187499. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biológiailag aktív pterokarpán vegyületek izolálására, valamint eljárás az e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 187 199 2 nás nyomásemelkedést okoz. Ezt átmeneti javulás után teljes légzőszervi és keringési kollapszus követi. A halál a perifériás erekben bekövetkező kollapszus és a normális légzési mechanizmus megszűnése következtében áll be. Ezenkívül úgy látszik, hogy ezek a mérgek bizonyos hatást gyakoroltak a kísérleti állatok központi idegrendszerére is.. Ez a központi idegrendszeri hatás az alfa- és a béta agyhullámok (EEG) csökkenésében nyilvánul meg. Ezt a változást a motoros idegek ingerületátvitelének csökkenése és az ideg-izom-apparátus erőteljes blokkolása kíséri, mindez hasonló a kuráre hatásához. A méreg semmiféle hatással nincs a direkt stimulálás utáni izomműködés-válaszra. A vizsgálathoz felnőtt vizslakutyák csoportjait használtuk, minden csoportban hét kutya volt. A kutyákat nátriumpentobarbitallal (30 mg/kg) elaltattuk, és figyeltük az artériás vérnyomás, pulzus, elektrokardiogram és a légzés változását. Ezt követően feloldott liofilizált Bothrops atrox (Fér de Lance) dél-amerikai csörgőkigyóméreg letális dózisát (az LD50 öt-tízszeresét) adtuk be nekik. (2,5 mg-5,0 mg/kg vagy 10 mg/kg). A beadás után 15 percen belül a pulzusszám és a vérnyomás jelentősen lecsökkent. 15-30 perc múlva a légzés is lecsökkent, átlagosan percenkénti 20 lélegzetvételről percenkénti 5 lélegzetvételre. A kezelést akkor kezdtük meg, amikor erőteljes keringési zavart és nyilvánvaló légzési nehézségeket figyeltünk meg. Ez rendszerint a méreg beadása után 15-30 perc múlva következett be. A cabenegrin I oldatot úgy készítettük el, hogy a kristályos vegyület 33 mg-ját 100 ml vizes etanolban (25:75) feloldottuk. A cabenegrin II oldatot hasonlóképpen készítettük, a cabenegrin II vegyület 24 mg-ját 100 ml vizes etanolban (15:75) oldottuk fel. A beádási dózisokat úgy készítettük el, hogy a megfelelő alkoholos cabenegrin I vagy II oldatot 50 ml vízzel kevertük össze. A megfelelő oldatok beadása gyomorszondán át történt. A kezelés a következő: közvetlenül beadás után nincs változás a tünetekben, a vérnyomás, pulzusszám és a légzés rendkívül alacsony marad. A megfelelő alkoholos (I) vagy (II) vegyület első dózisának beadása után körülbelül 30 perccel, lassú fokozatos javulás látszik a légzésben, amit a pulzusszám és a vérnyomás részleges helyreállása követ. 30 perces időszakonként folyamatosan folytatjuk a kezelést, amíg az összes figyelt életjelenségek 10%-os szóráson belül visszatérnek. Az állatonkénti hatásos dózistartomány 10-20 ml. Általában 2-4 dózisra van szükség. 8-10 órás megfigyelés után az állatokat étellel és vízzel ketrecben helyeztük el. 24 óra múlva mind a hét kutya valamelyes aktivitás jeleit mutatta. 72 óra múlva minden kutya elfogadta az ételt és az italt, ezután semmiféle további kezelésre nem volt szükség. 2. A cabenegrin l és II E. coli endotoxinnal szembeni hatása Három felnőtt vizslakutyán mutattuk be a cabenegrin I és II-nek az E.a coli endotoxin okozta sokkal szembeni hatékonyságát. A kutyákat 30 mg/kg pentabarbitallal elaltattuk és figyeltük az artériás vérnyomás, pulzusszám, EKG és légzés változásait. Az E. coli endotoxin letális dózisát (1 mg/kg) fecskendeztük be intravénásán a kutyáknak, a hátsó végtagjukba preparált katéteren keresztül. Az első kísérlet alkalmával semmiféle méregellenes kezelést nem alkalmaztunk, és az állatok az injekció beadása után 2 órával kimúltak. Három további alkalommal megkezdtük a méregközömbösítő kezelést, amikor a keringési és légzési nehézségek nyilvánvalóvá váltak. Ez körülbelül másfél órával a méreg beadása után következett be. A kezelést úgy végeztük, hogy mindegyik állatnak egy gyomorszondán keresztül egyetlen dózis cabenegrin I és II oldatot adtunk be. Az oldatokat a fentebb leírt módon készítettük el, és beadáskor az oldatok 10 ml-ét 100 ml vízzel kevertük. Az így kezelt állatok túlélték a fertőzést és visszatért normális élettevékenységük. 3. Langendorff-féle izolált szivkészítmény Két kutyaszívből készült készítményt vizsgáltunk annak megállapítása céljából, hogy milyen hatással van a cabenegrin I és II mérgezés előtti és utáni beadása a szívkoszorúér-véráramlásra, pulzusszámra, EKG-re, kamrai kontrakciós erőre és a koszorúér-érellenállásra. Azt figyeltük meg, hogy a kezeléssel sikerült kiküszöbölni a méregnek a keringési funkciókra gyakorolt hatását. Ez a hatás a kontrakciós erő és a pulzusszám csökkenésében nyilvánul meg. A koszorúér érellenállása a méreg beadása után erőteljesen megnő. Ha a kígyóméreggel történő mérgezést megelőzően 0,05 mg/ml cabenegrin I-et vagy Il-t tartalmazó oldatot injektálunk közvetlenül a keringési rendszerbe, semmiféle hátrányos szívhatás nem figyelhető meg. Sőt a kamrai kontrakciós erő és a koszorúén véráramlás körülbelül 15-20%-kai megnő. Ha a kígyóméreggel történő mérgezés után cabenegrin I-t vagy cabenegrin Il-t adunk be, a vegyületek méregközömbösitő hatása a kontrakciós erőt és a pulzusszámot normál szinten tartja, és helyreállítja a mérgezés okozta csekélyebb aritmiákat. 4. Neurofiziológiás hatás Három kutyán és egy patkányon vizsgáltuk a méregközömbösítő hatásnak az ideg-izom-működésre, akciós potenciálra és az agyhullám- aktivitásra gyakorolt hatását. A vizsgálatokat Fér de Lance méreg letális dózisával történt mérgezés után végeztük. A kígyóméreg az agyhullám- aktivitást és az ingerületi átvitelt egyaránt csökkenti. Ez a hatás csaknem teljesen kiküszöbölhető és a funkciók normál szintre hozhatók cabenegrin I és II beadásával. Bármelyik vegyülettel történő kezelés után körülbelül 30-60 percig nem történik semmi, az akciós potenciálok és az ideg-izom-működés alacsony marad. Ezt követően lassú, fokozatos javulás után 12-24 óra múlva a figyelt értékek eredeti szintjükre állnak vissza. i 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
