185610. lajstromszámú szabadalom • Nem karogén tulajdonságú hidrogénezett keményítőhidrolizátum és eljárás annak előállítására
1 185 610 2 zátumot (gy /3-amiláz és egy, az amilopektin 1—6 kötéseit hidroluáló enzim hatásának vetjük alá. Egy máik eljárás szerint lehetséges az a-amil ázzál történő keznás elhagyása úgy, hogy a savas vagy enzimes úton kapott, 10-27 DE-értékű előhidrolizátumot 45— 48-ig terjedő DE-értékű j3-amiláz segítségével elcukrosítjuk, és egy előnyösen kalcium formájú kationos gyantán vagy molekulaszűrőn történő átáramoltatással frakcionáljuk. A frakcionálás célja a 20-nál nagyobb polimerizációs fokú poliszacharidok eltávolítása. Az így kapott szirupokat hidrogénezzük. Ezenkívül folyamodhatunk olyan frakcionáló eljárásokhoz, melyek során kationos gyantán vagy molekulaszűrőn történő átáramoltatással a hidrolizátumból eltávolítjuk az 1 polimerizációs fokú frakciót. Az 1 polimerizációs fokú frakció csökkentését élesztővel történő kezeléssel is elvégezhetjük. A hidrogénezést a Raney-nikkel eljárással végezhetjük el. A fent említett, különböző enzimes kezelések körülményeit és az enzimek mennyiségét előnyösen az alábbiak közül választjuk ki:- /3-amiláz: 1 kg szárazanyagra vonatkoztatva 200-700 nemzetközi egység, hőmérséklet 50-60 °C, a művelet időtartama 30-72 óra;- a-amiláz: egy kg szárazanyagra vonatkoztatva 16 000-48 000 nemzetközi egység, 5,0-6,0 pH, 50—60 °C, a kezelés időtartama 16—30 óra;- az 1—6 kötéseket hidroiizáló enzim: 1 kg szárazanyagra vonatkoztatva 80—150 nemzetközi egység, 1 kg szárazanyagra vonatkoztatva 15-100 nemzetközi egység /í-amiláz jelenlétében, 5,0-6,0 pH, 50-60 °C, a kezelés időtartama 24—48 óra. A 10—35 DE-értékű előhidrolizátum előállításához kiindulási anyagként felhasználhatunk mindenféle keményítőt, burgonya keményítőt, manióka keményítőt, búzát stb. Az alkalmazható enzimek a következők lehetnek:- a 0-amilázt illetően a maláta extraktum forma,- az a-amil azok közül azok, amelyeket a Bacillus subtilis-bó'l vagy a licheniformisból nyerünk ki,- az 1-6 kötéseket hidroiizáló enzimek közül a pullulanáz vagy az izoamiláz. A 0-amiláznak az előzetesen savas vagy enzimes úton cseppfolyósított keményítőre való hatása körülbelül 35-55 %-nyi maltóz képződésében nyilvánul meg. Az a-amiláz hatására a 20-nál magasabb polimerizációs fokú molekulák oligoszacharidokká, pontosabban 6—8 polimerizációs fokú oligoszacharidokká alakulnak át. Az a-amilázos kezelés után még megmaradt, magas polimerizációs fokú, 1-6 kötéseket tartalmazó molekulák szükség esetén egy 1-6 kötéseket bontó enzim segítségével hidrolizálhatók. Az így nyert kisebb molekulák már ismét egy olyan anyagot képeznek, amely alkalmas a d-amilázos kezelésre. A j8-amilázzal való elcukrosítással kapott hidrolizátumot a már említett kivitelezési formában megvalósított fi akciónál ássál megtisztítjuk a magas polimerizációs fokú poliszacharidoktól, és kationos gyantán vagy molekulaszűrőn való átáramoltatással tisztítjuk. A találmány szerinti eljárás előnyös megvalósítása során — amely lehetővé teszi egy olyan nem kariogén tulajdonságú hidrogénezett keményítőhidrolizátum előállítását, amely kis százalékban tartalmaz 20-nál magasabb polimerizációs fokú poliolokat, további kis százalékban erősen nedvszívó szorbitot, valamint magas százalékban maititot. mely alkotórészek határozott édes ízt, valamint a szilárd édességek gyártásához kielégítő szerkezetet és halmazállapotot biztosítanak - a savas úton kapott, 17-27 DE-értékű keményítő-előhidrolizáturnot egymást követően- 0-amilázzal, majd- a-amilázzal kezeljük. A két enzimes kezelés körülményeit az előzőekben megadó! : határokon belül választjuk meg. és az így kapott végső hidrolizátumokat a hagyományos Raney-nikkel módszerrel hidrogénezzük. Az így kapott hidrogénezett hidrolizáíum nem kariogén tulajdonságú, és az alábbi összetétellel rendelkezik:- előnyösen 3 %-nál, különösen előnyösen 1,5%-nál kevesebb 20-nál magasabb polimerizációs fokú poliolok,- előnyösen4-14%, különösen előnyösen 5—8% szorbit,- előnyösen 45-60%, előnyösen, különösen előnyösen 50-53% maltit, - a 100%-hoz szükséges mennyiségben 3-20 polimerizációs fokú poliolok keveréke. A bidrolízátum tiszta szirupot alkot, melynek 20 C-on és '’4% szárazanyagtartalom mellett mért viszkozitása 1500-2100 centipoise. A találmány szerinti nem kariogén tulajdonságú hidrogén ezett keményítő hidrolizáíum előnyösen 70—80% szárazanyag tartalmú szirup, de előállítható erősen nedvszívó fehér por formájában is. Az utóbbit porlasztásos szántással vagy a bepárlással megszilárdított hidrolizátuiTi szabályozott hőmérsékleten történő őrlésével és ezt követő hűtésével állíthatjuk elő. Az előállított hidrogénezett hidrolizátumok nem kar.ogén jellegének ellenőrzése céljából egy egyszerű vizsgálathoz folyamodunk, amely azon a megfigyelésen alapul, hogy nem kariogén terméket a száj baktériumai nen támadják meg, és szükségszerűen nem következik be elsavasodás, amely a fogak felületét megtámadja, ezáltal fogkárosodásokat okoz. Egy egyszerű vizsgálatot fejlesztettünk ki, amellyel in vitro meghatározzuk ezt az eisavasodást. A vizsgálat során több donortól szármaró nyállal beoltott táptalaj mintákhoz hozzáadjuk a vizsgálandó édesítőszert, és kiértékeljük a pH időbeni csökkenését, és Összehasonlítjuk olyan táptalajok pH- jávil. amelyek nem tartalmaznak édesítőszert. Ez a vizsgálat nem alkalmas arra, hogy egy anyag nem kariogén tulajdonságát abszolút módon jellemezze, mi ithogy az eredményeket a felhasznált nyál minősége is befolyásolhatja, mindazonáltal értékes összehasonlításokat tesz lehetővé különböző termékek között. Ennek a vizsgálatnak a kivitelezése során az alábbiak szerint járunk el. Tubusokba egyenként 10-10 ml táptalajt (2% szárazán/ag tartalmú TRYPTICASE táptalajt; a BIO-MERIEUX francia cég által forgalmazott, kazeinból származó triptikus pepton) helyezünk. A minták nem tartalmaznak cuxrot, pH-értékük 7, és a tubosokat autokiávban sterilizáljuk 120 °C-on 20 percig. Az első öt - kontroll célját szolgáló - tubushoz 1-1 ml steril vizet adagolunk. A második öt tubushoz a vizsgálandó termék 18 tf %- os oldatából 1-1 ml-t adagolunk. Mindkét sorozatból 4- 4 tubust veszünk, melyekhez egyenként, azonos mennyiségű, tubusonként 0,2 ml mennyiségű hígított 1 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65