186877. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, luteinizáló hormont felszabadító hormon antagonisták és savaddiciós sóik előállítására
1 186877 2 X helyén hidrogénatomtól eltérő jelentésű helyettesítőt tartalmazó vegyületet állítsunk elő belőlük. Találmányunkban részletes eljárást ismertetünk az (I) általános képletü peptidek szilárd fázisú reakcióban történő előállítására, ezek a peptidek azonban előállíthatóak a peptidkémiában jól ismert, minden e témakörre vonatkozó szakkönyvben részletesen leírt klasszikus eljárással is. A továbbiakban néhány gyanta előállítására szolgáló eljárást ismertetünk példák segítségével. A) eljárás D-4-klór-fenilalanil-D-4-klór-fenilalanil-D-triptofil-L-szeril(0-benzil)-L-tirozil-D-arginil(NG- tozil)-L-leuci!-L-arginil(NG-tozil)-L-prolil-D- alanil-benzhidril-amin gyanta előállítás Beckman Model 990 - a következőkben ismertetésre kerülő mosóciklus elvégzésére beprogramozott - automata peptid-szintetizátor reakcióedényébe 1,05 g (0,5 mmól) benzhidril-amin gyantát helyezünk. A mosóciklus lépései a következők: a) metilén-klorid, b) 33%-os trifluor-ecetsav metiiénkloridban (kétszeri mosás 1 illetve 25 percig), c) metilén-klorid, d) etil-alkohol, e) metilén-klorid, f) 10%-os trietil-amin kloroformban (kétszeri mosás 3-3 percig), g) metilén-klorid. A kimosott gyantát 320 mg (1,5 mmól) terc-butil-oxi-karbonil-D-alaninnal metilén-kloridos közegben keverjük, és 1,5 mmól diizopropil-karbodiimidet adunk hozzá. Az elegyet szobahőmérsékleten 1 órán át keverjük, majd az aminosav-gyantát metilén-kloriddal mossuk. Ezután a gyantához kapcsolt, védett aminosavaí az előzőekben leírt mosóciklus b)-g) lépésein visszük át. Ezután az előbbivel azonos műveletekkel egyenként hozzákapcsoljuk a következő aminosavak 1,5-1,5 mmól mennyiségét: terc-Boc-prolin, terc-Boc-L-arginin (NG-tozil), terc-Boc, L-leucin, terc-Boc-D-arginin (NG-tozil), terc-Boc-L-tirozin, terc-Boc-L-szerin (O-Bzl), terc- Boc-D-triptofán, terc-Boc-D-4-klór-fenilalanin és terc-Boc-D-4-klór-fenilalanin. Az utolsó összekapcsolási reakció befejezéséül az N-terminális terc-Boc-csoportot eltávolítjuk, majd a kapott gyantát metil-alkohollal mossuk és szárítjuk. B) eljárás N-acetil-D-4-klór-fenilalanil-D-4-klór-fenilalanil-D-triptofil-L-szeril(0-benzil)-L-tiroziI-D- arginil(NG-tozil)-L-leucil-L-arginil(NG-tozU)-L- prolil-D-alanil-benzhidril-amín gyanta előállítása Az A) eljárással kapott gyantát 30 percen át 60 ml, 100 ml oldatban 5 g imidazolt és 3,54 ml ecetsavanhidridet tartalmazó metilén-klorid oldattal kezeljük. Az acetilezett peptid-gyantát metilénkloriddal és metil-alkohollal mossuk és szárítjuk. C) eljárás D-4-klór-fenilalanil-D-4-klór-fenilalanil-D-triptofil-L-szeril(0-benzil)-L-tirozil-D-lízil(Nr-2-kiórbenzil-oxí-karbonil)-L-leucil-L-arginil(NG-tozil)L-prolil-D-alanil-benzhidril-amin gyanta előállítása A gyantát az A) eljárásban megadottal azonos mennyiségű anyagokból, azonos körülmények között állítjuk elő, azzal az eltéréssel, hogy terc-Boc- D-arginin(NG-tozil) helyett terc-Boc-D-!izin(Nc-2- klór-benziloxi-karbonil)-t építünk be. DJ eljárás A C) eljárással kapott gyantából a megfelelő N-terminális acetil-származéicot a B) eljárásban leírt módon állítjuk elő. E) eljárás D-3-(2-naftil)-alanil-D-4-klór-feniialanil-D-triptofil-L-szeril(0-benzil)-L-tirozü-D-arginiI(NG- toz.iI)-L-ieucil-L-argini!(NG-tirozil)-L-proliI-D- alanil-benzhidril-amin gyanta előállítása A gyantát az A) eljárásban megadottal azonos mennyiségű anyagokból, azonos körülmények között állítjuk elő, azzal az eltéréssel, hogy N-terminális aminosavként terc-Boc-D-4-klór-fenila!anin helyett terc-Boc-D-3-(2-naftil)-alanint kapcsolunk hozzá. F) eljárás N-acetil-D-3-(2-naftil-alani!-D-4-klór-fenilalanil-D-triptofil-L-szeril(0-benzil)-L-tirozil-D-arginil(NG-tozil)-L-leucil-L-arginil(NG-tirozi!)-L- prolil-D-alanil-benzhidril-amin gyanta előállítása Az E) eljárásban kapott gyantát a B) eljárásban leírt módon acetilezzük. Az acetilezett peptid-gyantát metilén-kloriddal és metil-alkohollal mossuk és szárítjuk. G ) eljárás L-3-(2-naftiI)-alani!-D-4-klór-fenilalanil-D- triptofil-L-szeril(0-benzil)-L-tírozil-D-lizil(N,:-2- klór-benzil-oxi-karbonil)-L-leucil-L-arginil(NG- tozi!)-L-prolil-D-alanil-benzhidril-amin gyanta előállítása A gyantát az E) eljárásban megadottal azonos mennyiségű anyagokból, azonos körülmények között állítjuk elő, azzal az eltéréssel, hogy a terc-Boc- D-arginin(NG-tozil) helyébe terc-Boc-D-lizin(N£-2- klór-benzi!-oxi-karbonil)-t és a D-3-(2-naftil)alanin helyébe L-3-(2-naftil)-alanint építünk be. H) eljárás A G) eljárással kapott gyanta megfelelő N-terminális acetil-származékát a B) eljárásban ismertetett módon állítjuk elő. 7 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
