185660. lajstromszámú szabadalom • Eljárás májsejtek szaporodását stimuláló faktor előállítására
185660 2 7. táblázat Beadott injekció: TH-extraktum imájuktól részben megfosztott kísérleti állatok Peyerféle mirigyeiből készített extraktum). N-extraktum (normális kísérleti állatok Peyer-féle mirigyeiből készített extraktum). NND-extraktum (normális kísérleti állatok Peyer-féle mirigyeiből készített extraktum; az extraktum neuraminidázzal kezelve). Kontroll (nátrium-klorid oldat). DNS-szintézis (beütés szám/perc/p gDNS) 348 ± 63 255 ± 74 329 ±59 ; 104 ±22 n — 4 n — 4 n —4 n- 12 Ezzel kimutattuk, hogy az említett extraktumok intraperitonealis injekciója normális állatoknál a DNS-szintézis jelentős fokozódásához vezet, ami a maga részéről sejtosztódás és ezzel sejtosztódás útján való májnövekedés szükséges előfeltétele. Emellett különleges jelentőségű, hogy a N- és az NND-extraktummal, azaz normális kísérleti állatok Peyer-féle mirigyeiből származó extraktummal is hatást értünk el. Ez azt jelenti, hogy a hepatopoetin nyerése céljából többé nem szükséges azon állatok májának részleges eltávolítása, amelyekből ezt kinyerjük. Ezzel az előállítás nagyon jelentősen leegyszerűsödik, és ezzel megnyílik az a lehetőség is, hogy "vágóállatokból a Peyer-féle mirigyeket operációval elkülönítsük, és ebből nyerjük ki a hepatopoetint. Ez ismételten jelentős egyszerűsítést jelent az előállításban. Annak a ténynek az igazolására, hogy a Peyer-féle mirigyek a májsejtek szaporodása szempontjából a vázolt jelentőséggel rendelkeznek, még a következő kísérleteket végeztük: Az altesti részben részletekben különböző szerveket távolítottunk el. az ilyen állatoknál utána részleges májeltávolítást hajtottunk végre, és vizsgáltuk az erre fellépő reakciót. Ezen célból 200 g súlyú nőstény SPF-Wistar patkányokon a következő szerveltávolításokat végeztük, és pótlólag még 70%-os részleges májeltávolitást hajtottunk végre rajtuk: a) Ileotransversotomia (csípőbél átmetszés) (Schein-operáció). A distalis ileum feltárása után, körülbelül 4 cm-rel a vastagbélbe való beszájadzás előtt, a distalis ileumcsonkon egy vakelzárást végzünk. Utána az oralis ileumcsonkon körülbelül 2 cm-re aboralisan az ileocoecalis szöglettől seromuscularis varrástechnikával csípőbélsipolyt készítettünk. (A 2. táblázatban: Ileo). b) Részleges ileo-colektomia. Először feltártuk az ileocoecalis szögletet. Gondos érlekötés után kivágtuk a distalis ileumból körülbelül 4 cm-es és a proximalis vastagbélből körülbelül 2 ernes részt. Végül seromuscularis betüremkedéses varrat segítségével az ileumcsonk „vég a véghez” összeszájadzását hoztuk létre a vastagbélcsonkkal. Ily módon tehát eltávolítottuk az ileumnak azt a részét, amely a Peyer-féle mirigyeket tartalmazza. (A következőkben: Il-Co). c) A Peyer-féle mirigyek eltávolítása. Először az egész vékonybelet feltárjuk. A Peyer-féle mirigyek megkeresése után az ileocoecalis szöglettől kiindulva a szájnyílás felé eső irányban ékalakú kimetszést végzünk, és a bél „vég a véghez” egyesítését végezzük seromuscularis varrástechnika segítségével. Átlagosan 6 areolát metszünk ki. (A következőkben: PD). d) Vastagbél kimetszés. A vastagbél-feltárás után a vastagbél körülbelül 3 cm-es szakaszát metsszük ki az ileocoecalis szöglettől aboralisan. Ezután a két vastagbélcsonkot „vég a véghez” újból egyesítjük. (A továbbiakban: Co). e) Mesenterialis nyirokcsomó extirpatio (bélfodori nyirokcsomók teljes kiirtása). Elsőként elvégezzük a bélfodori nyirokcsomólánc feltárását, amely az ileocoecalis szöglettől a bélfodorgyökig húzódik. Utána az egyes nyirokcsomókat lépésenként elkülönítjük, majd áz érkaput lekötjük, és végül a nyirokcsomókat kivágjuk. Ezzel tehát a Peyerféle mirigyekkel szomszédos hasonló nyiroksejtterületet eltávolítjuk, a Peyer-féle mirigyeket magukat viszont meghagyjuk. (A következőkben: MLK). f) Röntgenbesugárzás. Az egész bélrendszer feltárása után a patkányokat vastag ólomlappal lefedjük. Egy keskeny résen át előhúzzuk ugyanazt a bélterületet, amelyen az ileo-colektomiát végeztük. Utána a patkányokat 8 percig összesen 400 R-rel besugározzuk. Ezután minden rétegre kiterjedő seblezárás történik. (A következőkben: Rönt.). A Schein-operáció szintén kontroli-célokból tőrön tént, hogy a megfigyelt hatást a narkózis, a szervekre való hideg-behatás, operatív sokk vagy hasonló következményeként kizárjuk. Azon célból, hogy ezeknél az állatoknál a DNS- szintézist is megfigyelhessük, az operáció után 21 órán -, val mindegyiküknek 50 pCi 3H-timidint adtunk injek-20 25 30 35 ‘10 45 50 55 4
