186877. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, luteinizáló hormont felszabadító hormon antagonisták és savaddiciós sóik előállítására
1 186877 2 „Halogenid” vagy „halogén” kifejezésen klorid-, bromid-, fluorid- és jodidiont vagy -atomot értünk. „Aminosav” kifejezésen a jól ismert és hozzáférhető. a peptidkémiával foglalkozó szakkönyvekben általánosan leírt aminosavakat értjük. (Lásd például: Kopple, K. D., Peptides and Amino Acids, W. A. Benjamic Inc., New York and Amsterdam, 1966, pp 4-7.) Valamely aminosav „acil-részén” a megfelelő aminosavból annak karboxilcsoportjából a hidroxilcsoport eltávolításával kapott csoportot értjük. -„Aminosav-maradék” kifejezésen a megfelelő aminosavból annak karboxilcsoportjából a hidroxilcsoport és aminocsoportjából egy hidrogénatom eltávolításával kapott csoportot értjük. N° jelentése az arginin oldalláncának nitrogénatomjai. A „Ph—”jelölés fenilcsoportot, a „—Ph—’’jelölés pedig 1,4-feniléncsoportot jelent. Az „Ac” jelölés jelentése acetil-, a „Succ” jelölésé HOOC—(CH2)2—CO—, azaz szukcinil-, azaz 3- karboxi-l-propionil-csoport. „A” jelentése a szilárd fázisban végzett szintézis során alkalmazásra kerülő szilárd gyantahordozó és a vele kötést létesítő csoport, például —NH— CHPh—Ph—(gyantahordozó). A „kötést létesítő csoport” kifejezésen „Y”-nak —CH — Ph—Ph részét értjük. Általában a leírásban az aminosavak és védöcsoportok jelölésére használt rövidítések az IUPACIUB Biokémiai Nómenklatúra Bizottsága ajánlása szerintiek, lásd Biochemistry, 11, 1726 (1972). A t-Boc jelölés például terc-butil-oxi-karbonil-, a Z benzil-oxi-karbonil-, a Tos tozil-, a Bzi benzücsoportot jelent. Az egyes aminosavak jelölésére használt rövidítések a következők: Alá, alanin; Lys, lizin; Arg, arginin; Gly, glicin; Leu, leucin; Orn, ornitin; Phe, fenilalanin; Pro, prolin; Ser, szerin; Trp, triptofán és Tyr, tirozin. A leírásban szereplő minden aminosav az L-sçrozatba tartozik, hacsak más jelölés nem szerepel. így például D-AIa jelentése D-alanil-maradék, a D-Phe jelentése D-fenilalanil-maradék, és a D-Trp jelentése D-triptofil-maradék. Az LH-RH analógokat a találmány szerinti eljárás alkalmazásával savaddíciós sóik formájában nyerjük. Ilyenek lehetnek a szerves savakkal, például ecetsawal, tejsavval, borostyánkősavval, benzoesavval, szalicilsavval, metánszulfonsavval vagy p-toluolszulfonsavval képzett; a polimer savakkal, például csersavval vagy karboxi-metil-cellulózzal képzett és a szervetlen savakkal, például hidrogénhalogenidekkel, mint a hidrogén-klorid vagy kénsavval vagy foszforsavval képzett savaddíciós sók. Adott esetben valamely savaddíciós sót átalakíthatunk más savval képzett savaddíciós sóvá, például Boissonas, R. A. és munkatársai: Helv. Chim. Acta, 43, 1349 (1960) irodalmi helyen közölt módszerének alkalmazásával, mely szerint megfelelő ioncserélő gyantával való kezelés révén nyerünk toxikus hatástól mentes, gyógyászati szempontból megfelelő savval alkotott sót. Erre a célra alkalmas ioncserélő gyanták a cellulóz alapú kationcserélők, például a karboxi-metil-cellulóz, a kémiailag módosított keresztkötéses dextrán kationcserélők, például a Sephadex C márkanéven forgalomban lévő kationcserélő és az erősen bázikus anioncserélő gyanták, például a Greenstein, J. P. és M. Winitz által a Chemistry of the Amino Acids, John Wiley and Sons, Inc., New York and London, 1961, Vol. 2, p. 1456 irodalmi helyen felsoroltak. Ezen gyógyászati célra alkalmas savaddíciós sók előállítására szolgáló eljárás is a találmány körébe tartozik. A (II) és (III) általános képletű vegyületek előnyös képviselői azok a vegyületek, melyekben X, R1, R2, R3, R5 és A jelentése az előzőekben megadott, R40' jelentése D-Lys (N£-R10), D-Orn (N*R10), D-Arg (NG-R.8), vagy D-His (N'-R11); R6 jelentése a szerín hidroxilcsoportját védő csoport, mely 2-bróm-benzil-oxi-karbonil-, benzil-, acetil-, tozil-, benzoil-, lerc-butil-, tetrahidropira-2-il, tritil—, 2,4-diklór-benzil- vagy benzil-oxi-karbonilcsoport lehet; R7 jelentése hidrogénatom vagy a tirozin hidroxilcsoportját védő csoport, mely az előzőekben, R6 jelentésének ismertetésére megadott csoportok valamelyike lehet; R8 jelentése arginin N5és N'1’ nitrogénatomjait védő csoport, mely tozil-, nitro-, benzil-oxi-karbonil vagy adamantiloxi-karbonil-csoport lehet; R10 jelentése lizin eamino-csoportját vagy ornitin ő-amíno-csoportját védő csoport, előnyösen tozil-, terc-butil-oxikarbonil- vagy 2-halogén-benzil-oxi-karbonilcsoport, és Ru jelentése hidrogénatom vagy hisztid.n imidazol-csoportját védő csoport, előnyösen benzil-, dinitro-fenil- vagy tritilcsoport. Az (I a), a (II) és a (III) általános képletű vegyületek ugyancsak előnyös képviselői azok, melyekben a D-hisztidil- (ha van a vegyületben), a szeril- és a tirozilmaradékokhoz nem kapcsolódik védőcsoport; az arginin-maradék(ok) erős savval, például hidrogén-kloriddal, p-toluolszulfonsawaí vagy kénsavval alkotott savaddiciós só formájában védett(ek) és a D-lizin- vagy D-ornitin-maradékok (ha vannak) 2-klór- vagy 2-bróm-benzil-oxi-karbonilcsoporttal védettek. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek értékes RH-LH antagonista hatását standard farmakológiai eljárásokkal bizonyítjuk. Ez az aktivitás kimutatható például a de la Cruz, A. és munkatársai által a Science, /9/t 195 (1976) irodalmi helyen ismertetett teszttel. Közelebbről ismertetve a vizsgálatot, azt kb. 200 g tömegű, normális négynapos ciklusokkal biró felnőtt nőstény patkányokon (Charles River Breeding Laboratories, Boston, Mass., U.S.A.) végezzük. Az analógokat 20 vagy 40% propilén-glikolt tartalmazó fiziológiás sóoldatban vagy kukoricaolájban készített szuszpenzió formájában szubkután adjuk be a prooestrus napján déli 12 órakor. A következő napon az állatokat leöljük, petevezetéküket és méhüket sóoldattal kimossuk és az oldat pete-tartalmát megvizsgáljuk. Az I. és II. táblázatban néhány, a találmány szerinti eljárással előállított, szubkután injekció formájában alkalmazott peptid aktivitását ismertetjük, referenciaként a 4 317 815. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett pepiidhez hasonlítva. \z I. táblázatban a vivőanyagként 40% propilén-5 10 15 20 25 30 '35 40 45 50 55 60 65 3
