185323. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetrapeptid-karbonsav-hidrazidok előállítására
1 185 523 2 A találmány tárgya új tetrapeptid-karbonsav-hidrazidok szintézisére és az ezekből készíthető fájdalomcsillapítóra vonatkozik. Hughes és mtsai. [Natura 258, (1975)] disznóagyvelöből egy pentapeptid párt izoláltak, ami agy velő be való bejuttatás esetében morfomimetikus hatást mutattak. Kémiai szerkezetük az alábbi: H-Tyr-Gly-Phe-Met-OH és H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-OH. Ezek az anyagok közvetlenül az agyba juttatás esetén morfomimetikus hatásúak, ugyanakkor intravénás adagolás esetén fájdalomcsillapító hatás nem tapasztalható. A másik ismert pepiid típusú fájdalomcsillapító, a j3-endorfin, határozott fájdalomcsillapító hatású intravénás adagolás esetén is. Ez az anyag azonban 31 aminosavat tartalmazó polipeptid, így szintézise olyan bonyolult, hogy a gyógyászat számára elegendő mennyiségű ipari előállítása csaknem lehetetlen. Arra törekedtünk, hogy olyan anyagot találjunk, amely gazdaságosan előállítható, kémiailag stabil és mind orális, mind intravénás, illetve szubkután adagolás esetén megfelelő fájdalomcsillapító hatással rendelkezik. Vizsgálataink azt mutatták, hogy bizonyos tetrapeptid-karbonsav-hidrazidok megfelelnek a fenti követelményeknek. Ezekkel kapcsolatban további kutatásokat végeztünk, melynek eredménye a találmány szerinti eljárással előállított I általános képletű vegyület. A találmány tárgya, eljárás az I általános képletű tetrapeptid-karbonsav-hidrazid — amely képletben R2 jelentése 1 -5 szánatomszámú alkilcsoport; - valamint gyógyászatban alkalmazható savaddíciós sóinak előállítására. Az I általános képletű tetrapeptid-karbonsav-hidrazidot a találmány szerinti eljárással úgy állítjuk elő, hogy valamely II általános képletű vegyület - amely képletben R2 jelentése 1—5 szénatomszámú alkilcsoport, Yi jelentése a peptidkámiában szokásos védőcsoport, Y2 jelentése hidrogénatom vagy a peptidkémiában szokásos védőcsoport — védőcsoportját vagy védőcsoportjait eltávolítjuk. A találmány olyan fájdalomcsillapító előállítási eljárásra vonatkozik, amely az I általános képletű tetrapeptid-karbonsav-hidrazidot vagy annak farmakológiailag elfogadható savaddíciós sóját tartalmazza hatóanyagként. A leírásban az aminosavak és peptidek jelölésére vagy a szakirodalomban általánosan használt rövidítéseket vagy a 1UPAC—IUB Kémiai Nomenklatúra Bizottság által előírt rövidítéseket alkalmazzuk. Néhányat ezek közül az alábbiakban felsorolunk. Alá: aianin Gly: glicin Len: leucin Phe: fenil-alanin Met(O): metionin-szulfoxid EtPhe: N-etil-fenil-alanin Tyr: tirozin MeTyr: N-metil-tírozin A leírásban a többször előforduló vegyületeket az alábbi rövidítésekkel jelöljük: DCC: N,N'-diciklohexiI-karbodiimid HONB: N-hidroxi-5-norbornén-2,3-díkarboximid ONB: HONB észter Z: benzil-oxi-karbonil-csoport BOC: terc-butoxi-karbonil-csoport But: terc-butil-csoport DMF: dimetil-formamid Bzh benzilcsoport HOBT: N-hidroxi-benzotriazol MeOH: metanol AcOEt: etil-acetát TEA: trietil-amin THF: tetrahidrofurán TFA: trifluor-ecetsav A leírásban a fenti rövidítéssel jelzett bármely amínosav vagy aminosavrész, hacsak ezt másképp nem jelöljük, annak L-formáját jelenti, az aminosavak és aminosavrészek D-formáját (D)- vagy D-jelzéssel különböztetjük meg.’ Az I általános képletű vegyületben az R2 jelentése 1-5 szénatomszámú alkilcsoport, ígymetil-, etil-, propil-, izopropil-, butil-, izobutil-, pentil-, izopentilcsoport. A fentiekben említett II általános képletű vegyületben Y, védőcsoportként benzil-oxi-karbonil-, terc-butoxi-karbonil-, terc-amil-oxi-karbonil-, izobornil-oxi-karbonil-, adamantil-oxi-karbonil-csoport, klóratommal vagy nitrocsoporttal szubsztituált benzil-oxi-karbonil-csoport, o-fenil-tio-csoport, difenil-foszfinometil csoport lehet. Az Y2 védőcsoport lehet például benzil- és terc-butilcsoport. Az I általános képletű peptidszármazékot a polipeptidrész és a megfelelő szerkezetű aminosav vagy peptid fragmens kondenzációjával lehet előállítani. Az alábbi lehetséges módszerek alkalmazhatók erre a célra: Bodansky, M., Ondetti, M. A.: Peptide Synthesis, Interscience, New York, 1966; Finn, F. M., Hofmann, K.: The Proteins, 2. k. H. Neurath, R. L. Hill, Academie Press Inc., New York, 1976; Nobuo Izumiya és mtsai. Peptide Gosei (Peptide Synthesis), Maruzen Inc., 1975, által leírt módszerek. Ezek közül az azid-módszer, klorid-módszer, savanhidrid-módszer, vegyes savanhidridmódszer, DCC-módszer, aktivált észter-módszer, a Woodward-féle K reagenst felhasználó módszer karbodiimida* zol-módszer, és a DCC/HONB-módszer említhetők meg. Vannak esetek, amelyekben az NCA (N-karboxi-anhidrid)-módszer (amelyben az aminosavnak megfelelő védőcsoport nélküli ciklusos karbonilvegyületet használnak) alkalmazható. A kondenzálási reakció előtt a kiindulási anyag azon karboxil- és/vagy aminocsoportjait, amelyek nem vesznek részt a reakcióban, védőcsoporttal látjuk el, és/vagy a kiindulási anyag reakcióban résztvevő karboxil- és/vagy aminocsoportjait előzetesen aktiváljuk. A kiindulási anyag védőcsoportjai a fentiekben említettek lehetnek. A kiindulási anyag karboxilcsoportját fémsó formában (így nátriumsó, káliumsó), terc-alkilaminnal képzett só (így trietil-aminnal, N-metil-morfolinnal képzett só) vagy észter formában (mint pl. metilészter, etilészter, benzilészter, p-nitro-benzilészter, tercbutil-észter) is védhető. A kiindulási anyag aminocsoportjának védőcsoportjaként benzil-oxi-karbonil-, tercbutoxi-karbonil-, izobornil-oxi-karbonil-csoport említhetők. A hisztidin iminocsoportja benzil-, tozil-, 2,4- dinitro-fenil-, terc-butoxi-karbonil- és benzil-oxi-karbonil-csoporttal védhető. A tirozin hidroxilcsoportja benzil- és terc-butil-éter formában védhető. A kiindulási anyag karboxilcsoportjának aktivált formája a megfelelő savanhidrid, savazid, aktivált észter [azaz alkoholokkal képzett észter, (például pentaklórfenol, 2,4,5-triklór-fenol, 2,4-dinitrofenol, ciano-metanol, p-nitro-fenol, N-hidroxi-5-norbornén-2,3-dikarbox-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
