187381. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfinil-alkanoil-csoporttal helyettesített prolin-származékok előállítására
187 381 2 1,30 g (S)-4-azido-l-{[(4-fenil-butil)-hidroxifoszfinil]-acetil}-L-prolin-metil-észter és körülbelül 15 ml 1 n nátrium-hidroxid oldat elegyét 30 percig kevertetjük. A reakcióelegyet tömény sósavoldattal megsavanyítjuk, etil-acetáttal extraháljuk, mossuk vízzel és nátrium-klorid oldattal, nátrium-szulfáton szárítjuk, és az oldószert eldesztilláljuk. így 1,11 g cím szerinti vegyületet kapunk, amelynek fajlagos forgatóképessége [a]D = -22,3° (c = 10 mg/ml; metanol). A termék Vi mól vizet tartalmaz. 8. példa ( S)-4-Azido-l-{[ ( 4-fenil-butil)-hidroxi-foszfinil]-acetil}-L-prolin 9. példa (S)-4-Amino-l-{[ (4-fenil-butil)-hidroxi~foszfinilJ- acetil}-L-prolin 0,8 g (S)-4-azido-l-{[(4-fenil-butil)-hidroxi-foszfinilj-acetil}-L-prolin és körülbelül 20 ml ecetsav elegyét 10%-os palládiumosszén jelenlétében Parr készülékben 3 órát hidrogénezzük. A reakcióelegyet Celit-en átszűrve eltávolítjuk a katalizátort, és az oldószert eldesztilláljuk. A kapott olajat vízzel hígítjuk, és néhányszor mossuk etil-acetáttal. A vizes fázist liofilizáljuk, így 0,48 g nyersterméket kapunk szilárd anyagként. A nyerstermékből 400 mgot körülbelül 30 ml AG50X8 ioncserélő gyantával töltött oszlopon kromatografálunk, először vízzel eluáljuk, majd 6,5 pH-jú piridin-acetát puffernd. A kívánt anyagot tartalmazó frakciókat egyesítjük, és bepároljuk. Az üvegszerü maradékot vízben oldjuk, és az oldat liofilizálása után 300 mg cím szerinti vegyületet kapunk, amelynek fajlagos forgatóképessége [a]D= -24,8° (c= 10 mg/ml; metanol). 10. példa (R)-l~{[ Etoxi-(2-fenil-etil) -foszfinil]-acetil}-4- -hidroxi-L-prolin-metil-észter 1,27 g [etoxi-(2-fenil-etil)-foszfinil]-ecetsav, 0,8 g N, N'-karbonil-diimidazol és 25 ml acetonitril elegyét 0 °C-on 1 órát keverjük. 1,0 g transz-4-hidroxi- L-prolin-metil-észter-hidrokloridot összerázunk O, 76 ml trietil-amin és 10 ml acetonitril elegyével, és közvetlenül a reakcióelegybe szűrjük. A reakcióelegy nitrogéngáz alatt áll 6 napig szobahőmérsékleten, majd az elegyet 500 ml etil-acetáttal meghígítjuk, és 10 ml 5%-os nátrium-hidrogén-szulfát oldatot adunk hozzá. A szerves fázist 10 ml nátriumklorid oldattal, majd telített nátrium-hidrogénkarbonát oldattal, végül másodszor is nátriumklorid oldattal mossuk, és nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk. Az 1,8 g maradékot toluolból átkristályosítva 0,6 g cím szerinti vegyületet kapunk, amelynek olvadáspontja 126-128 °C. 11. példa (S)-7-{[ ( 2-Fenil-eti! J -hidroxi-foszfinil/-acetil!-1,4-dioxa-7-azaspirof 4.4 ]biciklononán-8-karbonsav-ammóniumsó A) (S)-7-{[Benziloxi-(2-fenil-etil)-foszfinil]-acelilJ-l,4-dioxa-7-azaspiro[4,4]biciklononán-8-karbonsa v-(2-hidroxi-etil)-észter. 2,04 g N,N'-karbonil-diimidazolt adunk 4,0 g [benziloxi-(2-fenil-etil)-foszfinil]-ecetsav 50 ml acetonitrillel készített és 0 °C-ra lehűtött oldatához, és a reakcióelegyet 1 órát keverjük. Utána hozzáadjuk 1,4-dioxa-7-azaspiro[4.4]bicikIononán-8-karbonsav-(2-hidroxi-etil)-észter oldatát, és 1 órán át 0 'C-on és körülbelül 16 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. A reakcióelegyet dietil-éterrel hígítjuk, 5%-os kálium-hidrogén-szulfát oldattal, nátrium-klorid oldattal, telitett vizes nátriumhidrogén-karbonát oldattal és még kétszer nátriun-klorid oldattal mossuk, majd nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk, így 5,6 g olajat kapunk. Az olajat szilikagélen etil-acetáttal és etilacetát/metanol (9:1) eleggyel eluálva kromatografá'juk. így 3,5 g cím szerinti vegyületet kapunk olajként. B) (S)-7-{[(2-Fenil-etil)-hidroxi-foszfinil]-acetil}-l,4-dioxa-7-azaspiro[4.4]biciklononán-8-karbonsav-ammóniumsó. 3,3 g (S)-7-{[benziloxi-(2-fenil-etil)-foszfinil]acetil}-1,4-dioxa-7-azaspiro[4.4]biciklononán-8- karbonsav-(2-hidroxi-etil)-észtert oldunk 50 ml metanolban, és hozzáadjuk 0,54 g lítium-hidroxidmonohidrát kevés vízzel készült oldatát. Az elegyet 1 óráig keverjük szobahőmérsékleten, és utána 1 g 10%-os palládiumosszén jelenlétében 1 atmoszférán 3 órát hidrogénezzük. Az elegyet Celit-en át szűrjük, a szűrletet szárazra pároljuk, és a maradékct vízben oldjuk, finom pórusú szűrőn megszűrjük, és liofilizáljuk. így 2,84 g anyaghoz jutunk. Ezt az anyagot 150 ml Sephadexen (hidroxil-forma, pH 7,4) kromatografáljuk 0,005-0,5 mólos ammóniun-hidrogén-karbonát gradiens pufferral. Az elektroforetikus vizsgálat alapján tisztának tekinte t frakciókat egyesitjük, bepároljuk, és vízből kétszer liofilizáljuk. így 1,1 g cím szerinti vegyületet kapunk, amelynek fajlagos forgatóképessége [a'D = -25,9° (c = 1; víz). 12. példa l-{[ ( 4-Fenil-butil) -hidroxi-foszfinil]-acetil}- L~ -prolin- (pivaloiloxi-metil) -észter 51,2 g [(4-feniI-butil)-hidroxi-foszfinil]-ecetsavat sz aszpendálunk 300 ml diklór-metán és 1 ml dimetil-formamid elegyében egy mágneses keverővei, hőmérővel és hűtővel felszerelt 1000 ml-e-s háromnyakú lombikban. Az elegyet jeges fürdővel 5 °C-ra hútjük, és 16,1 ml tionil-kloridot adunk hozzá. A hűtőfürdőt eltávolítjuk, és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 45 percig kevertetjük. Utána fűtőköpenyt szerelünk fel, és a reakcióelegyet 75 percig forraljuk visszafolyó hűtő alatt. A reakció befejeződéséig a visszaforralási időszak alatt állandó gázfejlődés van. A lombikot lehűtjük 5 °C-ra, és 6 10 1b 20 25 30 36 40 4b 50 öb 60 6b 5
