186570. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 6-alfa-metoxi-penicillin-származékok előállítására
1 2 Emellett,' mivel a különböző (Maktamázokkal szembeni stablitásuk kiváló, a 0-laktamáz-termelő baktériumokkal szemben hatásosak. Ezenkívül a találmány szerinti hatóanyagokat igen jól tűri a szervezet, s így mind az ember-orvoslásban, mind az állat-orvoslásban helyi és általános fertőzések kemoterápiájában és proilaxisára alkalmazhatók. Azok a betegségek, amelyeket a találmány szerint előállított vegyületekkel meg lehet előzni, vagy meg lehet gyógyítani, például a következők: légúti, felsőlégúti- és húgyúti fertőzések, e vegyületek főképpen a következő betegségeknél hatásosak: garatgyulladás (pharyngitis), tüdőgyulladás (pneumonia), hashártyagyulladás (peritonitis), vesemedence- és vesegyulladás (pyelonephritis), fülgyulladás (otitis), hólyaghurut (cystitis), szívbelhártyagyulladás (endocarditis), hörghurut, (bronchitis), ízületi gyulladás (arthritis) és általában általános fertőzések. Mint említettük a találmány szerint előállított vegyületek azért; olyan hatásosak, mivel az I általános képletű vegyületek úgy in vitro, mint in vivo a káros mikroorganizmusokkal szemben, főképpen a Gram-pozitív és Gram-negatív baktériumokkal és a baktériumszerű mikroorganizmusokkal szemben erős hatást fejtenek ki, s ilyen esetekben ezek a vegyületek széles hatásspektrumukkal tűnnek ki. Ezekkel a penicillin-származékokkal például olyan lokális és/vagy szisztémás megbetegedések kezelhetők és/vagy előzhetők meg, amelyeket a következőkben felsorolt kórokozók egyedül, vagy többedmagukkal okozhatnak, • Micrococcaceae, ilyenek a staphylococcusok, Lactobateriaceae, ilyenek a streptococcusok, Neisseriaceae, ilyenek a neisseria baktériumok, Corynebacteriaceae, ilyenek a corynebaktériumok, Enterobacteriaceae, ilyenek az Escherichia csoportba tartozó E. coli baktériumok, Klebsiella baktériumok, például K. pneumoniae, Protus baktériumok, például P. vulgáris, Salmonella baktériumok, például S. typhimurium, Shigella baktériumok, például Sh. dysenteriae, Pseudomonas baktériumok, például Pséudonomas aeruginosa, Aeromonas baktériumok, például Aeromonas liquefaciens, Vibrionaceae, ilyenek a vibro baktériumok, például a Vibrio cholerae, Brucellaceae, vagy parvobaktériumok, ilyenek'a Pasteurelia baktériumok, Haemphilus baktériumok, például Haemophilus influenzae, Bordetella baktériumok, például a Bordetella pertussis, Moraxella baktériumok, például a Moraxella Tácunata, Bacteroidaceae, ilyenek a Bacteroides baktériumok, Fusiformis baktériumok, péidáula Fusobacterium fusiforme, Sphaerophorus baktériumok, például a Sphaerophorus necrophorus, Bacillaccae, ilyenek az aerob spóraképző baktériumok. például a Bacillus anthracis, ilyenek az anaerob spóraképző clostridiumok, például a Clostridium perfringens. Treponemataceae, ilyenek a Borrelia baktériumok, Treponema baktériumok, például a Treponema pallidum, Leptospira baktériumok, például a Leptospira interrogans, A felsorolt kórokozókat csupán példaképpen említettük, a felsorolás semmiképpen nem fogható fel korlátozásnak. A találmány szerint előállított 6a-metoxi-penicillínek hatékonysága például a következő vizsgálatokkal bizonyítható. 1. In vitro kísérletek A vizsgálatokhoz a mikrotitráló rendszer sorozathígításos módszerét alkalmaztuk. A vizsgálandó anyagok bakteriosztatikus hatását folyékony közegben vizsgáltuk. A vegyületek baktériosztatikus hatását a következő koncentrációkban vizsgáltuk: 128 , 64, 32, 16, 8, 4,2,1,0,5, 0,25, 0,12, 0,06 /ig/ml. A következő összetételű táptalajt használtunk: 10 g peptont, 8 g Oxoid-féle húskivonatot, 3 g nátrium-kloridot, 2 g szek-nátrium-foszfátot desztillált vízzel 100 ml-re töltöttünk fel. (pH = 7,2—7,4). A primer tenyészetek kora körülbelül 20 órás volt. A szuszpenzió csíraszámát Eppendorf fotométerrel állítottuk be (küvetta átmérő 14 mm, szűrő 546 mm), úgy, hoey egy báriumszulfát, összehasonlító szuszpenzió zavarosságához viszonyítottuk. Ez utóbbi szuszpenziót úgy készítettük, hogy 97 ml 1%-os kénsavhoz 3,0 ml 1%-os bárium-klorid oldatot adtunk. A csíraszám beállítása után a Streptococcus Aronson törzset 1 : 15 arányban és a iuubi teszt-törzset 1 : 1500 arányban és a többi teszt-törzset 1 : 1500 arányban konyhasó oldattal továbbhígítottuk. A mindenkori vizsgálandó anyagból 16 mg-ot mértünk 10 ml-es mérőlombikba és oldószerrel jelig töltöttük. A további hígításokat desztillált vízzel vagy a mindenkori oldószerrel végeztük. A mikrotitráló lemezek mélyedéseibe 0,2 ml táptalajt, 0,01 ml-t a vizsgálandó anyag megfelelő hígításából és egy csepp (0,01 ml) csíraszuszpenziót mértünk be. A lemezeket ezután 18-20 órán át 37°C-on inkubáltuk. Az oldószer-kon troli beállítását mindig elvégeztük. A leolvasást makroszkóposán végeztük, s a mindenkori határkoncentrációt (a legalacsonyabb, még bakteriosztatikus hatású koncentráció) állapítottuk meg. A teszt-mikroorganizmusok az alábbiak voltak: Escherichia coli ATCC 11 775, Serratia marcescens ATCC 14 880, Klebsiella pneumoniae ATCC 10 031 és BC 6. Proteus mirabilis BC 17, Proteus rettgeri BC 7, Enterobacter cloacae ATCC 13 047, E. coli R+TEM (/3-laktamáz termelő) és K. pneumoniae 1088 E (0-laktamáz termelő). A találmány szerint előállított vegyületek tipikus képviselőinek leolvasott minimális gátló koncentrációit (MIC) az 1. táblázatban közöljük. Itt az I általános képletű vegyületek nátriumsóiról van szó, ahol A * p-hidroxi-fenil és R a következőket jelenti: Vegy ület R A -S02NH2 B -NH.O-S02NH.<N-J 186 570 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4
