187417. lajstromszámú szabadalom • Eljárás spergualin-származékok előállítása sóik formájában
1 187417 2 5. Táblázat A vegyüld sorszáma PH 2 3 4 5 6 7 8 9 10 9. 69,3 89,3 100 JD0 100 100 100 97,5 97.9 13. 72,4 90,1 100-100-100 98,0 96,0 14. 71,8 90,6 100-100-100 97,5 97,3 15. 76,5 91,4 100-100-100 99,0 96,2 22. ( -1 79,7 100 100 100 100 100 97,6 ' 95.7 < + > 79,7-100 100 100 100 100 100 95,6 24. 76,3-100 100. 100 100 100 97,1 94,8 25. 68.9-100 100 100 100 100 97,7 95,5 26. 77,2-100 100 100 100 100 95,9 94,5 ( ) ■- spcrgualin 88,1 88,0 87,8 82,5 46,5 12,6 6,1 0 ■ o (2) biológiai tulajdonságok A tanulmány szerinti eljárással előállított összes (I) általános képletü vegyület jól kimutatható karéi nosztatikus hatást, így in vitro körülmények kő- 2Q /ölt rákos sejteknél erős növekedésgátló hatást és implantált rákos sejteket hordozó egereknél élettartam növelő hatást fejt ki, miként ez a következőkben ismertetett kísérletekből kitűnik. I. Rákos sejteknél in vitro kifejtett növekedésgátló hatás DBA/2 törzsbeli egerek mindegyiknél 105 egér L 1210 leukémia sejtet implantálunk. 4 napos etetést követően az egerektől aszpetikus körülmények között elvett hasvizet háromszor átmossuk fiziológiás konyhasóoldattal az L-1210 sejtek elkülöníté- 30 se céljából, majd a sejteket RPMI 1640 tápatalajban (moore, G. E.: Journal of the Amercan Medical Assosiation, 199. 519 (1967) vagy Morton, H. J.: In Vitro. 6. 89 (1970)/ szuszpendáljuk. A szuszpenzióhoz 10",, borjúembrió-szérumot és 5pmól 2-mer- 35 kapto-etanolt adunk, majd a szuszpenziót úgy hígítjuk, hogy 0,9 ml-je 5 • 104 számú L-1210 sejtet tartalmazzon. Mikrolemezre az így kapott sejtszuszpenzióból 0,9 ml-t továbbá a viszgálandó mintát tartalmazó táptalajból 0,1 ml-t viszünk fel, majd a mikrolemezt szén-dioxiddal töltött inkubátorban 37 °C-on tartjuk 48 órán át. Eztuán a sejtek számát Coulter Counter típusú számláló-berendezésben (a Coulter Electronics, Inc. Amerikai Egyesült Államok-beli cég szállítja) mérjük és a százalékos növekedésgátlást a növekedésgátlás (%) = (1 — T / C) • 100 képlet alapján - a képletben. T = a vizsgálandó mintát tartalmazó táptalajban növekvő sejtek száma, és C = a kontroll táptalajban növekvő sejtek száma -kiszámítjuk. Különböző mennyiségekben vett mintákkal kapott növekedésgátlási értékekből ki tudjuk számítani az 50%-os növekedésgátláshoz szükséges koncentrációt. Néhány jellegzetes (I) általános képletű vegyülettel az L-1210 sejtek növekedésgátlása vonatkozásában végzett kísérletek eredményeit a 6. táblázatban adjuk meg. 6. Táblázat A vegyület sorszáma Növekedésgátlás (%), (1-T/C) • 100 50%-os növekedésgátláshoz szükséges koncentráció (gg/ml) A kísérleti vegyület koncentrációja, pg/ml 1,25 2,5 5 10 20 40 80 160 1. — 52,2 89,3 101 100--2,4 2. 9,6 30,5 46,9 69,5 77,6 79,6 79,6- ' 5,0 3. 20,6 36,7 64,2 81,6 86,7-_ ' 3,7 4. 20,0 27,5 29,9 58,4 75,5 78,7 . --8,1 5. — 24,9 29,1 40,0 54,2 66,0 88,5 96,8 18 6. 38,0 40,3 45,5 50,3 57,5 ’ --8,0 7. 38.7 80,.7 98,5 99,8 99,9 99,3--1,5 8. —-33,2 38,1 46,8 53,5 66,3 88,2 28 9. _-35,5 45,9 62,3 78,1 90,9 96,0 12 10. —-19,9 28,5 36,5 • 52,4 62,4 79,5 39 11. —-35,0 52,2 59,4 71,8 77,9- ■ 10 12. ...-21,5 31,1 38,4 47,3 58,6 73,5-21 13. 17,0 21,3 24,0 33,2 65,7 72,5 —-14 14. — 22,3 24,6 29,9. 42,7 58,6-52 15. 27,1 . 39,0 71,0 94,5 97,7 100--3,1 16.-22,6 31,1 32,5' 56,3--17 17. 2,1 4,5 13,3 16,5 33,7 52,53--70 ■ 18.-15,7 20,9 29,5 32,3 47,8-90 65 8
