185928. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4-helyettesített 1-béta-D-ribofuranozil-1H-imidazo-[4,5-c] piridinek előállítására
1 185 928 2 színű frakciókat egyesítjük és vákuumban a propanol jelentős részét lepároljuk. A visszamaradó részből a vizet liofilizálással távolítjuk el, és így 2,9 g cím szerinti vegyületet kapunk. A hozam 44%. Analízis: CuHi2C1N303 Elméleti: C 46,24; H 4,23; N 14,70; Cl 12,41; Talált: C 46,32; H 4,26; N 14,66; Cl 12,38; (%) UV spektrum (nm): Oldószer max. min. váll. 0,1 n HC1 257,266 236 273 0,1 n NaOH 274 235 260,269 Vékonyrétegkromatográfiásan - cellulózlemezen 2:79:19 arányú n-propanol - telített vizes ammónium-szulfát - 1 n nátrium-acetát oldószereleggyel egységes. M 3. példa 4~amino~l~$~ribofuranozil-lH~imidazo[ 4,5-c Jpiridin előállítása a 4-klór analógból a) 4-hidrazino-intermedieren keresztül 1 g (3,5 mmól) 2. példa szerinti klórszármazékot 40 ml hidrazinhidráttal nitrogénatmoszférában visszafolyás közben 1 órán át forralunk. A kapott oldatot vákuumban szárazra pároljuk és a maradékot 80 ml oxigénmentesített vízben feloldjuk. Ezután 3,8 g Raney nikkelt (nedvesen mérjük) adunk hozzá, 1 órán át visszafolyatás közben forraljuk és celit-ágyon szűrjük. A katalizátort forró vízzel alaposan mossuk. A szürletet és mosófolyadékot vákuumban szárazra pároljuk, a kapott maradékot vízben ismét feloldjuk, 1 ml ammónium-szulfid oldatot adunk hozzá. Ezután vákuumban szűrjük és liofilizáljuk. A kapott színes anyagot vízben feloldjuk és cellulózon vízzel kromatografáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot szilikagélen kloroform-metanoleleggyel kromatografáljuk. A megfelelő frakciókat egyesítjük,a vákuumban szárazra pároljuk és a kapott maradékhoz metanolt adunk, így 0,51 g szilárd anyagot kapunk, melyet vízben feloldunk és hidrogén-szulfid gázzal kezeljük. Az állás után kapott csapadékot szűrjük és a szűrletet liofilizáljuk, majd ismét vízben oldjuk és Dowex- 50-H+ töltőanyagot tartalmazó oszlopra visszük. Vízzel való alapos mosást követően az anyagot 0,5 n ammónium-hidroxid oldattal eluáljuk. A frakciókat egyesítjük, vákuumban bepároljuk és a kapott maradékot vízből átkristályosítjuk. így 0,23 g (0,86 mmól, 25%) cím szerinti vegyületet kapunk. Analízis: C n H, 4N404 Elméleti: C 49,62: H 5,30: N 21,04; Talált: C 49,36: H 5,12: N 21,01; Q£) A termék UV spektruma megegyezik az 1. példa szerinti termékével, b) 4-benzil-intermedieren keresztül 28,57 g 2. példa szerinti vegyületet és 26,75 g benzil-amint 142 ml 2-etoxietanolban nitrogénatmoszférában visszafolyás közben 18 órán át forralunk. Ezután a reakcióelegyet szárazra pároljuk és a maradékot SD3A-víz 1:1 arányú (térfogatra vonatkoztatottan) elegyből kétszer átkristályosítjuk, így 28,23 g 4-benzilamino-l-ß-D-ribofurazonillH-imidazo(4,5-c)piridint kapunk. E vegyület 28,1 g-ját 350 ml meleg 2-metoxietanolban feloldjuk, és 5 g 2-metoxietanolban szuszpendált 20%-os szénhordozós palládium-hidroxid katalizátort (Pd(OH)2C) adunk hozzá, és 3 napon át 55 °C hőmérsékleten, az atmoszférikusnál kissé nagyobb nyomáson hidrogénezzük. Ezután szűrjük, szárazra pároljuk, a maradékot 600 ml forró vízzel keverjük, majd 20 °C hőmérsékletre hűtjük és szűrjük. A szűrletet etil-acetáttal kimerítően extraháljuk, az extraktumot eldobjuk és a szűrletet körülbelül 100 ml-re bepároljuk, lehűtjük. így a kívánt terméket kapjuk, melyet szűréssel különítünk el. A szűrlet pH-ját pH= 10-re beállítva, majd az oldatot betöményítve még égy generációt kapunk, melyet vízből átkristályosítunk és az első generációval egyesítünk. Ezt követően 200 ml SD3A-víz 1:1 arányú elegyből (térfogatra vonatkoztatottan) az egyesített csapadékokat átkristályosítjuk és így 12,5 g cím szerinti vegyületet kapunk. A hozam 47%. A termék UV spektruma megegyezik az 1. példa szerinti termékével. 4. példa 4-benzil-amino-J'ß'D-ribofurazonil-l H-imidazo(4,5-c)piridin a) 4-benzil-amino-lH-imidazo(4,5-c)piridin 2 g (13 mmól) klór-lH-imidazo(4,5-c)piridin, 5 ml benzil-amin és néhány csepp víz elegyét 4 napon át visszafolyás közben forraljuk. Majd a reakcióelegyet jég és víz elegyére öntjük, és hidegen éterrel kétszer extraháljuk. Az éteres fázist vákuumban bepároljuk - az éter eltávolítása céljából - és a kapott olajat kétszer hexánnal kezeljük, majd vízben szuszpendáljuk és a vizes fázist jégecettel semlegesítjük. A vizes fázist vákuumban szárazra pároljuk és 15 ml vízben ismét szuszpendáljuk, majd 10 g Dowex-50-H+ gyantával töltött oszlopra visszük. Az oszlopot vízzel addig mossuk, míg az elvátumban az UV abszorbencía zérussá nem válik. Ezután az oszloptöltetet az oszlopból eltávolítjuk és 400 ml koncentrált ammónium-hidroxid oldattal több részletben hevítjük, majd szűrjük. Lehűtés után jégecettel semlegesítjük, a kapott sárga csapadékot elkülönítjük és 40 °C-on vákuumban szárítjuk . így 0,94 g (31,5%) 4a pont szerinti intermediert kapunk, melynek olvadáspontja 60-64 °C. Analízis: C13H,2N4 • 0,3 H20 , Elméleti: C 67,88: H 5,53: N 24,40: Talált: C 68,05: H 5,26:.N .24,23: (%) UV adat (nm) : Oldószer Max. Extinkció Váll. 0,1 n HC1 277 13 000 263 0,1 n NaOH 278 11 900 b) 4-benzil-amino-1 -ß-D-ribofuranozil-1 H-imidazo(4,5-c)píridin 4,1 g uridint, 0,68 g 4a pont szerinti vegyületet, 6 ml 0,2 mól/l-es K2HP04 oldatot (pH = 7,4), 6 ml 0,13 mól/l-es Na2EDTA-t, 200 ml vizet, 10 ml n-pr,opanolt, 2800 NE. purin-nukleozid-foszforilázt (1. 1, példa) és 390 NE. uridin-foszforilázt (1. 1. példa) tartalmazó reakcióelegyet 4 napon át 37 °C- on tartunk. A szuszpenziót ezután szűrjük, a csapadékot vízzel mossuk és vákuumban szárítjuk. így 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
