186387. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-alfa-acetiltio-17-hidroxi-3-oxo-17-alfa-preagn-4-én-21-karbonsav gamma-lakton előállítására
5 186387 6-szteroid kiindulási anyag grammjára számított 1—10 milliliteres, előnyösen 3—6 milliliteres mennyiségben alkalmazzuk, a tioecetsavat a szteroid kiindulási anyag móljára számított 1,1—20 mólnyi, előnyösen 1,5—7 mólnyi mennyiségben alkalmazzuk. Az addíciós reakció hőmérséklete 10—120 °C, előnyösen 30—100 °C, leginkább 50—85 °C. Kívánt esetben az addíciós reakciót más — a tioecetsavnál erősebb — sav jelenlétében vezetjük le, amelyet katalitikus arányban alkalmazunk. Az addíciós reakció termék olyan elegy, amely tartalmazza a kívánt célterméket, vagyis a 7a-izomert és a mellékterméket, vagyis a 7 ß-izomert. A gyógyászatilag hatásos 7a-izomert (spironolakton) az elegyből hagyományos módon, pl. kristályosítás alkalmazásával könynyen elkülöníthetjük. Amikor a kívánt célterméket, a 7<x-izomert kristályosítással tisztítjuk, általában a reakcióelegyhez megfelelő mennyiségű vizet vagy víz és poláros oldószer kombinációját adjuk és a kapott elegyet lehűtjük, majd szűrjük a kicsapott cél termék, a 7a-izomer elkülönítése céljából. A fennmaradó anyalúg (szűrlet), amelytől jó közelítéssel elkülönítettük a célterméket, általában tartalmaz 7 ß-izomert, kismennyiségű maradék 7a-izomert és a reakció során át nem alakult kiindulási anyagot, a 4,6- -dién-3-oxo-szteroid-vegyületet. A találmány szerinti eljárásban ezt a maradék-oldatot bepároljuk vagy az oldatból alkalmas módon, pl. kristályosítással, a 7ß-acetiltio-származékot tartalmazó további kristályterméket nyerünk, és az így nyert koncentrátumot, illetve kristályos terméket használjuk kiindulási anyagként, amelyből a tioecetsawal való érintkeztetés révén nyerjük a kívánt 7a-acetiItio-származékot. Annak révén, hogy oldószerként N-metil-2-pirrolidont vagy N,N-dimetil-acetamidot alkalmazunk, a 7ß-izomer konverziója 7«-izomerré kiemelkedően nagymértékű, melléktermék keletkezése minimális és a keletkezett spironolakton teljesen stabil. A találmány szerinti eljárásban a kiindulási anyagban jelenlevő 7 ß-izomer egy móljára számítva a tioecetsavat 1,1 és 20 mól, előnyösen 1,5—7 mól közötti arányban alkalmazzuk. Ha a kiindulási anyag 7a-izomert és/vagy 4,6-dién-3-oxo-szteroid-vegyületet is tartalmaz, előnyös a szteroid-vegyületek összmennyiségének minden egyes móljára vonatkoztatva 1,5—7 móllal növelni a tioecetsav mennyiségét. A találmány szerinti eljárásban az oldószert a kiindulási szteroid-vegyületek grammnyi mennyiségére vonatkoztatva 1—10 ml, előnyösen 3—6 ml mennyiségben alkalmazzuk. A találmány szerinti reakcióban is elérhetjük a kiindulási anyag konverziós rátájának növelését, ha katalitikus mennyiségben olyan sav is jelen van, amely erősebb, mint az alkalmazott tioecetsav, pl. p-toluolszulfonsav. A reakcióhőmérséklet 10 és 120 °C, előnyösen 30 és 100°, leginkább 50 és 85 °C közötti. A találmány szerinti eljárás alkalmazása során a reakció lezajlása után a rendszerben levő 7 ß-izomer aránya a 7«-izomerhez megközelíti a 4: 96 értéket, s eközben a 7 ß-izomerböl a kívánt 7a-izomertől eltérő — nem kívánt — melléktermék egyáltalán nem, vagy csak nagyon csekély mértékben keletkezik. Ennek jelentőségét még növeli, hogy a keletkezett spironolakton kiemelkedően stabil. A fenti általános ismertetés után a találmányt részletesebben néhány példa segítségével ismertetjük, amelyekre a találmány nem korlátozódik. 1. példa 5,00 g 17-hidroxi-3-oxo-17a-pregna-4,6-dién-21-karbonsav-y-Iakton (99,5%-os tisztaság, 14,6 mmól), 15 ml N-metíl-2-pírrolidon és 228 mg p-toluol-szulfonsav-monohidrát elegyét nitrogénatmoszférában 80 °C-ra melegítjük. Ezután 3,0 ml tio-ecetsavat adunk hozzá és az elegyet 2 órán át keverjük. 80 °C hőmérsékleten 5 ml ecetsavat adunk hozzá, majd 5 perc alatt 15 ml vizet csepegtetünk hozzá. Ennek a csepegtetéses hozzáadásnak a végén az'elegyet fokozatosan lehűtjük 30 °C-ra 80 perc alatt. Hűtés közben az oldatból kicsapódik az acetiltio-származék. Ezután 12 perc alatt 16,5 ml metanol és 15 ml víz elegyét csepegtetjük a reakcióelegyhez, majd az elegyet további egy órán át keverjük 30 °C hőmérsékleten, majd szűrjük. Az így kapott kristályokat metanol és víz egyenlő arányú elegyével kétszer mossuk, 25—25 ml-nyi elegyet alkalmazva, majd vákuumban szárítjuk 70 °C hőmérsékleten. Kristályos alakban 4,7951 g száraz, tiszta spironolaktont nyerünk, melynek olvadáspontja 204,4—206,3 °C. Az anyalúgot (szűrletet) ugyanakkor úgy kezeljük, hogy 125 ml vizet adunk hozzá és 20 °C hőmérsékleten egy órán át keverjük, majd szűrjük. A kapott kristályokat kétszer mossuk 25—25 ml vízzel és vákuumban 70 °C-on szárítjuk. A kapott száraz kristályok összesen 1,36 g-nyi mennyiségéből 82,9% a spironolakton és 17,1% a 7 ß-acetiltio-szärmazök. Ebből a második lépésben nyert kristályhalmazból 1,004 g-nyi részt (mely szteroid-elegy, tehát 0,171 g 7ß-acetiltio-származékot és 0,833 g spironolaktont tartalmaz) 3 ml N-metil-2-pirrolidonban oldva 80 °C-ra melegítünk 45 mg p-toluol-szulfonsav-monohidrát jelenlétében, nitrogénatmoszférában, majd 0,5 ml tioecetsavat adunk hozzá. Az elegyet 2 órán át keverjük, majd szobahőmérsékletre hűtjük és nagypontosságú folyadék - kromatografálás alkalmazásával elemezzük. Az elemzésből kitűnt, hogy a 7 ß-acetiltio-szärmaz6k 0,032 g-ra csökkent, a spironolakton mennyisége viszont 0,933 g-ra növekedett. Ezenkívül csekély mennyiségben 17-hidroxi-3-oxo-17a-pregna-4,6-díén-21-karbonsav-v-lakton is keletkezett. A kapott elegyet 80 °C hőmérsékleten keverve, ahhoz 1 ml ecetsavat adunk, majd 3,5 ml vizet csepegtetünk hozzá. A csepegtetés befejezése után fokozatosan 30 °C- ra hűtjük a kapott elegyet; a hűtés közben kristályos alakban spironolakton csapódik ki. Ezután 3 ml metanolból és 3,5 ml vízből álló elegyet adunk hozzá és a kapott elegyet egy órán át keverjük. A kapott iszapszerű oldatot szűrjük, a kiszűrt kristályokat egyenlő arányban metanolt és vizet tartalmazó elegy 10 ml-nyi mennyiségével mossuk, így 0,7781 g spironolaktont kapunk, amelynek tisztasága 99,9%-os. A szűrlet és a mosóoldat elegyét nagypontosságú folyadékkromatografálással elemezzük és azt találjuk, hogy az elegy 0,0324 g ß-acetiltio-szärmaz0kot és 0,1444 g spironolaktont tartalmaz. Hasonló volt az eredmény, amikor N-metil-2-pirrolidon helyett N,N-dimetil-acetamidot alkalmaztunk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
