185660. lajstromszámú szabadalom • Eljárás májsejtek szaporodását stimuláló faktor előállítására
1 185 660 2 dóban. Pontosan egy órával később a patkányokat leöltük. A májat eltávolítottuk, és után a már fentebb vázolt módon meghatároztuk a szaporodási hányadost. A 2. táblázatból látható, az eltávolítási módtól füg- 5 gően különböző regenerációs válaszokat kaptuk. 2. táblázat: Kezelés Ileo Il-Co PD Co MLK Röntg. faji. aktivitás 889 216 130 912 991 1246 beütés/perc/ pg DNS-ben S±SD ±167 ±116 ±46 ±99 ±139 ±220 n 8 5 5 5 4 6 A kontrolloperációra (Ileo) vonatkoztatva tehát az ileo-colektomiánál (Il-Co) 24 ± 11%-ra csökkent regeneráció jelentkezett, a Peyer-féle mirigyek eltávolí- 20 tásánál viszont még csak 18 ± 5°7o-os regeneráció. Olyan eltávolítások esetében, amelyek a Peyer-féle mirigyeket meghagyják (Co, MLK) nem jelentkezett csökkent regeneráció. A röntgenbesugárzás esetében viszont még valamennyire fokozódott regeneráció je- 25 lentkezett. Ez valószínűleg azzal magyarázható, hogy a röntgenbesugárzás a szövetek roncsolásávai a faktort felszabadítja. Ez a kísérlet megerősíti a Peyer-féle mirigyek jelentőségét. Hogy ezekben mindenesetre nem csak egy a 30 hepatopoetin képződése vagy a májban regenerációs válasz fellépése szempontjából döntő folyamat megy végbe, hanem ténylegesen magának a hepatopoetinnek a termelése történik, az mindenesetre csak az ezekből a Peyer-féle mirigyekből kinyert extraktum hatásának fentebb tárgyalt vizsgálataiból derül ki. A kapott eredményekből továbbá jelentős az, hogy az extraktum mind neuraminidázzal való utólagos kezelés nélkül, mind neuraminidázzal való utólagos kezeléssel a szaporodási hányados vázolt emelkedését okozza. Ebből arra kell következtetni, hogy az extraktum mind az előfaktort (amelyből neuraminidázzal maga a tulajdonképpeni faktor keletkezik) mind magút a faktort (amely neuraminsavmentes, és ezért neuraminidázzal való kezeléssel már nem változik) tartalmazza. Ez talán arra az elképzelésre ad okot, hogy mindkét anyagot, nevezetesen mind magát a faktort, mind az előfaktort a Peyer-féle mirigyek termelik. Ezek azután a vena portae-n keresztül jutnak a májba. A máj magát a faktort befogja, míg az előfaktort a vérkeringésbe átadja, úgy hogy az a plazmában van jelen, és neuriminidáz hatása után a faktort szolgáltatja. Ez magyarázná, hogy a keringő vérplazmában csak az előfaktor található, maga a faktor azonban nem. Szabadalmi igénypont Eljárás májsejtek szaporodását stimuláló, 30000— 50000 D molekulasúlyú neuraminsavmentes proteinből, vagy proteidből álló faktor előállítására, azzal jellemezve, hogy — kívánt esetben májuktól részben megfosztott — kísérleti állatok Peyer-féle mirigyeit homogenizáljuk, a pH-t 5,5-re állítjuk, 95 °C-on hővel denaturáljuk és centrifugáljuk, majd a faktort tartalmazó felülúszót elkülönítjük, és kívánt esetben a felüt úszót neuraminidázzal neuraminsavmentesítjük. Ábra nélkül 5
