186117. lajstromszámú szabadalom • Eljárás stabil S-adaenozil-metionin származékok előállítására
186117 2 abban áll, hogy az S-adenozil-metionint nagy mértékben stabilizálják, így a szervezetben a vegyületek metilcsoport-átvivő képessége teljes egészében hasznosítható anélkül, hogy toxikus bomlástermékek keletkeznének, amelyek az SAM - által aktivált biológiai folyamatokat gátolhatnák. A vegyületek másik előnye, hogy képesek az SAM-t átjuttatni a sejteket körülvevő védőgáton. így az a biológiai folyamatok számára hozzáférhetővé válik. Toxicitás S Az akut toxicitást egérben határoztuk meg, az összes vizsgált vegyület LD?0 értéke orális alkalmazás esetén > 3 g/kg intravénás alkalmazás esetén > 1 g/kg volt. 10. táblázat Monoacetil-SAM-sók elemzési eredményei Vegyület Tapasztalati képlet N% szám. talált S% szám. talált E* 1V» 1 cm pH = 4 diacetil-herxanoil-SAM-kénsav-víz (1/2/0.5) C25H40N6O16 Sj-0,5H2O 10,69 10,68 12,21 12,19 179 diacetil-benzoil-SAM-kénsav-viz (I/2/0.5) C26H34N6O16 Sj0,5H2O 10.61 10,60 12,12 12,10 177 diacetil-szukcinil-SAM-kénsav-viz (1/2,5/0,5) C23H34N6O18 S30,5H2O 10,66 10,63 12,18 12,20 178 * l^o-os vizes oldatban (pH 4), 1 cm-es küveuában, 256 nm-en mért extinkció A vegyületek tolerálhatóságát és krónikus toxicitását Wistar és Sprague-Dowley patkányokon vizsgáltuk, 12 hónapon keresztül 20 mg/kg napi dózist alkalmazva. A kezelés befejeztével a különböző szerveken és szervrendszereken nem észleltünk kóros elváltozásokat. A teratogén tesztet nyúlon végeztük. A terápiás hatású dózis tízszeresét adva nem észleltünk teratogén hatást vagy torzulást sem a vizsgált embriókon, sem az érett magzatokon. Intravénás adagolás esetén 200 mg/kg dózisig nem pirogén hatásúak a vizsgált vegyületek. A vegyületek 40 mg/kg dózisban vénásan adva nem okoztak vérnyomásváltozást, légzés- vagy szívritmusváltozást, sem EKG-jel-változást. A vegyületek helyi tolerálhatósága 30—60 napon keresztül ismételten adott intramuszkuláris injekció vagy felületi fülvénába adott intravénás injekció esetén nyúlban kiválónak bizonyult. Farmakológiai vizsgálatok Patkányon végzett vizsgálat szerint a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek jelentős védőhatást, illetve gyógyhatást mutattak a Handlerféle zsír- és fehérjedús táplálással előidézett májelzsírosodás esetén, vagy akut alkoholmérgezéssel vagy egyéb mérgező anyaggal kiváltott elzsírosodás ellen, még 10 mg/kg SAM-ionnak megfelelő dózis esetén is. Kísérletesen — például Triton S-sel — előidézett hiperlipémia esetén patkányban a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek igen erős lipidcsökkentő hatást mutattak, amely az alkalmazott dózist tekintve — azaz 10 mg/kg, SAM-ra számítva — sokkal erősebb volt, mint az egyéb ismert lipidcsökkentő hatású vegyületek esetén. Koleszterin- és fruktóz-gazdag étrenddel artéria-elmeszesedést idézve elő csirkén, majd az állatokat parenterálisan 10 mg/kg vizsgálandó anyaggal kezelve, a vegyületek csökkentették a vér koleszterin-szintjét, és a kontrolihoz viszonyítva kedvezően befolyásolták a mellkasi és hasi aortában és az agyi kiserekben mutatkozó bevérzéseket is. A foszfolipid-metabolizmust vizsgálva kísérletileg megállapítottuk, hogy a kompenzáltan elzsirosodásban szenvedő patkányok májszövetében megnövekedett a foszfatidil-kolin mennyisége. A foszfatidil-kolin mennyisége határozott növekedést mutatott a vér-or-lipoproteinek rovására abban az esetben is, ha aß/a arányt kísérletes megváltoztattuk. Az összes fenti tesztekben világosan megmutatkozott a találmány szerinti eljárással előállított új vegyületek gyógyhatása a lipid-metabolizmus kóros elváltozásaiban. További vizsgálatokkal megállapíttottuk, hogy a patkányoknak 1 mg/kg dózisban adott találmány szerinti eljárással előállított vegyület a májban és az izomban glikolén-tartaléktápanyag felhalmozódást okozott, melyet hisztokémiai módszerekkel és kvantitatív meghatározásokkal mutattunk ki. Alloxánnal kísérletesen előidézett diabetesben a vércukorszint normális értékének beállításához szükséges inzulin mennyisége jelentősen csökkent, 0,5 mg/kg SAM-ionnal egyenértékű vegyület hatására. A fenti vizsgálatok alapján megállapítható, hogy a találmány szerinti eljárással előállított új vegyületek jelentős gyógyhatást fejtenek ki a kóros cukor-metabolizrnusra is. Végül patkányokban kísérletesen hipodiszproteinemiát indukálva, majd az állatokat 10 mg/kg SAM-származékkal kezelve azt találtuk, hogy a vegyületek hatására az össz-protein érték újra normalizálódott azáltal, hogy az albumin-szint jelentősen megemelkedett, tehát a vegyületek kifejezetten protein-anabolikus aktivitással rendelkeznek. A fenti vizsgálat és más vizsgálatok is bizonyítják a találmány szerinti új vegyületek gyógyhatásút a protein-metabolizmus zavaraiban. összefoglalva megállapíthatjuk, hogy a fenti farmakológiai vizsgálatok, valamint számos egyéb vizsgálat után — amelyekkel az emberi szervezet minden szintjén kimutatható az új vegyületek hatása — a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek klinikai vizsgálatokban is alkalmasnak 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
