187803. lajstromszámú szabadalom • Eljárás aminosavak N-(vinblasztinoil-23)-származékainak és a vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 187.803 2 A hatóanyagokat önmagukban vagy más, a hatóanyaggal szinergetikus hatást nem mutató karcinosztatikus szerekkel együtt, pl. alkilezőszerekkel, antimetabolitokkal, például metotrexáttal, 5-fluoruracillal, 6-merkaptopurinnal, 6-merkaptopurinnal, 6-tioguaninnal, citozin arabinozidokkal és antibiotikumokkal, pl. aktinomicin D-vel, daunoribicinnel, adriamicinnel és cisz-diamino-diklór-platinával alkalmazhatjuk. Az új vinblasztin-származékok különösen kombinációban előnyösek. A találmány további részleteit a következő példákkal szemléltetjük: 1. példa 1. O-dezacetil-N-deformil-vinkrisztin-monohidrazid előállítása / 985 mg vinkrisztin bázist feloldunk 10 ml vízmentes hidrazin és 10 ml metanol elegyében. A reakcióelegyet 60 °C-on tartjuk keverés közben 22 óra hosszat. Ezután az elegyet vízzel, majd nátriumkloriddal telített vízzel kezeljük. A vizes oldatot nyolcszor extraháljuk 15 ml diklórmetánnal. Az összegyűjtött szerves fázisokat 20 ml vízzel, majd 25 ml nátriumkloriddal telített vízzel kezeljük, végül vízmentes nátriumszulfát felett szárítjuk. Szűrés és vákuumban történő bepárlás után 900 mg 0-4- dezacetil-N-deformil-vinkrisztin-monohidrazidot kapunk, amely 90%-nál nagyobb tisztaságú. NMR spektrum (CDC13, 360 MHz) 9,76 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 3,5, 7,53 (d, 1H), 7,24 és 7,07 (m, 3H), 6,82 (s, 1H), 6,22 (s, 1), 5,87 (dd, lh), 5,67 (d, 1H), 5,43 (s, 1H), 4,03 (s, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,86 (s, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,52 (s, 3H), 2,82 (s, 2H), 2,51 (s, 1H), 0,93 (20, 2 x 3H). Tömegspektrum (elektronionizációs ütközés) 154, 294, 355, 413, 524, 555, 695, 710, 723, 736, 739, 755 (M + l) - 768, 769, 782 számított a C42H54N607 képlet alapján a molekulasúly 754, 942. 2. Vinkrisztin savazidjának előállítása 850 mg vinkrisztin monohidrazidot 20 ml metanolban feloldunk és az oldatot 63 ml In sósavval és 175,5 mg nátriumnitrittel kezeljük 15 percig 0'C-on. Az oldatot 0 "C-on tartjuk, majd nátriumhidrogénkarbonáttal semlegésítjük 0 °C-on, ezután háromszor extraháljuk diklórmetánnal. Az összeöntött szerves fázisokat nátriumszulfát felett szárítjuk, leszűrjük és a vákuumban melegítés nélkül koncentráljuk, míg 10 ml oldatot kapunk. 3. Etil-triptofanátta! végbemenő reakció 300 mg etiltriptofanátot hozzáadunk az elegyhez 4 *C-on keverés közben, majd a reakciót vékonyrétegkromatográfiásan ellenőrizzük. 10 nap múlva a terméket kromatográfiásan tisztítjuk (40 g szilikagél 50, eluálószer éter és ammóniával telített metanol 96 : 4 térfogatarányú elegye). 15 ml-es frakciókat gyűjtünk Össze, melyeket vékonyrétegkromatográfiásan ellenőrzünk. A nem reagált aminosavat különítjük el először (30-40-es frakció). Az eluálószert változtatjuk (éter és ammóniával telített metanol 86: 14 térfogatarányú elegye), majd a reagált származékokat három frakcióban különítjük el, 44 és 45-ös frakció 30 mg; 46-53 frakciók 257 mg; 54-60 frakciók 115 mg. A második rész N-(0,4-dezacetil-deformil-vinkrisztin-23-oil)etil-triptofanát (la), mely a vékonyrétegkromatográfiás vizsgálatok szerint homogén. Tömegspektrum: 984,970,956 (M+ + 1)913,912, 899 (DCJ izobután), C55H6(SN60g képlet alapján a mólsúly: 955,181. UV spektrum: (CH3OH): maximális: 282 (4,20) - 290 (4,18) - 322 (3,96) minimális: 254 - 287 - 305 IR spektrum: (cm-1) 3400 - 2920 - 1720 - 1660- 1610 - 1485 - 1450 - 1370 - 1345 - 1330 - 1290- 1220 - 1165 - 1130 - 1025 - 1005 - 920 - 885 - 830 - 740 NMR spektrum (CDC13) 360 MHz (ppm) 850 (s, 1H), 8,03 (s, 2H), 7,77 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,57 (d, 1H), 6,95 (s, 1H) 6,35 (s, 1H), 5,89 (dd, 1H), 5,78 (d, 1H), 4,75 (q, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,67 (s, 3H), 1,23 • (t, 3H), 0,98 (t, 3H), 0,89 (t, 3H). N-(0,4-dezacetil-vinkrisztin-23-oil)-etil-triptofanát (Ib). Az (la) deformilezett származékból 257 mg-ot újraformilezünk a 811 110. számú belga szabadalmi leírásban leírt módon. Az így kapott nyers terméket kromatográfiásan 20 cm-es 30 g-os szilikagél oszlopon tisztítjuk, majd 3 eluálószerrel eluáljuk: éter és ammóniával telített metanol 92 : 8, 88 : 12,86 : 14 arányú elegyével. A lefolyó terméket 15 ml-es frakciók formájában izoláljuk a 44-54 frakciók 34,1 mg súlyban N-újraformilezett (Ib) származékot tartalmaznak. Tömegspektrum (izobután DCI): 1011, 997, 983 (M+ + 1), 970, 982, 996, 998, 999, 1012 a C56H66N60,o képletre számítva a mólsúly 983 192 ÙV spektrum (CH3OH) max: 270 (4,18) - 290 (4,11) lemez 280 (4,12) inflexiós pont (4,03) IR spektrum: (KBr) sávok: 3400 - 3040 - 2960 - 2920 - 2880 - 2850- 1735 - 1725 - 1680 - 1670 - 1665 - 1610 - 1490- 1450 - 1225 - 745. 2. példa N-(0,4-dezacetil-4'-dezoxi-vinb!asztin-23-oil-ß)etil-triptofanát (Ic) Az 0-dezacetil-4'-dezoxi-vinblasztin-hidrazidot a 4 203 898. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás 24. oszlopának 51. és azt követő sorai szerint állítottuk elő. 500 mg hidrazidot 12 ml metanolban feloldunk, majd 37 ml 1 n sósavval és 104 mg nátriumnitrittel 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4
