186734. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek enzimatikus előállítására
1 I SO 734 2 10. példa Peptidek mint szuhsztnu-komponensek Az I., 2., 3. és 4. példákban leírtakhoz hasonló módon állítottuk elő a Vili. táblázatban szereplő peptidcket. A kísérleteket Radiometer pH-stat készülékben végeztük és a kitermeléseket HPLC-módszer alapján határoztuk meg. A reakció jellemzői: 5 /tmól CPD-Y, pH » 7,6 és 25 °C. Vili. táblázat Karboxipeptidáz-Y-nal katalizált pcptidszimézis pcptidekkel, mint szubszlrátokkal Szubsztrát Amin-komponens Termék Kitermelés (konc.) (konc.) %-ban Bz-Phe-Gly (20 mmól) Leucin-amid (0,25 mól) Bz-Phe-Leu-NH2 90 Bz-Gly-Phe (20 mmól) Leucin-amid (0,25 mól) Bz-Gly-Leu-NH2 10 Z-Ala-Ala (20 mmól) Leucin-amid (0,25 mól) Z-Ala-Leu-NH2 74 Z-Phe-Ala (20 mmól) Leucin-amid (0,25 mól) Z-Phe-Leu-NH2 60 Z-Phe-Ser (20 mmól) Leucin-amid (0,25 mól) Z-Phe-Leu-NH2 70 Peptidszintézis a pH változtatásával Azokban az esetekben, amikor a szintetizált peptid a CPD-Y számára nem megfelelő, a szintézist az egyébként előnyös 9—10,5 pH-tartomány alatti értékeken végezzük. 11. példa Az 1. és 3. példákban leírtakhoz hasonló módon állítottuk elő a IX. táblázatban felsorolt peptideket, pH-stat készülékben és a megadott pH-értékck mellett. A reakció jellemzői: 15 pmó\ CPD-Y és 25 °C. IX. táblázat Karboxipeptidáz-Y-nal katalizált peptidszintézis a pH függvényében Szubsztrát (konc.) Amin-komponens (konc.) Termék pH Kitermelés %-ban Iz-Ala-OMe Glicin Bz-Ala-Gly 9,5 40 (50 mmól) (1,3 mól) 9.0 57 8.0 60 7.0 61 6.0 60 5,0 51 Glicin-amid Bz-Ala-GIy-NH2 9.5 77 (1,3 mól) 9,0 . 95 8,0 100 7.0 97 6,0 44 12. példa Különböző más amin-komponensek A 3. és 4. példákban leírtakhoz hasonló módon állítottuk dó a X. táblázatban szereplő peptideket. A kísérleteket pH-stat készülékben végeztük és a kitermeléseket HPLC alapján meghatároztuk. A reakció jellemzői: 4,5/zniól CPD-Y, pH = 9,7 és 25 °C. 15
