186058. lajstromszámú szabadalom • Eljárás omega-ciano-1-omega-difaeanil-azaalkán származékok előállítására
186058 szívcsúcs izom mintájával Lamprecht és munkatársainak módszerével végeztük el. (Lamprecht, W. P. Stein, F. Heinz, H. Weissner: Creatinphosphat in: Bergmeyer, H. U., Methoden der enzymatischen Analyse, Verlag Cheime, Weinheim, 2, 1825—1829, (1974). A vizsgálandó anyagokat a még éber állatoknak 6 órával az oxigénhiány előidézése előtt adtuk be. A kreatinfoszfát koncentrációt határoztuk meg a szívizomban a vizsgált vegyületekkel kezelt álla- :0 toknál kapott adatokat az oxigénhiányos, kezeletlen kontroll állatokkal összehasonlítva. összehasonlító anyagként Verapamill szolgált. 4. Trombocita aggregációt gátló hatás Az anyagokat Sprague-Dawley hím patkányoknál (200—250 g) szájon át alkalmaztuk. Egy órával az alkalmazás után narkózisban vért vettünk és centrifugálással (300 g, 10 perc, 4 °C-on) trombocita gazdag plazmát nyertünk. A trombocita aggregáció fotometrikus mérése magnézium-klorid hozzáadása után következett. (Végkoncentráció 10 mmól/liter és végkoncentráció 0,02 mg/ml Collagen Stago-ból, Born-Aggregométer Mk 3. Az aggregáció mértékéül a másodpercenkénti maximális extinkcióváltozást vettük. ED 33%-ként határoztuk meg azt a dózist, amely a kollagén által indukált trombocita aggregációt 33%-ban gátolja. Referensanyagként a Verapamil szolgált. 5. Allergiaellenes hatás A vizsgálathoz a passzív hatású bőranafilaxia (PCA) modellt alkalmaztuk. A narkotizált hím patkányokat (100—140 g) 0,1 ml ovalbumin-antiszérummal intradermális injekcióval (borotvált hátbőr) szenzibilizáltuk. Körülbelül 48 órai szenzibilizálási periódus után következett a kezelés (szájon át történő alkalmazással) a vizsgálati anyagokkal. Különböző látensidők után (2, 6, 12 és 24 óra) a kísérleti állatoknak antigén (Evansblau-oldatot) adtunk be intravénásán. Mindig 30 perccel később öltük meg az állatokat, a hátbőrt lehúztuk és a belső felületen a köralakú kék színeződést mértük. Az allergiagátló hatást, mint relatív gátlást (A %) a színfoltoknak az átmérőjével adtuk meg. Referensanyagként a Verapamil szolgált. I. táblázat Magas vérnyomást csökkentő hatás, spontán magas vérnyomású s patkány (SHR) Alkalmazás: p.o. A szisztolés vérnyomáscsökkenés Példa száma ED 20% (mg/kg/I) 2 óra Rh 2) 6 óra Rh 2) 24 óra 3. 24,9 0,93 14,1 1,46 18,7 19. 7,5 3,09 19,8 1,04 46,4 20. 3,7 6,27 6,6 3,12 12,5 25. 6,8 3,41 10,2 2,02 46,4 49. 10,3 2,25 58,3 Verapamill 23,2 1,00 20,6 1,00 100 1) Dózis, amely a szisztolés vérnyomást 20%-kal csökkenti 2) Rh. = relatív hatásosság II táblázat Arítmiagátló hatás, patkány: dózis 46,4 mg/kg; alkalmazás: p. o. Példa száma Az akonitin infúziós időtartamának a meghosszabbodása (d%) 3. 122 5. 107 7. 88 8. 88 12. 128 13. 188 14. 98 15. 88 16. 61 19. 50 23. 86 24. 68 25. 186 46. 54 47. 104 53. 63 58. 53 59. 61 61. 69 62. 86 63. 70 67. 65 70. 59 72. 96 75. 71 Verapamil 29 1) 1) nem szignifikáns III. táblázat Szívvédő hatás patkányoknál 6 órával a szájon át történő alkalmazás után Példa száma Maximális hatásos Kreatinfoszfát koncentráció a szívdózis mg/kg izomban, eltérés a kontrolitól, 3. 40 + 77 5. 20 + 69 7. 40 + 49 8. 40 + 35 10. 40 + 35 16. 40 + 50 17. 40 + 51 19. 2 + 38 20. 5 + 38 67. 40 + 53 72. 40 + 38 75. 20 + 80 Verapamil 40 + 9 1) 1) nem szignifikáns IV. táblázat Trombocita aggregációt gátló halás 1 órával a szájon át történő alkalmazás után, patkányon Példa száma Aggregációgátlás1 • ED 33% (mg/kg) 3. 9,6 6. 49,0 70. 119 75. 90,2 Verapamil 2) 1) Dózis, amely a kollagén által kiváltott trombocita aggregációt 33%-kaI gátolja. 2) 46,4 mg/kg dózis aggregáció gátló hatás nélkül 4
