187086. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új oxazino-benzotiazin 6,6-dioxid-származékok előállítására
187 086 2 7. példa 5 • Meli! - 3 - (6 - meiil - 2 - piridií) - 2H.5H - 1,3 - oxazino/5,6 - c][benzotiazin - 2,4(3H) - dión - 6,6 - dioxid előállítása 5 2,8 g (0,01 mól) etil - 2 - metil - 4 - hidroxi - 2H - 1.2 - benzotiazin - 1,1 - dioxid - 3 - karboxiiátot és 2,3 g (0,011 mól) 2 - (tere * butoxi - karbonil - amino) - 6 - metil - piridint nitrogénatmoszférában szilikonolaj-fürdőn 160 °C-on hevítve Ömlesztőnk, 10 5 percen keresztül. A maradékot acetonban oldjuk és abból kristályosítjuk. 1,5 g (41 %) 5 - metil - 3 - (6 - metil - 2 - piridil) - 2H,5H - 1,3 - oxazino[5,6- cJ[l,2]benzotiazin - 2,4(3H) - dión - 6,6 - dioxidot kapunk [(7) képíetű vegyidet]. ’5 Olvadáspont: 248 — 250 °C; Spektroszkópiás adatok: ÏR (Kör): 1190, 1360, 1410, 1640, 1715, 1790 cm"’3.; „ ■H NMR, S, (DMSO-d6): 2,43 (s, 3H), 3,0 (s, 3H), 7.4 (e, 2H), 7,97 (e, 5H). A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek farmakológiái hatását az alábbiakban ismertétjük. A) Gyulladásgálió hatás A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek gyulladásgátló hatását karragénne! indukált ödéma gátlásának mérésével határozzuk meg, Winter, C. A., Risiey, E. A. és Nuss, G. W. [Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 11, 544 (1962)] módszere szerint. A vizsgálatot Spargue-Dawey HC/CEY patkánytörzsből származó hím, 90-110 g-os patkányokkal végezzük. A vizsgálandó vegyületeket 5 %os gumiarábikumoídaíban szuszpendálva gyomorszonda segítségével orálisan adagoljuk, majd 1 óra elteltével az állatok jobb talpába 0,1 ml 0,9%-os nátrium-kló: id-oldatban szuszpendálí 1 %-os karragénszuszpenziót injektálunk. Minden esetben 10 m!/kg térfogatban adjuk a vizsgálandó vegyületeket. A kontroll állatoknak 5 %-os gumiarábikumoldatot adunk 10 ml/kg mennyiségben. Higanyos plelizmométer segítségéve! meghatározzuk mindegyik láb térfogatát a karragén injektálását közvetlenül megelőzően (0. időpont), majd az injekciót követő 3. és 5. órában. Minden állatnál meghatározzuk a gyulladásindexet (lj illetve í5) a karragén injektálást követő 3. illetve 5. órában, a következő képlet segítségével: 3C ?! 40 50 I = v3 V0 x 100; bi illetve E = V, x 100, 80 ahol V3 a karragén injektálását követő 3. órában mért lábtérfogatot és Vs a karragén injektálását követő 5 órában mért lábtérfogatot jelenti. Az átlagos gyulladás-indexet (It3 illetve It5) a kontroll csoporttal kapott 3 órás és 5 órás értékekből számítjuk ki. A %-ban kifejezett ödémagátló hatást (gyulladáscsökkentő hatás) a következő képletek segítségével számítjuk ki: A3 U3-IOO x 100, A5 Its-lj ÏÎ5-100 X 100 ahol A3 a gyulladásgátló hatást, azaz az ödéma %-os gátlását jelenti, a karragén injektálást követő 3. órában, A s pedig az 5. órában mért gyulladásgátló hatást jelenti. A gyulladásgátló hatás az alkalmazott dózisok logaritmusával arányos. A logaritmus dózis - %os hatás görbéből meghatározhatjuk azt a dózist, amely az ödéma térfogatát 25 %-ra csökkenti. Mivel az elérhető legnagyobb hatás 50 %-os csökkentést jelent az ödématérfogatban, a fenti dózist, amellyel az ödématérfogat 25 %-ra csökkenthető, ED5C értéknek tekintjük. Az (I) táblázatban közöljük az (I) általános képletü vegyüleíekkel kapott vizsgálati eredményeket. B) Fájdalomcsillapító hatás Az (I) általános képleiű vegyületek fájdalomcsillapító hatását acetilkolinnai indukált fájdalom csökkentésének mérésével határozzuk meg, Collier, H. O. W. és munkatársai [Br. J. Pharmac. Chemother. 32, 295 (1968)] módszerével. 20-25 g súlyú hím egereket (Swiss törzs) használunk. Az egereket elkülönített ketrecekbe helyezzük. Minden állatnak 0,32 mg/ml koncentrációjú acetilkolin-bromid-oldatból 0,2 ml/20 g dózist injektálunk intraperitoneálisan, ami 3,2 mg/kg acetilkolin-bromid-dózisnak felel meg. Az egyes állatoknál 5 percen át jegyezzük a vonaglások vagy torzulások számát. 5 perc elteltével 5 %-os gumiarábikumoidatban beadjuk a vizsgálandó vegyületeket. A vegyületek beadását követő 40. és 120. percben újabb acetilkolin injekciót adunk, és újra 5 percen át figyeljük a vonaglások és torzulások számát. A vonaglások és torzulások számának %-os csökkenését az alábbi képletek segítségével számoljuk ki, a kezelést követő 40. illetve 120. percben: a40 = N°~N411 x 100 N0 V0 a 0. időpontban, azaz közvetlenül a karragén ^ Ni beadása előtt mért térfogatot, 6 5 120 N0 x 100
