185986. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált n-(karboxi-alkik)-aminoacil-prolin-dipeptid-származékok előállítására

1

2

185 986

punk, amelynek olvadáspontja 181—184 °C (bomlás) (zsugorodás 170 °C körül), [aj“ = +22° (c = 1; piridin); —18° (c = 0,5; 50%-os ecetsav).

Az analízis eredménye a

C,,H„N02S • HC1 • 0,25 HjO összegképlet alapján: számított: C % 49,99; H % 5,53; N % 5.30; S % 12,14;

Cl % 13,42;

mért: C % 50,23; H % 5,38; N % 5,22; S % 12,08;

Cl % 13.27.

b) rra«sr-4-Feniltio-L-prolin-metil-észter-hidroklorid.

1,9 g (0,00719 mól) rra/isc-4-feniltio-L-prolin-hidroklorid 45 ml metanollal készített oldatához keverés közben —30 °C-on argongáz alatt 3,14 ml (6 ekv.) tionilkloridot adunk cseppenként 10 perc alatt. A reakcióelegyet —20 °C-on 2 órát keverjük, majd utána szobahőmérsékleten még 24 órát. Az oldószert csökkentett nyomáson eldesztilláljuk, és a maradékot 150 ml diklórmetánban oldjuk. A kapott oldatot kétszer mossuk 1 n nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és egyszer vízzel. Magnézium-szulfáton (vízmentes!!) végzett szárítás után az oldatot fölös mennyiségű metanolos sósavoldattal elegyítjük, és utána csökkentett nyomáson bepároljuk. Acetonitrilből történő átkristályosítás után 1,53 g színtelen kristályos m7WZ-4-feniltio-L-prolin-metil-észter-hidrokloridot kapunk, amelynek olvadáspontja 103—104 °C. [a]“ = —1,0° (c = 2,0; metanol).

c) [l(S),4R]-l-íN-[l-(etoxi-karbonil)-3-fenil-propil]-L- alanilj-L-prolin-metil-észter.

0,660 g (0,00236 mól) N-[l(S)-(etoxi-karbonil)-3-fenilpropil]-L-alanint és 0,712 g (1,1 ekv.) íra/isc-4-feniItio-L- prolin-metil-észtert reagáltatunk az 1. példa 0 pontjában leírt eljárás szerint, így 0,640 g [l(S),4R]-l-jN-[l-(etoxikarbonil)-3-fenil-propil]-L-alanilj-4-feniltio-L-prolinmetil-észtert kapunk halványsárga olajként. Rf = 0,35 (szilikagél; etil-acetát).

d) [l(S),4R]-l-[N-(3-Fenil-l-karboxi-propil)-L-alanil]-4-feniltio-L-prolin.

0,640 g (0,00137 mól) [l(S),4R]-l-(N-[l-(etoxi-karbonil)-3-fenil-propilj-L-alanilj-4-feniltio-L-propil-metilésztert oldunk 8 ml etanolban, és 1 n nátrium-hidroxid oldatot adunk hozzá, majd az l. példa g) pontjában közölt eljárás szerint feldolgozzuk. így 0,492 g [1(S),4R]l-[N-(3-fenil-l-karboxi-propil)-L-alanil]-4-feniltio-L- prolint kapunk, amelynek fajlagos forgatóképessége, [a]“ = +2,95° (c = 1,05; metanol). Rf = 0,19; eredeti (nyom), 0,57 (nyom); szilikagél (etil-acetát:piridin:ecetsav:víz = 60:20:6:11). Kiértékelés ultraibolya fényben és elszenesítéssel.

Az analízis eredménye a C24H28N2OsS • 0,5 H20 összegképlet alapján: számított: C % 61,92; H % 6,28; N % 6,02; S % 6,89; mért: C % 62,06; H % 6,21; N % 6,02; S % 6,75.

Az infravörös spektrum jellemző adatai (KBr): 3400, 1725, 1650, 740, 695 cm'1.

A magmágneses rezonanciaspektrum jellemző adatai (60 MHz, DMSO-d6): 1,15 (3H. d, J = 6,7 Hz, CH2); 7,25 (5H, S, aromás); 7,38 (5H, S, aromás). 4

4. példa

[l(S),4S]-l-[N-(3-Fenil-l-karboxi-propil)-L-alanil]-4-benziltio-L-proiin.

a) cííc-4-Bcnziltio-L-prolin-hidroklorid.

2,3 g (0,1 g atom) fémnátriumot oldunk 100 ml etanolban. Az oldathoz kverés közben hozzáadunk 11 ml (0,094 mól) a-toluoltiolt, majd utána 20 g (0,046 mólj/ra/wz-N(benziloxi-karbonil)-4-toziloxi-L-proIin-metil-észtert [Patchett et al., „Studies on Hydroxyproline '. J.A.C.S. 79, 185—192 (1957)]. Szobahőmérsékleten 20 órát keverjük, utána az elegyet 300 ml diklór-metán és 150 ml víz 5 elegyébe öntjük, és addig keverjük, amíg a szilárd anyagok feloldódnak. A rétegeket elválasztjuk, és a vizes fázist 2x150 ml diklór-metánnal extraháljuk (az emulziót kevés metanol és telített nátrium-klorid oldat hozzáadásával bontjuk meg). Az egysített szerves rétegeket 250 ml IQ telített nátrium-klorid oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és az oldószert eldesztilláljuk. A maradékot 300 ml dietil-éterrel oldjuk, és 100 ml vízzel mossuk. A nehéz sárga réteget, amely egyik fázisban sem oldódik, a vizes fázissal együtt elválasztjuk, 15 és a dietil-éteres fázist megszárítjuk, és bepároljuk, így

17,4 g cííz-N-(benziloxi-karbonil)-4-benziItio-L-prolinetil-észtert kapunk halványsárga olajként.

16,4 g as--N-(benziloxi-karbonil)-4-ben/iltio-L-prolin-etil-észtert elszappanosítunk 135 ml metanolban 32 20 ml (0,064 mól) 2 n nátrium-hidroxid oldattal az Ondetti és mtsai által a 2,028.327 sz. nagy-britanniai szabadalmi bejelentés 44. b) pontjában közzétett eljárás szerint, így

12,6 g halványsárga olajat kapunk. Ebből 11.7 g-ot oldunk 60 ml acetonitrilben, és 4,7 g 1-adamantil-aminnal ele- 25 gyítjük.így 12,7 g dsz-N-(benziloxi-karboni!)-4-benziltie-L-prolin-l-adamantil-ammóniumsót kapunk színtelen szilárd anyagként, amelynek olvadáspontja 190—192 °C (zsugorodik 182 °C-on). [a]“ = —20° (c = 1; metanol).

30 Az analízis eredménye a

C,0H21NO4S • C10Ht7N összegképlet alapján: számított: C % 68,93; H % 7,83; N % 5,36; S % 6,14; mért: C % 68,62; H % 7,41; N % 5,47: S % 5,88.

Ezt az 1-adamantil-emmóniumsót 40 ml etil-acetátban 35 S7uszpendáljuk, és keverés közben 30 ml 1 n sósavoldattal 'elegyítjük. A vizes fázist további 3x40 ml etilaoetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves rétegekét megszárítjuk, és az oldószert eldesztillálva 8.9 g dsz-N(benziloxi-karbonil)-4-benziltio-L-prolint kapunk visz- 40 kózus halványsárga olajként.

7,8 g (0,021 mól) dsz-N-(benziloxi-karbonil)-4-benz;Itio-L-prolin 115 ml ecetsavval készített oldatához keverés közben 45 ml tömény sósavoldatot adunk, és 1 órán át forraljuk visszafolyó hűtő alatt. A sárga oldatot lehűt- 45 jük. és a savak nagyrészét rotációs bepárlón 26,6 Pa (0,2 mmHg) nyomáson eltávolítjuk, és a kapott részben kristályos maradékot 200 ml izopropanollal cldörzsöljűk, és a bepárlást megismételjük, végül 26,6 Pa-ra (0,2 mmHg) csökkentve a nyomást. A szilárd maradékot 50 dietil-éter alatt szétdörzsöljük, éjszakán át hűtjük, szűrjük, dietil-éterrel mossuk, és vákuumban megszárítjuk, így 4,9 g d.vz-4-benziltio-L-prolin-hidrokloridot kapunk halvány sárgásbarna szilárd anyagként, amelynek olvadáspontja 130—132 °C (zsugorodás 125 °C). Fajlagos 55 forgatóképesség, [a]“ = +7,5° (c = 1; metanol).

Az analízis eredménye a C12H,5N02S • HC1 összegképlet alapján:

számított: C % 52,64; H % 5,89; N % 5,12; S % 11,71;

Cl % 12,95;

60 nért: C % 51,91; H % 5.78; N % 5,09; S % 11,82;

Cl % 12,79.

b) djz-4-Benziltio-L-prolin-metil-észter-hidroklorid.

dsz-4-Bcnziltio-L-prolin-hidrokIorid metanolos olda-65

7