 65 g Sephadex LH-20-szal töltött 2,54 cm (1 inch) át- 35 mérőjű oszlopon tisztítjuk vízzel 1 ml/perc átfolyási sebességgel eluálva. A kívánt frakciókat egyesítjük, millipore szűrőn szűrjük, és liofilizáljuk. így 220 mg l-[{[2-(benzoil-amino)-3-fenil-propil]hidroxi-foszfinil}-acetil]-L-prolin-dilítiumsót ka- 40 punk habszerű fehér szilárd anyagként. [<z]p = -35° (c= 1,12; metanol). A vékonyrétegkromatográfia adatai: butanol : - víz : ecetsav = 4:1 :1; egy folt Rf,= 0,4-nél. Elektroforézis: pH 6,5; -2000 V; 35 perc; egyetlen folt + 4,2 cm-nél; láthatóvá tétel karboxil-reagenssel. Az elemanalízis eredményei a C23H25N206PLi• 2 H20 összegképletre: számított: C% 54,56; H% 5,77; N% 5,53; P% 6,1, u mért: C% 54,52; H% 5,23; N% 5,44; P% 5,9 6. példa g5 {[2-(Benzoil-amino(3-fenil-propil]-hidroxi--foszfinil}-L-alanil-L-prolin-dilítiumsó. a) 4-Toluolszulfonsav-[3-fenil-2-(4-toluol-szulfonil-amino)-propil]-észter. 9,4 g (50,1 mmól) DL-fenilalaninol-hidroklorid 60 35 ml vízmentes piridinnel készített oldatához 0 °C- on (jeges fürdő) kis adagokban 15 perc alatt hozzáadunk 19,4 g (102 mmól) 4-toluolszulfonil-kloridot. Az elegyet hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni, és éjszakán át keverjük. Utána az elegyet 65 szárazra pároljuk, és a maradékot etil-acetáttal és 5%-os kálium-hidrogén-szulfát oldattal rázzuk öszsze. Az etil-acetátos réteget alaposan mossuk 5%-os kálium-hidrogén-szulfát oldattal, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és telített vizes nátrium-klorid oldattal, nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. A sötétszínű maradékot szilikagél rétegen át diklór-metánnal majd diklór-metán : : etil-acetát (1 : 1) eleggyel eluálva szűrjük. Az oldószerek eldesztillálása, és a maradék dietil-éterrel való eldörzsölése után 13,95 g 4-toluolszulfonsav[3-fenil-2-(4-toluolszulfonil-amino)-propil]-észtert kapunk fehér kristályos anyagként, amelynek olvadáspontja 95-96 °C. Rf = 0,39 (etil-acetát : hexán = 1 : 2). A diizopropil-éterből átkristályosított minta olvadáspontja 96-98 °C. b ) [3-Fenil-2-(4-toluolszulfonil-amino)propil]-foszfonsav-dietil-észter. 7,3 g (52,9 mmól) dietil-foszfit 100 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített oldatához 2,20 g (45,8 mmól) 50%-os olajos nátrium-hidrid diszperziót adunk argongáz alatt apró adagokban. Az elegyet utána 30 percig forraljuk visszafolyó hűtő alatt, lehűtjük szobahőmérsékletre, és 6,9 ( 15 mmól) 4-toloulszulfonsav-[3-fenil-2-]4-toloulszulfonil-amino)-propil]-észtert adunk hozzá. A rekcióelegyből 15 perc múlva fehér szilárd anyag válik ki, további 75 ml tetrahidrofuránt adunk hozzá, és éjszakán át folytatjuk a keverést. Éjszakán át szobahőmérsékleten való keverés után az elegyet egy óra hosszáig visszafolyó hűtő alatt forraljuk, lehűtjük és 75 ml etil-acetáttal és 50 ml 5%-os kálium-hidrogén-szulfát oldattal rázzuk össze. Az etilacetátos fázist alaposan mossuk 5%-os káliumhidrogén-szulfát oldattal, telített vizes nátriumhidrogén-karbonát oldattal és telített vizes nátrium-klorid oldattal, nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. A maradékot hexánnal eldörzsölve 5,9 g [3-fenil-2-(toluolszulfonil-amino)-propil]foszfonsav-dietil-észtert kapunk csaknem fehér szilárd anyagként, amelynek olvadáspontja 86-89 °C. Rf = 0,48 (etil-acetát). A diizopropil-éterből átkristályosított minta olvadáspontja: 94-95 °C. c) (2-Amino-3-fenil-propil)-foszfonsav. 5,9 g (13,9 mmól) [3-fenil-2-(4-toluolszulfonilamino-propil]-foszfonsav-dietil-észter, 8,0 g (85,1 mmól) fenol és 50 ml 48%-os vizes hidrogénbromid oldat elegyét 5,5 óra hosszáig forraljuk visszafolyó hűtő alatt. A lehűtött elegyet 50 ml vízzel hígítjuk, és 2 x 50 ml etil-acetáttal mossuk. A vizes fázist szárazra pároljuk, 30 ml vízzel oldjuk, és ismét bepároljuk. Ezt még kétszer megismételjük. Végül a maradékot vízben oldjuk, és 60 ml hidrogénciklusú AG 50W-X2 gyantával töltött oszlopra töltjük, és előbb vízzel majd 5%-os piridines vízzel eluáljuk. A kívánt terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, és szárazra pároljuk. A szilárd maradékot acetonitrillel eldörzsölve 2,55 g (2- amino-3-fenil-propil)-foszfonsavat kapunk csaknem fehér kristályos anyagként, amelynek olvadáspontja 347 °C (bomlás). Rf = 0,27 (izopropanol : tömény ammóniumhidroxid oldat : víz = 7 : 2 : 1). 12
