185362. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 6-(alfa-amino-fenil-acetamido)- ill 6[alfa-amino-(p-hidroxi-fenil) acetamido]-2,2-dimetilenam-3-karbonsav előállításáraa 6-trimetilszilil-oxi-karbonilamino-1,1-dimetil-penam-3-karbonsav-származékokon keresztül
1 185 362 2 310 perces reagáltatás után az NMR-vizsgálat körülbelül 78% amoxicillint és körülbelül 20% 6-aminopenicillánsavat mutat. 10,0 g (46,24 millimól) száraz 6-amino-penicíllánsavat kevertetés közben 175 ml vízmentes diklór-metánban szuszpendálunk 25 °C hőmérsékleten. Hozzáadunk 10 10,76 g (106,36 millimól, 2,30 egyenérték) trietil-amint, majd 10-15 perc alatt 11,70 g (107,75 millimól, 2,33 egyenérték) trimetil-klór-szilánt olyan ütemben, hogy az elegy hőmérséklete ne lépje túl a 32 °C-ot. 20-30 perces kevertetés után a kivált trietil-amin-hidrokloridot 15 tartalmazó elegyet 80 MHz-es NMR-spektroszkópiás módszerrel a szililezés mértékére vizsgáljuk. Utána 20 °C hőmérsékleten 2 órán át szén-dioxid-gázt vezetünk bele, majd ugyanezzel a módszerrel a karboxilezés mértékére vizsgáljuk. Egyes esetekben a gázbevezetést még foly- 20 tatni kell. Szükség esetén az elegy térfogatát vízmentes diklór-metánnal 175 ml-re egészítjük ki. Amikor a szükséges mennyiségű széndioxid beépült, a szuszpenzióhoz hozzáadunk 2,95 g (3,56 ml, 50,87 millimól, 1,1 egyenérték) propilén-oxidot, és 0-5 °C hőmérsékletre hűtjük. 25 Öt, egyenként 2,71 g súlyú részletben, körülbelül 2 °C hőmérsékleten beadagolunk 13,54 g (50,87 millimól, 1,1 egyenérték) D-(-)-2*(p-hidroxi-fenil)-glicil-kloridhidroklorid-hemidioxán-szolvátot oly módon, hogy a savklorid minden egyes adagja után megvárjuk, hogy ez 30 beoldódjék, és csak azután adjuk hozzá a következő adagot. (A feloldódás ellenőrzésére leállítjuk a keverést, és megfigyeljük, hogy van-e még szilárd anyag a lombik alján. Ennek során nem szabad az elegy hőmérsékletét 5 °C fölé engednünk, különben téves eredményeket 35 kapunk.) Az egyes részletek beoldódásához körülbelül 20 percre van szükség. Nagyon lényeges, hogy a savkloridot így, részletekben adagoljuk az elegybe. Az utolsó adag után is ellenőrizzük, nincs-e oldatlan rész az elegyben. Fél órán át 0-5 °C hőmérsékleten tartjuk, 40 utána hozzáadunk 100 ml hideg (0-5 °C-os) ionmentesített vizet és nagy fordulatszámmal 10 percig kevertetjük. A fázisok szétválása után az alsó, diklór-metános fázist leengedjük, a vizes oldatból a nagyon kevés oldatlan részt egy vékony diatomaföld-rétegen (Dicalite) átszűr- 45 jük, és a réteget 15 ml hideg (0-5 °C-os) ionmentesített vízzel kimossuk. A kristályosítás előtt az esetleg még jelenlévő alsó szerves fázist teljesen eltávolítjuk. A tiszta, világossárga színű vizes oldat (pH = 2-2,5) pH-ját 3,5-re állítjuk be, és szükség esetén beoltjuk. A szuszpenziót 50 40 percen át 0—5 °C hőmérsékleten tartjuk, majd pH-ját 6 normál ammónium-hidroxid-oldattal 4,8-5,0-re állítjuk be. 2 órán át hagyjuk kristályosodni, a szilárd amoxicillint kiszűrjük, izopropanol és víz 1 :1 arányú hideg (0-5 °C) elegyével, majd 30 ml diklór-metánnal 55 kimossuk, és ily módon körülbelül 13,5 g (körülbelül 70%) hófehér színű amoxicillin-trihidrátot nyerünk. 6. példa 5° 108 g (0,5 mól) 6-amino-penicillánsav, 1,0 g (0,017 mól) imidazol, 800 ml vízmentes diklór-metán és 120 ml (0,56 mól) körülbelül 98%-os tisztaságú hexametil-diszilazán elegyét kevertetés közben 3,3 órán át forraljuk, 55 miközben a keletkező ammónia eltávolítása céljából álland óan nitrogén-gázt vezetünk bele. Utána hozzáadunk 2,0 ml (0,016 mól) trimetil-klór-szilánt, és nitrogén bevezetés mellett további 19 órán át forraljuk. A hűtőbe szublimált ammónium-kloridot eltávolítjuk, és az elegyhez hozzáadunk további 2,6 ml (0,0206 mól) trimetilklór-szilánt. Nitrogén-bevezetés mellett további 34 órán át forraljuk. Utána a reakcióelegy térfogatát vízmentes diklór metánnal 1000 ml-re egészítjük ki. Az NMR- vizsgálat azt mutatja, hogy a 6-amino-penicülánsav amino és karboxilcsoportja 100%-osan szilileződött. Az oldat fölé nitrogént vezetünk, lezárjuk, és 9 napig állni hagyjuk. Az újabb NMR vizsgálat megerősíti a fenti eredményt, és az oldat stabilitását. Ezután kevertetés közben másfél órán át szén-dioxid-gázt vezetünk bele 20-22 °C hőmérsékleten. Az NMR-vizsgálat szerint a 6-tnmetil-szilil-amino-penicillánsav-trimetil-szilil-észter teljes egészében átalakul 6-(trimetil-szililoxi-karbonilamino)-penicillánsav-trimetil-szilil-észterré (III képlet). Ezt a törzsoldatot használjuk az alább leírt acilezési reakciókhoz. Az NMR-vizsgálat azt mutatja, hogy az oldat S napig változás nélkül eltartható. A fenti törzsoldat 100 ml térfogatú részletéhez (ez megfelel 0,05 mól 6-(trimetil-szi!iloxi-karbonil-amino)penicil'ánsav-trimetil-szilil-észternek) kevertetés közben, 22 °C hőmérsékleten hozzáadunk 8,0 g (0,058 mól) trietil-ímin-hidrokloridot és 4,2 ml (0,06 mól) propilén-oxiiot (lásd a 3 471 959 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást). Kevés trietil-amin-hidroklorid kiválik az elegyből. Az elegyet kevertetés közben T3°C hőmérsékletre hűtjük, és az alábbi ütemben hozzáadunk 15,5 g (0,055 mól) 79%-os tisztaságú D-(-)-7-(p-hidroxi-fenil)-glicil-klorid-hidcoklorid-hemidioxán-szolvátot: Hozzáadott Idő Hőmérséklet anyag (g) (perc) (°C) 3,0 0 3 3,0 7 ■ 2 3,0 20 2 6,5 33 2 15,5 További 70 perces kevertetés után az elegy viszkozitásának csökkentése céljából hozzáadunk körülbelül 50 ml vízmentes diklór-metánt. További 160 perces kevertetés után az elegyből kiveszünk egy 2 ml térfogatú mintát és hozzáadunk 1,0 ml deutérium-oxidot. Centrifugálás után a vizes fázis NMR- vizsgála‘a körülbelül 6% acilezetlen 6-amino-penicillánsavatjelez. 10 perccel később az elegyet átöntjük egy 600 ml térfogatú főzőpohárba, és 50 ml diklór-metánnal bemossuk. Jeges fürdőben kevertetve hozzáadunk 60 ml hideg, ionmenlesített vizet, így oldatlan szilárd részt nem tartalmazó, kétfázisú, 1,0-es pH-jú elegyhez jutunk. A kétfázisú rendszerhez kevertetés közben hozzáadunk 15,0 ml folyékony anioncserélő gyantát („LA-1”), és 2,0-es pH-értéknél beoltjuk, ekkor a kristályosodás megindil. Utána lassan, körülbelül 5 perc alatt hozzáadunk további 10 ml LA-l-et, ekkor az elegy pH-ja3,0. Ezután hozzáadunk 0,15 g nátrium-bórhidridet, majd 5,0 ml LA-l-et, ekkor az elegy pH-ja 4.5. További keveitetés közben az elegyhez cseppenként hozzáadjuk 1,0 g
