188081. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új ciklopeptidek és az azokat tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 188 081 2 A találmány szerinti eljárással előállítható új ciklopeptidek olyan fiziológiai hatással rendelkeznek, amely alapjellegében a szomatosztatin hatásához hasonló. így ugyanolyan terápiás indikációkban használhatók, például különösen olyan funkciózavarok kezelésére, amelyekben a növekedési hormon vagy glukagon szekréciója abnormálisán magas, így acromegalia vagy diabetes. Minthogy ezenkivül gátolják a vérveszteséget a gasztrointesztinális traktusban, ilyen indikációs területen is eredményesen alkalmazhatók. A szomatosztatin, amely egy H-AIa-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH 1 2 3 4 5 6 7 g 9 10 11 12 13 14 képletű ciklusos tetradekapeptid [Science, 179., 77. (1973,)], ismert módon gátolja a növekedési hormon (szomatotropin) hipofízis által szabályozott szekrécióját. Ezenkívül gátolja az endokrin pankreász szekréciós aktivitását, így az inzulin és glukagon szekrécióját. Ezeket az értékes tulajdonságokat magának a szomatosztatinnak az esetében nem lehet a gyakorlati alkalmazáskor teljesen kihasználni, mert ennek a vegyületnek a hatástartama rövid. Gyakran előnyős továbbá, ha a hatóanyag gátló hatását főként a két mirigy egyikén fejti ki, ezzel szemben a másikat lehetőleg kevéssé befolyásolja. (A legtöbb esetben kevésbé kívánatos a hipofízises kiválasztás, azaz a növekedési hormon kiválasztásának gátlása.) Ezért arra kell törekedni, hogy az alapszekvencia módosításával, különösen egyes eredeti aminosavak kihagyásával és/vagy más, gyakran „nem természetes” aminosavakra való cserélésével a gátló hatás disszociációját, valamint viszonylag hosszú hatástartamot érjünk el. így például azt tapasztalták, hogy különösen előnyös ilyen fajta fiziológiai tulajdonságok lépnek fel az f-Asn-Phe-Phe-[D-trp]-Lys-Thr-Phe-[Gaba] ^ (M) 5 6 7 8 9 10 11 típusú ciklopeptidek - ahol Gaba y-amino-vajsav gyökét jelenti és p értéke 0, 1 vagy 2 - és további hasonló vegyületek esetében, lásd a 78 100994.9 számon bejelentett és 0 001 295 számon nyilvánosságra hozott európai szabadalmi bejelentésünket. Az ilyen vegyületek tipikus jellemzője, hogy egy egyenes szénlánc van bennük, amely a szomatosztatin cisztincsoportjában levő eredeti — CH2—S—S—CH2— csoportot szimulálja. Meglepődve tapasztaltuk, hogy ennek az egyszerű, mindig szubsztituálatlan láncrésznek egy teljesen szokatlan módosításával, azaz a y-aminosav ciklusos szénhidrogén-csoporttal történő szubsztitúciójával a kívánt aktivitás nemcsak megmarad, hanem még tovább fokozódik. így az I általános képletű vegyületek a szomatosztatinhoz képest jobban gátolják az inzulin- és glukagon-szekréciót, másrészt a hatástartam is lényegesen meghosszabbodik. így például az inzulin- és glukagonkiválasztás izolált perfundált patkány-pankreászon való meghatározásakor (Grodsky, G. M. és Fanska, R. E. : „Methods in Enzymology”, 39., D. rész, 364. oldal, szerkesztők: Hardman, J. G. és O’Malley, B. W., Academic Press, New York, 1975.) azt tapasztaltuk, hogy a [D-trp8;-/?-(l-naftil)Gaba12]ciklo-szomatosztatin(5-12)-oktapeptid (ID képlet) diasztereomer elegyként körülbelül tízszeres, míg az izolált B izomer körülbelül húszszoros gátló hatást mutat a [D-trp8;Gaba12]-ciklo-szomatosztatin(5-12)-oktapeptidhez (M képlet, p=l) viszonyítva. Az I általános képletű vegyületeket önmagában ismert módokon állíthatjuk elő, ekkor úgy járunk el, hogy egy H—[II']—C III általános képletű lineáris pepiidet - ahol II' valamilyen, az alábbiakban definiált II általános képletű ciklopeptidnek megfelelő lineáris oktapeptidgyököt jelent, amelyben az amidkötés a peptidgyűrü két tetszőleges szomszédos aminosavcsoportja között van megszakítva és C szabad hidroxilcsoportot, aktiváló csoporttal átalakított hidroxilcsoportot vagy —NH—NH2 hidrazinocsoportot jelent - ciklizálunk és a kapott 1- Asn-Phe-Phe-trp-Lys(A)-Thr(B)-Phe-Gaba(Ar) —I II általános képletű vegyületről - ahol Gaba(Ar) és trp a fentiekben megadott jelentésű, A egy e-amino védőcsoportot vagy hidrogénatomot és B hidroxil védőcsoportot vagy hidrogénatomot jelent, ahol az A és B csoportok közül csak az egyik jelenthet hidrogénatomot - a védőcsoporto(ka)t lehasítjuk. e-Amino védőcsoportokként a peptidkémiában szokásos összes amino védőcsoportot alkalmazhatjuk, ahogyan ezeket a szakkönyvekben összefoglalóan leírják, lásd például Houben-Weyl: Methoden der organischen Chemie, 4. kiadás, 15/1. kötet, Wünsch, E.: Synthese von Peptiden, Georg Thieme Verlag, Stuttgart, 1974. Előnyösek az acidolízissel lehasítható csoportok, így elsősorban a terc-butiloxikarbonilcsoport és az analóg csoportok, például a terc-amiloxikarbonil-, izopropiloxikarbonil-, diizopropilmetoxikarbonil-, alliloxikarbonil-, ciklopentiloxikarbonil-, ciklohexiloxikarbonil-, çl-izoborniloxíkarbonil- és adamantiloxikarbonilcsoport, valamint az aralkil-típusú csoportok, így a benzhidril- és trifenilmetilcsoport (tritilcsoport) vagy bizonyos, az 509 266 számú svájci szabadalmi leírásban ismertetett, 2-(p-bifenilil)-2-propiloxikarbonil-típusú aralkoxikarbonilcsoportok. Alkalmazhatunk továbbá reduktív vagy bázikus úton lehasítható amino védőcsoportokat is, például különösen a benziloxikarbonilcsoportot és olyan benziloxikarbonilcsoportokat, amelyek az aromás részben halogénatomokkal, nitrocsoportokkal, rövidszénláncú alkoxicsoportokkal és/vagy rövidszénláncú alkilcsoportokkal vannak helyettesítve, így a p-klór- és p-bróm-benziloxikarbonil-, p-nitro-benziloxikarbonil-, p-metoxi-benziloxikarbonil-, p-toliloxi-karbonilcsoportot vagy izonikotiniloxikarbonilcsoportot, továbbá acilcsoportokat, így p-toluolszulfonil-, benzolszulfenil-, p-nitrobenzolszulfenil-, illetve formil-, trifluoracetil- vagy ftaloilcsoportot. Különösen előnyös e-amino védőcsoport az etoxikarbonilcsoport, ß-helyzetben három szénhidrogéncsoporttal helyettesített szililcsoport, így a trifenilszilil-, dimetilbutilszilil- vagy mindenek előtt trimetilszililcsoport. Egy ilyen /Htrihidrokarbilszilil)etoxikarbonilcsoport, így egy /?-(tri-rövidszénláncú alkilszilil)-etoxikarbonilcsoport, például különösen 5 10 15 20 25 30 '35 40 45 50 55 60 65 3
