187281. lajstromszámú szabadalom • Eljárás linkomicin-származékok előállítására
1 187.281 2 3. táblázat Protektiv hatás vizsgálata egereknél in vivo Baktérium cs az adagolás módjaKlindamicin U-57 930A Arány S aurcus szubkulán 5.7 (4.2-7,8)’ <<5 -orálisan 12,3(8,8-17,3) 1-5 mintegy 10 S. hemolyticus szubkután 2,3(1,6-3,3) 25 mintegy 10 szubkután 3,3(2,6-4,2) ,25(0,2-0,33) 13 orálisan 12,3(10,2-14,8)2,9(2,0-4,1) 4,2 K. pneumoniae > 320 >320 + CD5o mg/kg A vizsgálatot a következők szerint végezzük: 18-20 mg súlyú egereket (CF-l egerek) (10 db) standardizált baktériumsejt-szuszpenziók mintegy 100 LD50 értéknek megfelelő mennyiségével fertőzünk meg. A sejtszuszpenziókat előzetesen -170 °C hőmérsékleten tartjuk. Közvetlenül használat előtt a szuszpenziókat gyorsan felolvasztjuk és megfelelően hígítjuk. A fertőzést intraperitoneálisan hozzuk létre. A fertőzött csoportok kezelését azonnal elkezdjük és 4 napon keresztül napi egy alkalommal (először 24 óra múlva) végezzük. A kezeletlen fertőzött egerek csoportja a tenyészetek fertőzőképességének kontrolijául szolgál. A fenti kezelés elindítása után 7 nappal a túlélő állatokat megöljük és a kezelt csoport elhalálozási arányának alapján meghatározzuk az antibiotikum átlagos protektiv dózisát. Az átlagos protektiv dózis és a 95%-os megbízhatósági intervallumot Spearmen és Karber módszerével számítógéppel határozzuk meg. Az 1. példa II. részében leírtak szerint az (I111) képletű vegyületet is izoláljuk. Ezt az anyagot a következők szerint állítjuk elő: Az I. példa II. részében leírtak szerint kapott szürkületet vákuumban szárazra pároljuk, és a visszamaradó anyagot szabad bázissá alakítjuk majd szilikagélen eluálószerként kloroformmetanol = 6:1 elegyet alkalmazva kromatografáljuk. így a II. részben említett kevésbé poláros anyagot kapjuk. A kapott anyagot hidrokloridjává alakítjuk és acetonból és vízből átkristályosítjuk. Ennek az izomernek a képlete az (I111) képlettel jellemezhető. Az (I11) és (IMI) képletű vegyületek karbonilcsoportjának epimerizálása ismert módszerekkel hajtható végre. Az eljárás során keletkező (I,v) és (Iv) képletű transz-izomereket ismert módszerekkel, mint kristályosítással vagy kromatográfiával izolálhatjuk. Az (IIV) és (Iv) képletű vegyületeknek epimerizálással történő előállítását az e) és 0 reakcióvázlat szemlélteti. Az (I11) és (Im) képletű vegyületek hidrolízissel az (IVI) illetve az (Iv") képletű amonosavakká alakíthatók, melyek azután ismert módszerekkel epimerizálhatók az (Vm) és (I,x) képletű vegyületekké. Az (Ivni) és (IIX) képletű aminosavak bármely említett linkozaminid-származékkal kapcsolódhatnak. Ezeket a reakciókat a g) és h) reakcióvázlat szemlélteti. Az U-57 930E jelű vegyület (I11) képletű D-ciszizomerjének antibakteriális spektruma BH1 táptalajon az 1. táblázatban leírtakkal azonosan vizsgálva a következő: 4. táblázat Baktérium UC-szám MIC (pg/ml) S. aureus 76 250 570 1000 746 125 S. fecalis 694 >1000 S. pyogenes 152 62,5 D. pneumoniae 41 62,5 E. coli 45 >1000 K. pneumoniae 58 >1000 S. schottmuelleri 126 >1000 Ps. aeruginosa 95 >1000 2. példa Metil- 7 (S)~ 7-dezoxi- 7-klór- I-tio-a-linkozaminid egyéb analógjainak előállítása Az 1. példában leírtakkal azonosan dolgozunk, azzal az eltéréssel, hogy az aminosavat az alábbiakban megadott aminosavakkal helyettesítjük és így a megfelelő új antibakteriális aktivitású származékokat állítjuk elő szabad bázis vagy a savaddiciós só formájában. A savaddiciós sókat ismert módszerekkel állítjuk elő. Az aminosavak a következők: Aminosav Származék je(Ai) képletű vegyület U-46 337 Szilikagél lemezen metilalkohokkloroform 95:5 elegyével végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat során a gyorsabb izomer. (A,) képletű vegyület U-46 465 A fenti vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat során kapott lassú izomer. (A2) képletű vegyület U-46 699 A vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat során kapott lassú izomer, U-46 465-ből állítjuk elő. (A3) képletű vegyület U-46 701 (A4) képletű vegyület U-60 481 (As) képletű vegyület U-44 469 A kapott vegyületek kémiai és fizikai jellemzőit az 5. táblázatban adjuk meg. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6
