188537. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új heparin-amino-komplexek előállítására
188 537 A találmány tárgya eljárás az (I) és/vagy (II) általános képletű új heparin-kvaterner-amin komplexek előállítására. Ismeretes, hogy a heparin erélyes véralvadásgátló anyag, amely meggátolja a protrombin-trombin átalakulást, illetve a már kialakult trombint inaktiválja. A heparin nagy molekulatömegű poliszacharid, melyben az ismétlődő glukozamin-hexuronsav egységekhez több S02 OH csoport kapcsolódik. Pontos kémiai összetétele még ma sem teljesen tisztázott, ezért előállítása nem szintetikus módszerekkel, hanem különféle állati szervekből való extrakcióval történik. Aszerint, hogy milyen eljárással és milyen szervből izolálják, többféle összetételű és hatásosságú (specifikus aktivitású, E/mg) heparint különböztetnek meg. Éppen ezért a heparin tisztaságának megállapítása nemcsak a szokásos analitikai módszerekkel, hanem annak alapján is történik, hogy milyen hatásosan gátolja a véralvadást. A gyógyszerkönyvi minőségű heparin legalább 120 nemzetközi egység/mg hatásosságú. A minimálisan megkövetelt specifikus aktivitást és egyéb tisztasági követelményeket a gyártás során több lépcsőben érik el, amelyek közös jellemzője, hogy a heparin tartalmú - általában vizes — oldatok az izolálni kívánt hatóanyagra igen hígak 0,1—2 mg/ml, max. 30 mg/ml koncentrációjuak. Igen fontos tehát, elsősorban gazdaságossági okok miatt, hogy az egyes izolálási lépéseknél az igen híg oldatokból is kvantitatív, vagy csaknem kvantitatív hozammal legyen elkülöníthető a gyógyászatilag értékes anyag. Külön előnyt jelent, ha a felhasznált kemikália az izolálás során heparinra nézve esetlegesen részleges szelektivitást is biztosít. A ma ismert módszerek egyike szerint híg, vizes oldatból történő leválasztása esetén kvaterner ammóniumvegyületek vizes oldatával reagáltatják, amelyekkel a heparin vízben oldhatatlan komplexeket képez és így elkülöníthető. (2.989.438, 3.058.884, 3.160.563 és 3.342. 683 számú egyesült államok-beli szabadalmi leírások). Az így nyerhető ismert heparin komplexek kvaterner amin-koinponensükben a központi nitrogén atomhoz kapcsolódó alkilcsoportokat tartalmaznak, melyeket kettőskötés, aromás gyűrű, oxigén- vagy nitrogénatom szakíthat meg, vagy halogénatom kapcsolódhat hozzájuk. Az ismert heparin-amin komplexekre példaként a 4-(l,l,3,3-tetrametil-butil)-fenoxi-etoxietil-dimetil-ammónium izonnal, a cetil-piridinium inonnal alkotott heparin kvaterner amin komplexeket említjük. A heparin leválasztására eddig az irodalomban javasolt kvaterner ammonium vegyületek több előnytelen tulajdonsággal rendelkeznek. A cetil-trimetilammónium-klorid vagy a cetil-piridinium-klorid, tehát azok a vegyülete, melyek az alkilláncban nem tartalmaznak heteroatomot, a jó kitermelést biztosító leválasztást nagy mennyiségű vegyszer adagolásával érik el. Ezt igazolja igen gyenge szelektivitás mellett például a 3.058.884 számú egyesült államok-beli szabadalmi leírás, melyben kimutatják, hogy növekvő mennyiségű ilyen kvaterner sót adva a heparin vizes oldatához, a kapott heparin kvaterner komplexekből egyre kisebb aktivitású heparin szabadítható fel, egy bizonyos határon túl adagolva pedig teljesen inaktív termékek is leválnak. 100 nemzetközi egység mennyiségű heparin teljes leválasztásához 8...15 mg valamely fenti kvaterner amin szükséges. Bár a másik típusú vegyületből, a 4-(l, 1,3,3-tetrametilbutil)-fenoxietoxietil-dimetil-benzilammónium-kloridból (Hyamine® 1622) az előbbieknél kisebb mennyiség alkalmazható ugyan a heparin leválasztására (3 mg elegendő 100 nemzetközi egység heparinhoz), azonban bonyolult kémiai szerkezete folytán a Hyamine® 1622 előállítása munka- és nyersanyagigényes. 5 Célul tűztük ki olyan új lieparin-kvaterner amin komplexek előállítását, melyek vízben való kis oldhatóságuk, valamint a heparin és az amin komponens közti komplex kapcsolat folytán az ismert sóknál alkalmasabbak arra, hogy belőlük heparint állítsanak elő, továbbá 10 melyek előállítására olcsó és már kis mennyiségben alkalmazva is hatásos kitermeléseket biztosítanak. (Az anyalúgban a heparinveszteség kicsi.) Kísérleteink során olyan kvaterner amin vegyieteket találunk, melyek a heparin savas csoportja(i) és a 15 kvaterner amin nitrogénatomja(i) közti ionos kapcsolaton túlmenően olyan funkciós csoportokat is tartalmaznak, melyek a heparinban levő egyéb, például a hidroxilcsoportjaival másodlagos kötéseket képeznek. , Kísérleteink során sikerült olyan (111), illetve (IV) 20 általános képletű aminvegyületeket találnunk, melyek a fenti célkitűzéseinket teljesítik, azaz a heparinnal olyan új kvaterner-amin-komplexeket alkotnak, melyek lehetővé teszik a heparin jó hozamú leválasztását. A találmány eljárás az (I) és/vagy (II) általános 25 képletű új heparin kvaterner-amin komplexek előállítására a heparin és kvaterner-aminok reakciója útján vizes vagy vízzel elegyedő szerves oldószert is tartalmazó közegben - mely képletben 30 R 8—18 szénatomszámú, egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoportot vagy azok elegyét, fenilcsoportot vagy fenil-(l-3)-szénatomszámú alkilcsoportot, R,,R2, R3 azonos vagy különböző és 1-4 szénatomszámú egyenes alkilcsoportot vagy R! és R2 együt- 35 tesen pentametilén-csoportot, ekkor R3 hidrogénatomot, R4 hidrogénatomot vagy R-rel azonos jelentésű csoportot, m 1-től 4-ig terjedő egész számot, 40 n 0-tól 4-ig terjedő egész számot, A -O-C- vagy -C-O- részképletű csoportot, Il II O O 45 B és D azonosak vagy különbözőek és vegyértékkötést vagy A-val azonos részképletű csoport, N® kvaterner nitrogénatomot, HEP® a heparin molekula egyik egyértékű anion részét jelenti. —, 50 azzal jellemezve, hogy a heparin vizes oldatát egy (III) és/vagy (IV) általános képletű amin só vizes vagy vízzel elegyedő szerves oldószeres oldatával reagáltatjuk, - mely képletben R, R,, R2, Rá, R4, m, n, A, B, D, N® jelentése a 55 fenti, Xe egy egyértékű vagy ezzel ekvivalens szervetlen aniont, p 0 vagy 1 egészszámot és ha p = 0 akkor Y nitrogénatomot, ha p = 1 akkor Y kvaterneratomot 60 jelent -majd a kapott (I) és/vagy (II) általános képletű heparin kvaterner amin komplexet a reakcióelegyből ismert módon elkülönítjük. A találmány szerinti eljárással előállítható (I) és/vagy 65 (II) általános képletű új heparin kvaterner amin komp-2
