185986. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált n-(karboxi-alkik)-aminoacil-prolin-dipeptid-származékok előállítására

1

185 986

2

[ajTM = —2,7° (c = 1 ; metanol);

Rf = 0,56 és 0,22 (nyomok) [szilikagél; n-butanol; ecetsav: víz = 4:1:1; láthatóvá téve ultraibolya fénnyel és elszenesítéssel (az oldat 20 g ammónium-szulfát vízzel 100 ml-re való oldása- g val és ehhez 4 ml tömény kénsav hozzáadásával készül)].

Az analízis eredménye a C2„H2gN205S • 0,25 H20 összegképlet alapján:

számított: C % 62.52; H % 6,23; N % 6,07; S % 6,95; w mért: C % 62,96; H % 6.09; N % 6,34; S % 6,87,

Az infravörös spektrum jellemző adatai (KBr): 3420,

1710, 1650, 740, 695 cm-.

A magmágneses rezonanciaspektrum jellemző adatai (60 MHz, DMSO-d6): 1,15 (3H, J = 6,7 Hz); 7,20 (5H. 15 S, aromás); 7,35 (5H,S, aromás).

2. példa

(S,S)-4-(4-FIuor-fenoxi)-l-[N-(3-fenil-l-karboxi-propil)-L-alanil]-L-prolin. 20

a) (c«z)-4-(4-Fluor-fenoxi)-L-prolin-metil-észter-hidroklorid.

0,250 g (0,011 mól) (cisz)-4-(4-fluor-fenoxi)-L-prolin [amely az Ondetti és mtsai által a 2,028.327 sz. nagybritanniai szabadalmi bejelentés 36. példájában közölt 25 módon állítható elő] 70 ml metanollal készített szuszpenziójához —30 °C-on keverés közben argongáz alatt 8,09 ml (10 ekv.) tionil-kloridot adunk. A reakcióelegyet —20 °C-on 2 órát keverjük, utána a hú'tőfürdőt eltávolítjuk, és az elegyet szobahőmérsékleten 16 órát keverjük. Az ol- 30 dószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk, és a maradékot 150 ml diklór-metánban oldjuk. A kapott oldatot kétszer mossuk 1 n nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és egyszer vízzel vízmetes magnézium-szulfáton végzett szárítás után az oldatot fölös mennyiségű sósavval ele- 35 gyítjük, és csökkentett nyomáson bepároljuk. Metanol/dietil-éter elegy bői átkristályosítva 1,49 g terméket kapunk. Az anyalúgból további 0,5 g terméket nyerünk ki, úgy hogy összesen 1,99 g (m~j-4-(4-íluor-f'enoxi)-L- prolin-metil-észter-hidrokloridot kapunk, amelynek ol- 40 vadáspontja 147—148 °C (zsugorodás 144 °C). Fajlagos forgatóképesség, [a]= +6,96° (c = 1,55; metanol).

b) (S,S)-l-[N-[l-(Etoxi-karbonil)-3-fenil-propil]-L-alanil]-4-(4-fluor-fenoxi)-L-prolin-metil-észter.

0,651 g (1,1 ekv.) (mcj-4-(4-fluor-fenoxi)-L-prolin- 45 metil-észter-hidrokloridot és 0,600 g (0,0024 mól) N[l(S)-(etoxi-karbonil)-3-fenil-propil]-L-alanint reagáltatunk az 1. példa f) pontja szerint így 0,600 g (S,S)-1-(N[l-(etoxi-karbonil)-3-fenil-propil]-L-alanil)-4-(4-fluorfenoxi)-L-prolin-metil-észtert kapunk halványsárga olaj- 50 ként. Rf = 0,32 (szilikagél; aceton: etil-acetát: diklórmetán = 1,5:2,5:6).

c) (S,S)-l-[N-(3-FeniI-l-karboxi-propil)-L-alaniI]-4-(4- fluor-fenoxi)-L-prolin.

0,600 g (0,00119 mól) (S,S)-l-[N-[l-(ctoxi-karbonil)- 55

3-fenil-propil]-L-alanil|-4-(4-fluor-fenoxi)-L-prolin-metil-észter 7 ml etanollal készített oldatát 1 n nátriumhidroxid oldattal elegyítjük, és az 1. példa g) pontjában leírt eljárás szerint feldolgozzuk, így 0,470 g (S,S)-1-[N(3-fenil-l-karboxi-propil)-L-alanil|-4-(4-fluor-fenoxi)-L- 60 prolint kapunk, amelynek fajlagos forgatóképessége,

[a]g> = +4,36 0 (c = 1.05; metanol). Rf = 0,20 (szilikagél; etil-acetát:piridin:ecetsav: víz = 60:20:6:11); kiértékelés ultraibolya fényben és elszenesítve.

Az analízis eredménye a C24H27N206F • 0.25 H20 összegképlet alapján.

számított: C % 62,26; H % 5,98; N % 6,05; F % 4.10; mért: C % 62,35; H % 5,98; N % 6,23; F % 4.03.

Az infravörös spektrum jellemző adatai (KBr): 3420, 1720, 1650, 1500, 1200 cm"1.

A magmágneses rezonanciaspektrum jellemző adatai (60 MHz, DMSO-g6): 1,23 (3H, d, J = 6.7 Hz); 6,90—7,35 (9H, M, aromás).

3. példa

[l(S),4R]-l-[N-(3-Fenil-l-karboxi-propil)-L-aianil]-4-feniltio-L-prolin.

a) transz-4-Feniltio-L-prolin-hidroklorid.

1,9 g (0,083 g atom) fémnátriumot oldunk 90 ml etanolban. Az oldathoz keverés közben 8,4 ml 10.082 mól) tiofenolt, majd utána 17 g (0,039 mól) d.vz-N-tbenziloxikarbonil)-4-toziloxi-L-prolin-metil-észtert adunk. [Patched et al., ,.Studies on Hydroxiproline”. J.A.C.S., 79, 185—192 (1957)]. Szobahőmérsékleten 20 órát keverjük, majd az elegyet 300 ml diklór-metán és 150 ml víz elegyébe öntjük, és addig keverjük, amíg minden szilárd anyag feloldódik. A fázisokat elválasztjuk, és a vizes fázist 2x150 ml diklór-metánnal extraháljuk. (Az emulziót kevés etanol és telített nátrium-klorid oldat hozzáadásával szüntetjük meg.) Az egyesített szerves fázisokat 150 ml telített nátrium-klorid oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és az oldószert eldesztillálva 17 g részben kristályos maradékot kapunk. Ezt 50 ml dietil-éterrel kevertetjük, jeges vízben 1 óráig hűtjük, és a szilárd anyagokat kiszűrjük. Az éter ledesztillálása után a szűrletből 10,9 g transz-N-(benziloxi-karbonil)-4-feniltio-L-prolin-etil-észtert kapunk.

A 10,9 g (0,028 mól) transz-N-(benziloxi-karbonil)-4- feniltio-L-prolin-etil-észtert 95 ml metanolcan 22 ml (0,044 mól) 2 n nátrium-hidroxid oldattal hidroiizáljuk az Ondetti és mtsai által a 2,028.327 sz. nagy-britanniai szabadalmi bejelentés 44. példája b) pontjában közölt eljárás szerint, így 10,9 g halványsárga viszkózus olajat kapunk. Ezt feloldjuk 40 ml etanolban, 4 ml ciklohcxilaminnal elegyítjük, és 400 ml dietil-éterrel hígítjuk. Beoltás után 10,7 g színtelen fra/íj;-N-(benziioxi-karbonil)-4-feniltio-L-prolin-(ciklohexil-ammónium)-sót kapunk, amelynek olvadáspontja 152—154 °C (zsugorodás: 148 °C). [a]” = —9° (c = 1; metanol).

Ezt a 9,5 g ciklohexil-ammóniumsót 50 ml etil-acetátban szuszpendáljuk, és keverés közben 45 ml 1 n sósavoldattal elegyítjük. A vizes fázist még 3x50 ml etilacetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves rétegeket vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és az oldószert eldesztillálva 8,0 g íransz-N-(benziloxi-karbonil)-4-feniltio-L-proiint kapunk. Rf = 0,67 (szilikagél; diklórmetán: metanol: ecetsav = 90:5:5) kiértékelés ultraibolya fényben.

8,0 g (0,021 mól) tra/uz-N-(benziloxi-karbonil)-4-feniltio-L-prolin 125 ml ecetsavval készített oldatát keverés közben 48 ml tömény sósavoldattal elegyítjük, és 1 órán át melegítjük visszafolyó hűtő alatt. A közel színtelen oldatot lehűtjük, és a savak nagyrészét rotációs bepárlón

26,6 Pa (0,2 mmHg) nyomáson eldesztillálva szilárd maradékot kapunk. Ezt 150 ml izopropanol alatt eldörzsöljük, és a bcpárlást megismételjük. Végül a szilárd anyagot 300 ml dietil-éter alatt szétdörzsöljük, nitrogéngáz alatt szűrjük, és vákuumban szárítjuk. így 5,4 g közel színtelen tra/tsz-4-feniltio-L-prolin-hidrokloridot ka-6