187631. lajstromszámú szabadalom • Eljárás karbonsavamid-csoportot tartalmazó vegyületek, különösen peptidek előállítására
187 631 2 A találmány tárgya új eljárás karbonsavamidcsoportokat tartalmazó vegyületek, különösen peptidek előállítására. A karbonsavamid- és peptidkötések kialakítására sok eljárás ismert [például Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, XV. kötet, II. rész, 1-364. oldal, Angew. Chemie 92, 129 (1980)]. Az ismert eljárások azt a célt tűzték ki, hogy a peptidek szintézisénél fennálló követelményeket, azaz a racemizáltságmentességet, a reakció egyszerű és enyhe reakciókörülmények közötti kivitelezhetőségét, a nagy kitermelést, a könnyen hozzáférhető és lehetőség szerint nem veszélyes kiindulási anyagok alkalmazását biztosítsák. Jelen találmányunk új utat tár fel, amellyel a peptidek és amidok megadott körülmények közötti gazdaságos szintézise optimálisan hajtható végre. Azt tapasztaltuk, hogy a kabonsavamid-csoportot tartalmazó vegyületek, különösen a peptidek 90% feletti kitermeléssel állíthatók elő valamilyen kívánt esetben védett karboxilcsoportot tartalmazó vegyületríek ekvimoláris mennyiségű kívánt esetben védett aminocsoportot tartalmazó vegyülettel történő reagáltatásával, majd adott esetben a védőcsoportok lehasításával, ha a vegyületek reakcióját vízmentes inert oldószerben vagy víznek és vízzel elegyedő inert oldószernek az elegyében 0-50 °C hőmérsékleten legfeljebb négyszeres moláris feleslegben alkalmazott di( 1—4 szénatomos alkil)-foszfinsavanhidrid és adott esetben tercier amin vagy bázikus hatású só jelenlétében folytatjuk le. A di(l-4 szénatomos alkil)-foszfinsavanhidridek az (I) általános képletü vegyületek. Az (I) általános képletben R jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport. Az (I) képletben szereplő R-szubsztituensek lehetnek azonosak vagy különbözők. Előnyösek az olyan anhidridek, amelyekben a P-atomhoz azonos szubsztituensek kapcsolódnak. A találmány szerint alkalmazott di(l—4 szénatomos alkil)-foszfinsav-anhidridek színtelen folyadékok. Szobahőmérsékleten stabilak és csökkentett nyomáson bomlás nélkül desztillálhatok. A legtöbb nemvizes oldószerben, különösen lipid-oldószerekben - mint kloroformban vagy metilén-kloridban -, valamint poláros oldószerekben - mint dimetilformamidban és dimetil-acetamidban - is jól oldódnak. A di(l-4 szénatomos alkilj-foszfinsavanhidridek példáiként megemlítjük a következő vegyületeket: metil-etil-foszfinsavanhidrid, metil-propil-foszfinsavanhidrid, metil-butil-foszfinsavanhidrid, dietilfoszfinsavanhidrid, di-n-propil-foszfinsavanhidrid, di-n-butil-foszfinsavanhidrid. A di( 1—4 szénatomos a!kil)-foszfinsavanhidrideket ismert módon állíthatjuk elő, például úgy, hogy a di( 1—4 szénatomos alkilj-foszfinsavkloridot di(l-4 szénatomos alkilj-foszfinsav-alkilészterrel reagáltatjuk 150-160 °C hőmérsékleten (Houben- Weyl, Methoden der Organischen Chemie, G. Thieme Verl., Stuttgart 1963, XII. kötet, 266 és azt követő oldalak). Különösen előnyös az az eljárás, amely szerint a di( 1 —4 szénatomos alkil)-foszfinsavat, annak sóját vagy észterét foszgénnel reagáltatják (2 129 583. számú német szövetségi köztársaság-beli szabadalmi leírás, 2 225 545. számú német szövetségi köztársaság-beli közrebocsátási irat). A találmány szerinti reakciót előnyösen semleges vagy enyhén lúgos közegben folytatjuk le. A reakcióelegy pH-értékét legegyszerűbben valamilyen alifás vagy cikloalifás tercier bázis - mint N-metilmorfolin, N-etil-morfolin vagy legfeljebb 6 szénatomos alkilcsoportot tartalmazó trialkil-amin - adagolásával állítjuk be. Ha kevert vizes rendszerben dolgozunk, akkor a szerves bázis helyett pufferrendszerként ható bázisos sók - például szénsavvagy foszforsavsók - is alkalmazhatók. A találmány szerinti eljárásban az oligopeptidek előállításához kiindulási anyagként egyrészt valamilyen védett karboxilcsoporttal rendelkező aminosavat vagy pepiidet, másrészt valamilyen védett aminocsoporttal rendelkező aminosavat vagy pepiidet alkalmazunk. A karboxilcsoportok védőcsoportjaként a peptidszintéziseknél alkalmazott ismert védőcsoportok alkalmazhatók. Különösen alkalmasak erre a célra egyenes vagy elágazó szénláncú alifás alkoholok - mint metanol, etanol, terc-butanol - észterei. Ugyancsak alkalmazhatók aralifás alkoholok - mint a benzilalkohol vagy a difenil-metil-karbinol - észterei is. Az aminocsoportok védőcsoportjaiként szintén a peptidszintézisekből ismert védőcsoportok alkalmazhatók. Különösen alkalmas erre a célra például a benziloxi-karbonil-csoport. Oldószerekként a peptidszintéziseknél alkalmazott vízmentes, inert oldószerek - mint például metilén-klorid, kloroform, dimetil-formamid, dimetilacetamid, dioxán vagy tetrahidrofurán - alkalmazhatók. A szintézist lefolytathatjuk kevert vizes oldószerrendszerben is. Ez alatl vízből és valamilyen vízzel elegyedő szerves oldószerből álló elegyeket - mint dioxán/víz, tetrahidrofurán/víz vagy dimetilformamid/víz - értünk. Az ilyen rendszerek alkalmazása különösen vizo Idható peptidek kapcsolásánál előnyös. A reakció általában szobahőmérsékleten kielégítő sebességgel megy végbe. Enyhe melegítés nem károsítja a rendszert. Magasabb, mintegy 50 °C feletti hőmérsékletek alkalmazása különösen a peptidszintéziseknél a racemizálódás veszélye miatt nem célszerű. A találmány szerint a di(l-4 szénatomos a 1 kiI)foszfinsavanhidridet előnyösen (feleslegben legfeljebb 4 mól, előnyösen 2 2,5 mól dialkil-foszfinsavanhidrid/mól kapcsolandó vegyület) alkalmazzuk. A vegyületeket hígítás nélkül csepegtethetjük hozzá a reakcióelegyhez. A találmány szerinti eljárás a jelenleg ismert eljárásokhoz viszonyítva számos előnnyel rendelkezik. A di( 1—4 szénatomos alkil)-foszfinsavanhidridekből a széntézis után nem keletkeznek nehezen oldódó melléktermékek, és ez a jelenleg gyakran alkalmazott, diciklohexil-karbodiimidet alkalmazó peptidszintézissel szemben előnyt jelent. A di( 1 —4 szénatomos alkilj-foszfinsavanhidridek könnyebben hozzáférhetőek és könnyebben kezel-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 50 2
