186729. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biológiailag aktív pentapeptid-származékok előállítására
1 186 729 2 B) In vivo hatások a) A vegyületek gátolják az analgetikus aktivitást, például hatékonynak bizonyultak egereken végzett úgynevezett „hot plate” kísérletekben, melyek leírása megtalálható az irodalomban. A vizsgálatot Eddy és munkatársai módosított módszerével végeztük fJ. Pharm. Exp. Therap., 107., 385 (1953)]. A találmányunk szerinti vegyületeket intracerebroventrikuláris injekció formájában alkalmaztuk, a gátlást a naloxon oldotta fel. A vegyületek továbbá hatékonyak az ecetsav redukálásában, mely egereken görcsös állapotot vált ki. A vizsgálatot Hendershot és társainak módosított módszerével végeztük [J. Pharm. Exp. Therap., 125., 237 (1959)], a találmány szerinti vegyületeket orálisan adagoltuk; a görcsös állapot naloxon hatására visszaállt. b) A vegyületek köhögéscsillapítóként is hatékonyak ; a vizsgálatot tengerimalacokon végeztük, Boura és munkatársai módszere szerint [Brit. J. Pharmacol., 39., 225 (1970)]. c) A vegyületek antidiarrhoeás hatást is mutatnak, így például redukálják a patkányoknál hasmenést okozó ricinusolajat. Számos általánosan ismert farmakológiai vizsgálatnak alávetve a találmányunk szerinti (I) általános képletű peptideket, sóikat és savaddíciós sóikat azt találtuk, hogy laboratóriumi állatoknál, beleértve a patkányokat és az egereket, ezek a vegyületek hatékony érzéstelenítők és egyaránt alkalmasak az anesztéziás állapot előidézésére és fenntartására. Erre a célra számos módon juttathatók a szervezetbe, például parenterálisan, intravénás vagy intracerebroventrikuláris injekció formájában. A vegyületek anesztéziás hatását az alábbi példákkal kívánjuk szemléltetni, anélkül, hogy alkalmazási területüket korlátoznánk. 1. A normális testhelyzet visszanyerésére irányuló reflex gátlása Ez a hatás jellemző az ismert anesztéziát előidéző szerekre, például a klorál-hidrátra (2,2,2-triklór-l,l-etán~ diói), az uretánra (etilkarbamát) és a barbiturátra (barbitursav-származékok). Az az állat, amelynél ez a reflex gátolt, nem fordul át és nem próbálja meg visszanyerni normális testhelyzetét ha a hátára fordítják. 2. A fülkagylóreflex gátlása A fülkagylóba egy drót alakú eszközt vezettünk be; a kontroll (a vegyülettel nem kezelt) állatoknál ennek hatására az érintett fülkagyló reflexszcrűen megrándul vagy megremeg. 3. A szaruhártyareflex gátlása A szaruhártyát könnyedén megérintjük egy drót alakú eszközzel; a kontroll (a vegyülettel nem kezelt) állatoknál ennek hatására reflexszerű pislogás tapasztalható. Ennek a reflexnek az ember esetében a gyógyászatban nagy jelentősége van, mert ez egyike az utolsó reflexeknek a teljes anesztézia beállása előtt. Az 1., 2. és 3. pontban leírt hatások egyaránt feloldhatók az ismert narkotikum antagonista naloxon alkalmazásával. Figyelemre méltó azonban az, hogy a találmányunk szerinti vegyületekke! ellentétben maga a morfin laboratóriumi állatoknak, például egereknek injekcióban adva bármilyen nagy dózisban sem gátolja a normális testhelyzet visszanyerésére irányuló reflex működését. Az (1) általános képletű peptidek, valamint sóik és savaddíciós sóik kisebb csoportjait alkotják azok a vegyületek, melyek képletében X3 jelentése a megadott, és a) X4 jelentése D-metionil- vagy D-metionil-szulfoxidcsoport, legcélszerűbben D-metionil-szulfoxidcsoport, b) X6 jelentése L-(4-nitro-fenil)-alanil-csoport, c) X7 jelenése L-prolil- vagy D-proiil-csoport, előnyösen L-prolilcsoport, d) R2 jelentése -OH vagy -NH2 képletű csoport. További alcsoportja az (I) általános képletű peptideknek és savaddíciós sóiknak az (V) általános képletű vegyületek, melyek képletében X4 és R2 jelentése a megadott, XG jelentése L-(4-klór-fenil)-alanil vagy L-(4-nitro-fenil)-aIanil-csoport, X; jelentése D-proiii-csoport. Az (V) általános képletű vegyületek szűkebb csoportját képezik azok a vegyületek, melyek képletében Xs jelentése L-4-nitro-fenilalanil-csoport, és a többi szubsztiluensek jelentése a következő: X4 jelentése D-metionilszulfoxid- vagy D-metionilszuifon-csoport, X; jelentése L-prolil- vagy D-prolil-csoport, R2 jelentése amino- vagy hidroxilcsoport. Az (I) általános képletű peptidek és savaddíciós sóik előállíthatok bármely, az analóg szerkezetű vegyületek előállítására az irodalomban leírt módszerrel. így előállíthatok a megfelelő aminosaval egymásutáni összekapcsolásával akár a peptidszintézis klasszikus módszereivel, akár szilárd fázisban végrehajtott reakcióval, vagy a megfelelő aminosavak előállításával, majd összekapcsolásával. Ezek a reakciók végrehajthatók például a beépíteni kívánt aminosav karboxilcsoportjának aktiválásával és azoknak á karboxil- és aminocsoportoknak a megvédésével, melyek reagálását nem kívánjuk. A módszerek általánosan ismertek a peptidkémiában; a megfelelő aktiváló- és védőcsoportok, a reakciókörülmények (az aminosavcsszekapcsolási reakcióra és a védőcsoportok eltávolítására), melyek mellett a legkisebb mértékű a racemizálócás, a következő irodalmi helyeken találhatók meg: 1 042 487, 1 048 086 és 1 281 383 számú nagy-britanniai szabadalmi leírások ; Schröder és Lüebke: The Peptides, Academic Press (1965); Bellean és Malek: J. Am. Chem. Soc., 90., 165 (1970); Tilak: Tetrahedron Letters, 849 (1968); Beyermann: Helv. Chim. Acta, 56., 1729 (1973); Stewart és Young: Solid Phase Peptide Synthesis, W. H. Freeman and Co. (1969). A reakciókörülményektől függően az (I) általános képletű peptideket szabad bázis vagy savaddíciós só alakjában nyerjük. A savaddíciós só átalakítható szabad bázissá vagy más savakkal képzett sókká, a bázis pedig átalakítható savaddíciós sóvá az irodalomban leírt ismert módszerekkel. Az (I) általános képletű peptidek, valamint farmakológiailag és gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sóik már említett morfinszerű hatásuk miatt felhasználhatók 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 j 3
