186904. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a hatóanyagot folyamatosan leadó gyógyászati készítm előállítására
25 186904 26 9. táblázat Idő Felszabadult tetragasztrin, % (kumulativ adatok) (nap) L/G: 50/50 L/G: 67/33 L/G: 75/25 L/G: 100/0 1. 6,0 1,0 1,7 1,9 3. 12,9 2,1 3,2 3,0 7. 23,3 7,1 8,0 5,1 9. 27,2 12,2 11,6 6,5 11. 30,3 20,2 15,8 8,2 15. 36,7 40,0 27,0 14,0 17. 39,3 45,0 29,7 17,9 21. 44,5 51,8 35,1 25,5 24. 49,6 55,6 37,9 30,4 28. 58,8 59,6 41,1 36,1 31. 68,8 62,3 42,8 40,1 35. 81,5 67,3 45,0 45,6 39. 91,0 74,3 47,6 50,7 42. 95,9 81,9 50,6 55,3 46. 96,5 89,1 55,5 60,4 49. 97,5 93,2 60,0 65,2 53. 95,4 64,8 70,0 56. 96,3 68,6 73,6 59. 97,0 73,1 77,8 63. 97,2 77,1 81,5 70. 82,7 86,1 74. 85,0 87,5 84. 90,4 89,5 A 9. táblázat adataiból megállapítható, hogy kis molekulasúlyú polil akti dók felhasználásakor a tetragasztrin folyamatosan szabadul fel a készítményből, és a hatóanyag felszabadulásának időtartamát a hidrolizáló poliészter összetétele szabja meg. 33. példa 9,5 mg, D,L-tejsav- és glikolsav-egységeket ekvimoláris arányban tartalmazó polilaktidot (a polimer 1 súly/térfogat %-os kloroformos oldatának viszkozitása 0,126) 0,25 ml desztillált dioxánban oldunk, és az oldathoz 0,5 mg egér epidermisz-növekedési faktor (EGF) 0,1 ml desztillált vízzel készített oldatát adjuk. Az elegyet poli-tetrafluoretilén-vászonra öntjük, és a képződött filmből fény kizárása közben, nitrogén-áramban elpárologtatjuk az oldószert. A filmet 48 órán át 40 °C-on, 0,01 Hgmrn nyomáson szárítjuk, majd a filmből 70 °C-on 10 másodpercig végzett préseléssel 0,02 cm vastag, körülbelül 9 mg súlyú implantációs készítményt állítunk elő. Ugyanezzel az eljárással hatóanyagot nem tartalmazó (piacéból készítményeket is elöál 1 ltunk. A készítményeket carotis-kanülön keresztül tengerimalacok bőre alá ültettük be, az állatoktól időről-időre vérmintát vettunk, és radio-immunológiai vizsgálattal mértük a vérplazma EGF-tartalmát. A vérplazma EGF-tartalma a 3. naptól kezdve növekedett, és a hatás legalább 1 héten át tartott. A 33. példában közöltek szerint járunk el, azonban D.L-tejsav- és glikol sav-egységeket ekvimoláris arányban tartalmazó, 1,06 határviszkozitású polilaktidot használunk fel, és a filmet 120 °C-on préseljük implantációs készítménnyé . Az előzőekben ismertetett vizsgálat során csak a beültetést követő 17. naptól kezdve észleltük a vérplazma EGF-szintjének emelkedését. 34. példa 40 mg, D,L-tejsav- és glikolsav-egységeket ekvimoláris arányban tartalmazó polilaktidot (a polimer 1 súly/tér-fogat %-os kloroformos oldatának viszkozitása 0,093) 1 ml, ecetsavanhidrid-mentes jégecetben oldunk, és az oldathoz 8,15 mg egér epidermisz-növekedési faktor (EGF) 0,5 ml víz* és 3 ml ecetsavanhidrid-mentes jégecet elegyével készített oldatát adjuk. A kapott oldatot 24 órán át fagyasztva szárítjuk, majd a kapott poralakú terméket 50 °C-on 36,1 mg súlyú, 2 mm x 2 mm x 10 ram mérető implantációs készítménnyé préseljük. Az implantációs készítményt macska bőre alá ültettük be, a macska szervezetéből kanül ön keresztül időről-időre vérmintát vettünk, és radio-immunológiai módszerrel meghatároztuk a vérplazma EGF-tartalmát. Az EGF-tartalom növekedését a 3. naptól kezdve észleltük; a hatás legalább 40 napon át tartott. 35. példa A 20. példában ismertetett eljárással szarvasmarha prolaktint tartalmazó implantációs készítményeket állítunk elő, azzal a különbséggel, hogy (a) 400 mg, D,t-tejsav- és glikolsav-egységeket ekvimoláris arányban tartalmazó poli1 akti d (a polimer 1 súly/térfogat %-os kloroformos oldatának redukált fajlagos viszkozitása 0,11) 4 ml dioxánnal készített oldatát, i1letve (b) 400 mg, D,L-tejsav- és glikolsav-egységeket ekvimoláris arányban tartalmazó, 1,06 határviszkozitású polilaktid 4ml dioxánnal készített oldatát használjuk fel. Az utóbbi esetben a mintát 110 °C-on préseljük. A hatóanyag felszabadulását a 20. példában ismertetett in vivo módszerrel vizsgáltuk. Az (a) készítmény esetében a hatóanyag felszabadulása már legkésőbb a 4. napon meg-, indult, és legalább 85 napon át tartott, míg a (b) készítmény esetén a hatóanyag felszabadulása legkésőbb a 8. napon indult meg, és legalább 85 napig tartott. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás hatóanyagként savakkal szemben stabilis, a felhasználás körülményei között egyáltalán nem vagy csak kis mértékben hidrolizáló polipeptidet - elsősorban a növekedésre, az immunrendszerre, a gyomor- és bélrendszerre vagy a hormonfüggö daganatokra ható peptid-tlpusú hormonok működését befolyásoló vagy antibakteri ál is hatással rendelkező polipeptidet - és mátrixanyagként polilaktidot tartalmazó, humán- vagy állatgyógyászati készítmények előállítására, a) amelyekből vizes, fiziológiai környezetben a polipeptid a gyakorlatilag teljes mértékű elfogyásig folya-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 50 14
