187324. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hidroxi-alkil-purinok észter-származékainak előállítására
1 187 324 2 5. táblázat Az acetoxi-nonil-hipoxantin (NPT 15 458) immunomoduláló tulajdonságai: in vivo mitogén úton előidézett lymphocyta proliferáció stimulálása egér lépsejtekbén Vegyidet Koncentráció [ng/ml] Cpm inkorp. -PHA +PHA S. I .. dózis/ ' ' /kontroll 0 (kontroll) 137 64,647 471 NPT 15 392 10 (dózis) 117 86,804 588 1,25 NPT 15 458 10 (dózis) 153 66,800 436 0,93 NPT 15 458 50 (dózis) 138 81,297 589 1,25 a) S. i. jelentése: stimulációs index 6. táblázat A szukciniloxi-nonil-hipoxantin (NPT 15 457) és az acetoxi-nonil-hipoxantin (NPT 15 458) immunomoduláló tulajdonságai; mitogén úton indukált lymphocyta proliferáció fokozása humán perifériás vérlymphocytákban ... Koncentráció Cpm inkorp. vegyuiet . [ng/ml] - PHA +PHA S. I. dózis/ kontroll NPT 15 392“’ 0 (kontroll) 379 59,404 156-0,036 (dózis) 297 59,167 199 1,27 0,36 (dózis) 577 69,057 120 1,76 3,6 (dózis) 381 67,328 176 1,128 NPT 15 457 0 (kontroll) 277 54,015 195-0,036 (dózis) 240 59,569 250 1,28 0,36 (dózis) 228 59,689 261 1,33 3,6 (dózis) 232 52,149 224 1,14 NPT 15 458 0 (kontroll) 277 54,015 195-0,036 (dózis) 214 59,989 280b) 1,43 0,36 . (dózis) 221 63,858 289b’ 1,48 3,6 (dózis) 238 69,055 290b) 1,48 a) Az értékek három kísérlet átlagai. b) p < 0,05 7. táblázat Az acetil-nonil-hipoxantin (NPT 15 458) és a szukciniloxi-nonil-hipoxantin (NPT 15 457) immunomoduláló tulajdonságai; az aktív E-rozetta-képződés fokozása Vegyidet Koncentráció [nanomól/ml] Százalék aktív E-rozetta # 1 x ± S. E. (kontroll) Placebo 0 9,23 ±2,9 34,2 ±6,6 NPT 15 392 (kontroll) 3,6 0,36 16,2 ± 1,0 15,4 ±2.9’" NPT 15 457 3,6 0,36 24,8 ±6“’ 33,6 ±2,4 NPT 15 458 3,6 0,36 19,4± 1,0“’ 23,2-23.25 ± 1.24“’ a) p < 0,05 a placebo kontrollal szemben. 8. táblázat Az acetoxi-nonil-hipoxantin (NPT 15 458) és a szukciniloxi-nonil-hipoxantin (NPT 15 457) immunomoduláló tulajdonságai; IgM antitest termelés 5 inhibitálása SRBC-vel immunizált Balb/c egerekben. Ksérlet Vegyület Dózis (i-p.) [nanomól/ kg x 4] * IgM A lemezkék kontroll (x±S. E.) százaléka 1 NPT 15 392 1,80 41 ±4 146“’ 2 0,18 68 ±2 147“’ 1 NPT 15 457 1,80 19 ± 3 68a) 2 0,18 47 ± 3 102 I NPT 15 458 1,80 8 ± 1 28,5“’ 2 0,18 11 ± 1 23,9“’ 1 kontroll placebo x 4 28 ± 2 100 2 placebo x 4 46 ± 2 100 a) p < 0,01 a placebo kontrolihoz képest. M ’tabolikus átalakulás Mint ez a 9. táblázatból kitűnik, az NPT 15 457 25 és az NPT 15 458 „pro-gyógyszerek” Verő sejtekkel (afrikai zöld majom vesesejt), máj homogenizátummal, valamint humán perifériás vérlymphocitákkal (HPBL) való inkubálása az „aktív” gyógyszer, vagyis NPT 15 392 képződéséhez vezet. Ügy tűnik, 30 hogy az NPT 15 458 NPT 15 392-vé történő átalakulása nagyobb mértékben megy végbe, mint az NPT 15 457 NPT 15 392-vé való átalakulása. Mint ez a 10. táblázat adataiból kitűnik, mind az NPT 15 457, mind az NPT 15 458 i. p. adagolás 35 után képes abszorbeálódni a vérben, valamint az NPT 15 458 adagolása majdnem 12-szer magasabb NPT 15 392 szintet eredményez, mintha csak magát az NPT 15 392-t adagolnánk. Ez világosan bizonyítja azt a tényt, hogy az NPT 15 457 és az NPT 40 15 458 in vivo képes NPT 15 392-t termelni, továbbá azt, hogy e származékok legalább egyike sokkal magasabb vérszintet hoz létre, ezáltal megnövekedőt hatást biztosít. 9. táblázat NPT 15 392 képződése acetoxi-nonil-hipoxantinbó! (NPT 15 458) és szukciniloxi-nonil-hipoxantinból (NPT 15 457) biológiai úton 50 55 60 65 Vegyüld Százalék NPT 15 392“’ 0 0,5 az idő függvényében 24 [óra] NPT 15 392 Verő sejtek 100-100 Májhomogenizá-100 100-tűm HPBL 100 100 NPT 15 457 Verő sejtek 0 0 Májhomogenizá-0 14 lum HPBL 0 18.2 NPT 15 458 Verő sejtek 0 50 Májhomogenizá-0 70 Ilim HPBL 0 100 a) Nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással (HPLC) meghatározva. 7
